သန့်စင်ခြင်းနည်းလမ်းကား အဘယ်နည်းပရိုတိန်းသန့်စင်မှုစနစ်? သန့်စင်ထားသော ပရိုတင်း၏ coding DNA ၏ ကုဒ်နံပါတ်ကို သိရန်၊ မည်သည့်ဆဲလ်များ သို့မဟုတ် တစ်ရှူးများကို ပစ်မှတ် ဗီဇတွင် လွန်ကဲစွာ ဖော်ပြနေသည်ကို ကြည့်ရန်နှင့် ပစ်မှတ် DNA အပိုင်းအစ၏ arf ကို ချဲ့ထွင်ရန် gene primer ဒီဇိုင်းပြုလုပ်ရန် လိုအပ်ပါသည်။ ဤသည်မှာ ပစ်မှတ် ဗီဇအပိုင်းအစများကို ရယူခြင်းဟု ခေါ်သည်။

expression vector တည်ဆောက်ခြင်း- ရရှိထားသော gene expression ကိုယ်တိုင်၏ ဝိသေသလက္ခဏာများဖြင့် prokaryotic သို့မဟုတ် eukaryotic expression vector တွင်၊ ဤအဆင့်၏ အဓိကပြဿနာမှာ plasmid နှင့် အကျိုးစီးပွားရှိသော gene နှင့် expression system တို့ဖြစ်သည်။ prokaryotic စကားအသုံးအနှုန်းအချိန်သည် တိုတောင်းသည်၊ ကုန်ကျစရိတ်နည်းသည်၊ ပမာဏအများအပြားသည် ဦးစားပေးဖြစ်သည်။ ဗီဇကို E. coli တွင်မဖော်ပြဘဲ codon optimization တွင် ပြဿနာဖြစ်ပေါ်ပါသည်။ ပရိုတင်း၏ ပိုမိုကောင်းမွန်သော လုပ်ဆောင်မှုနှင့် သန့်စင်မှုကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားရာတွင် သုတေသီများသည် Pichi တဆေးကို ဖော်ပြရန် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။ codon optimization ကို အောင်မြင်စွာဖော်ပြခြင်းသည် အရေးကြီးပါသည်။

ပရိုတင်းသန့်စင်မှုစနစ်၏ သန့်စင်ရေးနည်းလမ်းမှာ အဘယ်နည်း။

1. မိုးရွာခြင်း။

2. Electrophoresis- အားသွင်းထားသော ပရိုတိန်းသည် ၎င်း၏ isoelectric point ထက် ပိုမြင့်သည် သို့မဟုတ် နိမ့်ပြီး လျှပ်စစ်စက်ကွင်းရှိ လျှပ်စစ်စက်ကွင်း၏ အနှုတ်လျှပ်ကူးပစ္စည်း သို့မဟုတ် အပြုသဘောဆောင်သော လျှပ်ကူးပစ္စည်းသို့ ရွှေ့နိုင်သည်။ ရုပ်ရှင် electrophoresis၊ electrophoresis စသည်တို့ကို ပံ့ပိုးပေးသည်။

3. Dialysis - ပရိုတင်းများနှင့် သေးငယ်သော မော်လီကျူး အော်ဂဲနစ်ဒြပ်ပေါင်းများ မှ ကြီးမားသော မော်လီကျူးများကို ခွဲထုတ်ရန် dialysis အိတ်နှစ်လုံးကို အသုံးပြုသည့် နည်းလမ်း။

4. Chromatography- Ion exchange chromatography သည် ပရိုတင်းများ၏ အခမဲ့ ဂုဏ်သတ္တိများကို အသုံးပြုသည်။ တိကျသော pH အောက်တွင်၊ ပရိုတိန်းများ၏ စွဲချက်နှင့် ဂုဏ်သတ္တိများ ကွဲပြားကြပြီး ၎င်းတို့ကို ion exchange chromatography ဖြင့် ခွဲခြားနိုင်သည်။ anion exchange chromatography တွင်၊ အနုတ်ပါဝါနည်းပါးသော ပရိုတင်းများကို ဦးစွာဖယ်ထုတ်သည်။ ဂျယ်စစ်ထုတ်ခြင်းဟုလည်း လူသိများသော မော်လီကျူးဆန်ခါများ။ သေးငယ်သော ပရိုတင်းများသည် ချွေးပေါက်များအတွင်းသို့ ဝင်ရောက်ပြီး ၎င်းတို့အတွင်း၌ ကြာရှည်စွာ တည်ရှိနေပါသည်။ ကြီးမားသော ပရိုတင်းများသည် ချွေးပေါက်များအတွင်းသို့ တိုက်ရိုက်မစီးဆင်းနိုင်ပါ။

5. သန့်စင်ခြင်းနည်းလမ်းကား အဘယ်နည်းပရိုတိန်းသန့်စင်မှုစနစ်? Ultracentrifugation- ပရိုတင်းသန့်စင်မှုကို မော်လီကျူးအလေးချိန်ကို ဆုံးဖြတ်ရန် အသုံးပြုနိုင်ပြီး ပရိုတင်းအဖြစ် အသုံးပြုနိုင်သည်။ မတူညီသောသိပ်သည်းဆရှိသော ပရိုတင်းများဖွဲ့စည်းခြင်းကို ခွဲခြားထားသည်။