Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း ကော်လံ ထုတ်ယူနည်းနှင့် နိယာမ

Nucleic acid ကို deoxyribonucleic acid (DNA) နှင့် ribonucleic acid (RNA) ဟူ၍ ပိုင်းခြားထားပြီး ၎င်းတို့တွင် RNA ကို ribosomal RNA (rRNA)၊ messenger RNA (mRNA) နှင့် မတူညီသော လုပ်ဆောင်ချက်များအရ RNA (tRNA) လွှဲပြောင်းနိုင်သည်။

DNA သည် အဓိကအားဖြင့် nucleus၊ mitochondria နှင့် chloroplasts များတွင် အဓိကစုစည်းနေပြီး RNA သည် cytoplasm တွင် အဓိကအားဖြင့် ဖြန့်ဝေပါသည်။

purine bases နှင့် pyrimidine base များသည် nucleic acids တွင် နှစ်ဆနှောင်ကြိုးများ ပေါင်းစပ်ထားသောကြောင့် nucleic acids များသည် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်စုပ်ယူမှု၏လက္ခဏာများရှိသည်။ DNA ဆိုဒီယမ်ဆားများ၏ခရမ်းလွန်စုပ်ယူမှုသည် 260nm ဝန်းကျင်ရှိပြီး ၎င်း၏စုပ်ယူမှုကို A260 အဖြစ်ဖော်ပြပြီး ၎င်းသည် 230nm တွင်စုပ်ယူမှုကျင်းတွင်ရှိနေသောကြောင့် ခရမ်းလွန်ရောင်စဉ်များကိုအသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ Nucleic acids များကို luminometer မှ အရေအတွက်နှင့် အရည်အသွေးအရ ဆုံးဖြတ်သည်။

Nucleic acids များသည် polyacids နှင့် ညီမျှသော ampholytes များဖြစ်သည်။ နျူကလိစ်အက်ဆစ်များကို ကြားနေ သို့မဟုတ် အယ်ကာလိုင်းကြားခံများကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် anion များအဖြစ် ခွဲထုတ်နိုင်ပြီး anode ဆီသို့ ရွေ့လျားရန်အတွက် လျှပ်စစ်စက်ကွင်းတစ်ခုတွင် ထားရှိနိုင်သည်။ ဤသည်မှာ electrophoresis ၏နိယာမဖြစ်သည်။

Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း ကော်လံ ထုတ်ယူနည်းနှင့် နိယာမ

Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းဆိုင်ရာ အခြေခံမူများနှင့် လိုအပ်ချက်များ

1. nucleic acid ၏ မူလဖွဲ့စည်းပုံ၏ ခိုင်မာမှုကို သေချာပါစေ။

2. အခြားသော မော်လီကျူးများ၏ ညစ်ညမ်းမှုကို ဖယ်ရှားပါ (ဥပမာ DNA ထုတ်ယူသည့်အခါ RNA နှောက်ယှက်မှုကို ဖယ်ရှားခြင်း)

3. နျူကလိစ်အက်ဆစ်နမူနာများတွင် အင်ဇိုင်းများကို ဟန့်တားသော သြဂဲနစ်ပျော်ရည်များနှင့် သတ္တုအိုင်းယွန်းများ မြင့်မားစွာပါဝင်မှု မရှိသင့်ပါ။

4. ပရိုတိန်းများ၊ ပိုလီဆာကာရိုက်များနှင့် lipid ကဲ့သို့သော macromolecular ပစ္စည်းများကို တတ်နိုင်သမျှ လျှော့ချပါ

Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းနည်းလမ်း

1. Phenol/chloroform ထုတ်ယူနည်း

၎င်းကို 1956 ခုနှစ်တွင် တီထွင်ခဲ့သည်။ ဆဲလ်ကွဲအရည် သို့မဟုတ် တစ်ရှူးများကို phenol/chloroform ဖြင့် ကုသပြီးနောက်၊ နျူကလိကလစ်အက်ဆစ် အစိတ်အပိုင်းများ အဓိကအားဖြင့် DNA သည် ရေတွင်ပျော်ဝင်သွားပြီး lipid များသည် အော်ဂဲနစ်အဆင့်တွင် အဓိကဖြစ်ပြီး ပရိုတင်းများသည် ၎င်းတို့နှစ်ခုကြားတွင် တည်ရှိသည်။ အဆင့်များ။

