SPE ilha deċennji, u għal raġuni tajba. Meta x-xjentisti jridu jneħħu l-komponenti tal-isfond mill-kampjuni tagħhom, huma jiffaċċjaw l-isfida li jagħmlu dan mingħajr ma jnaqqsu l-kapaċità tagħhom li jiddeterminaw b'mod preċiż u preċiż il-preżenza u l-kwantità tal-kompost ta 'interess tagħhom. SPE hija teknika waħda li x-xjenzati spiss jużaw biex jgħinu jippreparaw il-kampjuni tagħhom għall-istrumentazzjoni sensittiva użata għall-analiżi kwantitattiva. SPE hija robusta, taħdem għal firxa wiesgħa ta 'tipi ta' kampjuni, u prodotti u metodi SPE ġodda qed ikomplu jiġu żviluppati. Fil-qalba tal-iżvilupp ta' dawk il-metodi hemm apprezzament li minkejja li l-kelma “kromatografija” ma tidhirx fl-isem tat-teknika, l-SPE hija xorta waħda forma ta' separazzjoni kromatografika.

SPE: Il-Kromatografija Siekta

Hemm xi qawl antik "jekk siġra taqa' fil-foresta, u ħadd ma jkun hemm biex jismagħha, xorta tagħmel ħoss?" Dik il-kelma tfakkarna fl-SPE. Dan jista 'jidher stramb li ngħid, iżda meta naħsbu dwar SPE, il-mistoqsija ssir "jekk isseħħ separazzjoni u m'hemm l-ebda detector hemm biex jirreġistraha, il-kromatografija verament seħħet?" Fil-każ tal-SPE, it-tweġiba hija "iva!" Meta tiżviluppa jew issolvi l-problemi ta 'metodu SPE, jista' jgħin ħafna li tiftakar li SPE hija biss kromatografija mingħajr il-kromatogramma. Meta taħseb dwarha, Mikhail Tsvet, magħruf bħala “missier il-kromatografija,” ma kienx qed jagħmel dak li konna nsejħulu “SPE” illum? Meta ssepara t-taħlitiet tiegħu ta 'pigmenti tal-pjanti billi ħalla l-gravità ġġorrhom, maħlul f'solvent, permezz ta' sodda ta 'ġibs mitħun, kienet daqshekk differenti minn metodu SPE modern?

Nifhmu l-Kampjun Tiegħek

Peress li l-SPE hija bbażata fuq prinċipji kromatografiċi, fil-qalba ta 'kull metodu SPE tajjeb hemm ir-relazzjoni bejn l-analiti, il-matriċi, il-fażi stazzjonarja (is-sorbent SPE), u l-fażi mobbli (is-solventi użati biex jinħaslu jew jinħaslu l-kampjun) .

Il-fehim tan-natura tal-kampjun tiegħek kemm jista' jkun huwa l-aħjar post fejn tibda jekk ikollok tiżviluppa jew issolvi l-problemi ta' metodu SPE. Biex tiġi evitata prova u żball bla bżonn waqt l-iżvilupp tal-metodu, id-deskrizzjonijiet tal-proprjetajiet fiżiċi u kimiċi kemm tal-analiti tiegħek kif ukoll tal-matriċi huma utli ħafna. Ladarba tkun taf dwar il-kampjun tiegħek, tkun f'pożizzjoni aħjar biex tqabbel dak il-kampjun ma' prodott SPE xieraq. Pereżempju, li tkun taf il-polarità relattiva tal-analiti meta mqabbla ma 'xulxin u l-matriċi tista' tgħinek tiddeċiedi jekk l-użu tal-polarità biex tissepara l-analiti mill-matriċi huwiex l-approċċ it-tajjeb. Li tkun taf jekk l-analiti tiegħek humiex newtrali jew jistgħux jeżistu fi stati ċċarġjati jista 'wkoll jgħinek jidderieġik lejn prodotti SPE li jispeċjalizzaw fiż-żamma jew l-eluzzjoni ta' speċijiet newtrali, iċċarġjati b'mod pożittiv jew iċċarġjati b'mod negattiv. Dawn iż-żewġ kunċetti jirrappreżentaw tnejn mill-proprjetajiet tal-analite l-aktar użati b'mod komuni biex jiġu sfruttati meta jiġu żviluppati metodi SPE u jintgħażlu prodotti SPE. Jekk tista' tiddeskrivi l-analiti tiegħek u l-komponenti prominenti tal-matriċi f'dawn it-termini, int fi triqtek biex tagħżel direzzjoni tajba għall-iżvilupp tal-metodu SPE tiegħek.

