ပရိုတင်းများကို ခွဲထုတ်ခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းအား ဇီဝဓာတုဗေဒ သုတေသနနှင့် အသုံးချမှုတွင် တွင်ကျယ်စွာ အသုံးပြုကြပြီး အရေးကြီးသော လုပ်ငန်းဆောင်ရွက်မှုကျွမ်းကျင်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ ပုံမှန် eukaryotic ကလာပ်စည်းတစ်ခုတွင် မတူညီသောပရိုတိန်းထောင်ပေါင်းများစွာ ပါဝင်နိုင်ပြီး အချို့မှာ အလွန်ကြွယ်ဝပြီး အချို့မှာ ကော်ပီအနည်းငယ်သာ ပါဝင်ပါသည်။ သေချာလေ့လာနိုင်ဖို့ပါ။ပရိုတင်းအခြားပရိုတင်းများနှင့် ပရိုတင်းမဟုတ်သော မော်လီကျူးများမှ ပရိုတင်းကို ဦးစွာ သန့်စင်ရန် လိုအပ်ပါသည်။
1. ဆားထုတ်နည်းပရိုတင်း:
ကြားနေဆားသည် ပရိုတင်း၏ပျော်ဝင်နိုင်မှုအပေါ် သိသာထင်ရှားသောအကျိုးသက်ရောက်မှုရှိသည်။ ယေဘူယျအားဖြင့်၊ ဆားပါဝင်မှုနည်းသော ဆားပါဝင်မှု တိုးလာသည်နှင့်အမျှ ပရိုတင်း၏ပျော်ဝင်နိုင်စွမ်း တိုးလာပါသည်။ ဆားရည်လို့ခေါ်တယ်။ ဆားပြင်းအား ဆက်လက်တိုးလာသောအခါ ပရိုတင်း၏ပျော်ဝင်နိုင်စွမ်းသည် ဒီဂရီအမျိုးမျိုးသို့ ကျဆင်းသွားပြီး တစ်ခုပြီးတစ်ခု ကွဲထွက်သွားသည်။ ဤဖြစ်စဉ်ကို ဆားထုတ်ခြင်းဟုခေါ်သည်။
2. Isoelectric point stacking နည်းလမ်း-
ပရိုတင်းဓာတ်ငြိမ်နေချိန်တွင် အမှုန်များကြားရှိ electrostatic repulsion သည် အသေးငယ်ဆုံးဖြစ်ပြီး ပျော်ဝင်နိုင်မှုမှာလည်း အသေးငယ်ဆုံးဖြစ်သည်။ ပရိုတိန်းအမျိုးမျိုး၏ isoelectric အမှတ်များသည် ကွဲပြားသည်။ ပရိုတိန်း၏ isoelectric point သို့ရောက်ရှိရန် conditioning solution ၏ pH ကို အသုံးပြုနိုင်ပြီး ၎င်းကို စုပြုံအောင်လုပ်ပါ၊ သို့သော် ဤနည်းလမ်းကို တစ်ခုတည်းအသုံးပြုခဲပြီး ဆားထုတ်သည့်နည်းလမ်းနှင့် ပေါင်းစပ်နိုင်ပါသည်။
3. Dialysis နှင့် ultrafiltration-
Dialysis သည် မတူညီသော မော်လီကျူးအရွယ်အစားရှိ ပရိုတင်းများကို ခွဲခြားရန် semi-permeable membrane ကိုအသုံးပြုသည်။ ultrafiltration နည်းလမ်းသည် ရေနှင့် အခြားသေးငယ်သော solute molecules များကို semi-permeable membrane မှတဆင့် ဖြတ်သန်းစေရန် မြင့်မားသောဖိအား သို့မဟုတ် centrifugal force ကိုအသုံးပြုပြီး၊ပရိုတင်းအမြှေးပါးပေါ်တွင်ကျန်ခဲ့သည်။ မတူညီသော မော်လီကျူးအလေးချိန်၏ ပရိုတင်းများကို ကြားဖြတ်ရန် မတူညီသော ချွေးပေါက်အရွယ်အစားကို သင်ရွေးချယ်နိုင်သည်။
4.Gel filtration နည်းလမ်း-
size exclusion chromatography သို့မဟုတ် molecular sieve chromatography ဟုခေါ်သည်၊ ၎င်းသည် မော်လီကျူးအရွယ်အစားအလိုက် ပရိုတိန်းအရောအနှောများကို ပိုင်းခြားရန် အသုံးဝင်ဆုံးနည်းလမ်းများထဲမှတစ်ခုဖြစ်သည်။ ကော်လံတွင် အသုံးများသော ထုပ်ပိုးပစ္စည်းများမှာ ဂလူးကို့စ်ဂျယ် (Sephadex ged) နှင့် agarose gel (agarose gel) တို့ဖြစ်သည်။