2. အရက်သောက်ခြင်း။

အီသနောသည် နူကလိစ်အက်ဆစ်၏ ရေဓာတ်အလွှာကို ဖယ်ရှားနိုင်ပြီး အနုတ်လက္ခဏာရှိသော ဖော့စဖိတ်အုပ်စုကို ဖော်ထုတ်နိုင်ပြီး၊ NA﹢ ကဲ့သို့သော အပြုသဘောဆောင်သော အိုင်ယွန်များသည် မိုးရေခံနိုင်သော ဖော့စဖိတ်အုပ်စုနှင့် ပေါင်းစပ်နိုင်သည်။

3. Chromatographic ကော်လံနည်းလမ်း

အထူးဆီလီကာအခြေခံ စုပ်ယူမှုပစ္စည်းအားဖြင့် DNA သည် အတိအကျ စုပ်ယူနိုင်သော်လည်း RNA နှင့် ပရိုတင်းတို့သည် ချောမွေ့စွာဖြတ်သန်းနိုင်ပြီး၊ ထို့နောက် nucleic acid ချည်နှောင်ရန်အတွက် ဆားနှင့် pH နိမ့်သောဆားကို အသုံးပြုကာ နျူကလိယကို ခွဲထုတ်ရန်နှင့် သန့်စင်ရန် pH မြင့်မားသော ဆားနှင့် မြင့်မားသော pH တို့ဖြင့် နှုတ်ဆိတ်နေပါသည်။ အက်ဆစ်။

4. အပူကွဲအက်အယ်လကာလီနည်းလမ်း

အယ်ကာလိုင်း ထုတ်ယူခြင်း သည် ၎င်းတို့ကို ခွဲခြားရန် covalently ပိတ်ထားသော စက်ဝိုင်းပတ် ပလပ်စမစ်များနှင့် မျဉ်းသား ခရိုမာတင်တို့ကြား ထိပ်တန်း ခြားနားချက်များကို အသုံးပြုသည်။ အယ်ကာလိုင်းအခြေအနေအောက်တွင်၊ denatured ပရိုတင်းများသည် ပျော်ဝင်နိုင်သည်။

5. ပွက်ပွက်ဆူနေသော pyrolysis နည်းလမ်း

DNA ဖြေရှင်းချက်သည် ပုံမှန်မဟုတ်သော ပရိုတင်းများနှင့် ဆဲလ်လူလာအပျက်အစီးများဖြင့် ဖွဲ့စည်းထားသော မိုးရေစက်များမှ DNA အပိုင်းအစများကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် linear DNA မော်လီကျူးများ၏ ဂုဏ်သတ္တိများကို အခွင့်ကောင်းယူရန် အပူဖြင့် ပြုပြင်ထားသည်။

6. Nanom သံလိုက်ပုတီးနည်းလမ်း

superparamagnetic nanoparticles များ၏ မျက်နှာပြင်ကို မြှင့်တင်ရန်နှင့် ပြုပြင်မွမ်းမံရန် နာနိုနည်းပညာကို အသုံးပြု၍ superparamagnetic silicon အောက်ဆိုဒ် နာနိုသံလိုက်ပုတီးစေ့များကို ပြင်ဆင်ထားပါသည်။ သံလိုက်ပုတီးစေ့များသည် အဏုကြည့်မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် နျူကလိယအက်ဆစ်မော်လီကျူးများနှင့် တိကျစွာသိရှိနိုင်ပြီး ထိရောက်စွာ ချည်နှောင်နိုင်သည်။ Chaotropic ဆားများ (guanidine hydrochloride၊ guanidine isothiocyanate စသည်) နှင့် ပြင်ပသံလိုက်စက်ကွင်း၊ DNA နှင့် RNA ကို သွေး၊ တိရိစ္ဆာန်တစ်သျှူးများ၊ အစားအစာ၊ ရောဂါပိုးရှိသော အဏုဇီဝသက်ရှိများနှင့် အခြားနမူနာများမှ ခွဲထုတ်ထားသည့် silica nanospheres ၏ superparamagnetic ဂုဏ်သတ္တိများကို အသုံးပြုထားသည်။


စာတိုက်အချိန်- မတ်-၁၈-၂၀၂၂