5.Electrophoresis-
တူညီသော pH အခြေအနေအောက်တွင်၊ ၎င်းတို့၏ မတူညီသော မော်လီကျူးအလေးချိန်နှင့် လျှပ်စစ်စက်ကွင်းရှိ မတူညီသော အားသွင်းမှုများကြောင့် အမျိုးမျိုးသော ပရိုတင်းများကို ခွဲခြားနိုင်သည်။ ၎င်းသည် ampholyte ကိုသယ်ဆောင်သူအဖြစ်အသုံးပြုသော isoelectric set electrophoresis ကိုအာရုံစိုက်သင့်သည်။ electrophoresis ကာလအတွင်း၊ ampholyte သည် အပြုသဘောဆောင်သောလျှပ်ကူးပစ္စည်းမှ အနုတ်လျှပ်ကူးပစ္စည်းသို့ တဖြည်းဖြည်းထည့်သွင်းထားသော pH gradient တစ်ခုဖြစ်သည်။ ပရိုတင်းဓာတ်သည် ၎င်းတွင် လျှပ်စီးကြောင်းတစ်ခုနှင့် ကူးသွားသောအခါ၊ ၎င်းသည် တစ်ခုနှင့်တစ်ခု ရောက်ရှိလာမည်ဖြစ်သည်။ လျှပ်စစ်ပွိုင့်၏ pH အနေအထားသည် အဆက်မပြတ်ဖြစ်ပြီး ပရိုတင်းအမျိုးမျိုးကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန်နှင့် ပြင်ဆင်ရန် ဤနည်းလမ်းကို အသုံးပြုနိုင်သည်။
6.Ion ဆက်သွယ်ရေး ခရိုမာတိုဂရာ၊
အိုင်းယွန်းဆက်သွယ်ရေးအေးဂျင့်များတွင် cationic ဆက်သွယ်ရေးအေးဂျင့်များ (ဥပမာ carboxymethyl cellulose၊ CM-cellulose) နှင့် anionic ဆက်သွယ်ရေးအေးဂျင့်များ (diethylaminoethyl cellulose) ပါဝင်သည်။ ion communication chromatography ကော်လံကို ဖြတ်သွားသောအခါ၊ ဆန့်ကျင်ဘက် အားသွင်းထားသော ပရိုတင်းကို အိုင်းယွန်း ဆက်သွယ်မှု အေးဂျင့်ထံသို့ စုပ်ယူပြီး အိုင်းယွန်း ဆက်သွယ်မှု အေးဂျင့်တွင် စုပ်ယူပြီးနောက် စုပ်ယူသည်။ပရိုတင်းpH သို့မဟုတ် ionic strength ကို ပြောင်းလဲခြင်းဖြင့် ဖယ်ထုတ်သည်။
7.Affinity chromatography-
Affinity chromatography သည် ပရိုတင်းများကို ပိုင်းခြားရန် အလွန်အသုံးဝင်သော နည်းလမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ မကြာခဏဆိုသလို ပရိုတင်းတစ်မျိုးကို သန့်စင်အောင်ပြုလုပ်ထားသော ပရိုတင်းအရောအနှောမှ သန့်စင်ရန် အဆင့်တစ်ဆင့်သာ လိုအပ်သည်။
ဤနည်းလမ်းသည် လစ်ဂန် (Ligand) ဟုခေါ်သော အခြားသော မော်လီကျူးများနှင့် အချို့သော ပရိုတင်းများကို covalent ချိတ်ဆက်ခြင်းထက် တိကျသော ပေါင်းစပ်မှုကို အခြေခံထားသည်။
အခြေခံနိယာမ:
ပရိုတိန်းများသည် တစ်ရှူးများ သို့မဟုတ် ဆဲလ်များအတွင်း ရှုပ်ထွေးသော အရောအနှောတစ်ခုတွင် တည်ရှိပြီး ဆဲလ်အမျိုးအစားတစ်ခုစီတွင် မတူညီသော ပရိုတင်းပေါင်း ထောင်ပေါင်းများစွာ ပါဝင်ပါသည်။ ထို့ကြောင့် ပရိုတင်းများကြား ခြားနားမှုသည် ဇီဝဓာတုဗေဒ၏ အရေးကြီးသော အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်ပြီး ၎င်းသည် တစ်ခုတည်းမဟုတ်ပါ။ သို့မဟုတ် အဆင်သင့်လုပ်ထားသော နည်းလမ်းအစုံသည် ရှုပ်ထွေးနေသော ပရိုတင်းမှ ပရိုတင်းတစ်မျိုးကို ဖယ်ရှားနိုင်သောကြောင့် နည်းလမ်းများစွာကို ပေါင်းစပ်အသုံးပြုလေ့ရှိသည်။
စာတိုက်အချိန်- Nov-05-2020