Separazzjoni b'Affinità

Il-prinċipji li jiddefinixxu s-separazzjonijiet li jseħħu fi ħdan kolonna LC, pereżempju, huma involuti f'separazzjoni SPE. Il-pedament ta 'kwalunkwe separazzjoni kromatografika huwa li jistabbilixxi sistema li għandha gradi varji ta' interazzjoni bejn il-komponenti tal-kampjun u ż-żewġ fażijiet preżenti fil-kolonna jew skartoċċ SPE, il-fażi mobbli u l-fażi stazzjonarja.

Wieħed mill-ewwel passi biex tħossok komdu bl-iżvilupp tal-metodu SPE huwa li jkollok familjarità maż-żewġ tipi ta 'interazzjonijiet l-aktar komuni li jiltaqgħu magħhom użati fis-separazzjoni SPE: polarità u/jew stat ta' ċarġ.

Polarità

Jekk se tuża l-polarità biex tnaddaf il-kampjun tiegħek, waħda mill-ewwel għażliet li għandek tagħmel hija li tiddeċiedi liema "modalità" hija l-aħjar. L-aħjar huwa li taħdem ma 'medja SPE relattivament polari u fażi mobbli relattivament mhux polari (jiġifieri mod normali) jew bil-maqlub, mezz SPE relattivament mhux polari flimkien ma' fażi mobbli relattivament polari (jiġifieri mod maqlub, hekk imsejjaħ sempliċement għax huwa l-oppost). tal-“modalità normali” stabbilita inizjalment).

Hekk kif tesplora l-prodotti SPE, issib li l-fażijiet SPE jeżistu f’firxa ta’ polaritajiet. Barra minn hekk, l-għażla tas-solvent tal-fażi mobbli toffri wkoll firxa wiesgħa ta 'polaritajiet, ħafna drabi tunjabbli ħafna permezz tal-użu ta' taħlitiet ta 'solventi, buffers, jew addittivi oħra. Hemm grad kbir ta 'finezza possibbli meta tuża differenzi fil-polarità bħala l-karatteristika ewlenija li tisfrutta biex tissepara l-analiti tiegħek minn interferenzi tal-matriċi (jew minn xulxin).

Żomm f'moħħok il-qawl antik tal-kimika "bħal jinħall bħal" meta tkun qed tikkunsidra l-polarità bħala s-sewwieq għas-separazzjoni. Aktar ma kompost ikun simili għall-polarità ta 'fażi mobbli jew stazzjonarja, aktar ikun probabbli li jinteraġixxi b'mod aktar qawwi. Interazzjonijiet aktar b'saħħithom mal-fażi stazzjonarja jwasslu għal retenzjonijiet itwal fuq il-mezz SPE. Interazzjonijiet qawwija mal-fażi mobbli jwasslu għal inqas żamma u elużjoni aktar kmieni.

Stat ta' ħlas

Jekk l-analiti ta’ interess jew dejjem jeżistu fi stat iċċarġjat jew jistgħu jitpoġġew fi stat iċċarġjat bil-kundizzjonijiet tas-soluzzjoni li jkunu maħlula fihom (eż. pH), allura mezz qawwi ieħor biex jiġu separati mill-matriċi (jew kull oħrajn) huwa permezz tal-użu tal-midja SPE li jistgħu jattirawhom bi ħlas tagħhom stess.

F'dan il-każ, japplikaw regoli klassiċi ta 'attrazzjoni elettrostatika. B'differenza mis-separazzjonijiet li jiddependu fuq il-karatteristiċi tal-polarità u l-mudell ta' interazzjonijiet "bħal jinħall bħal", l-interazzjonijiet tal-istat iċċarġjati joperaw fuq ir-regola ta '"l-opposti jattiraw." Pereżempju, jista 'jkollok mezz SPE li għandu ħlas pożittiv fuq il-wiċċ tiegħu. Biex tibbilanċja dik il-wiċċ iċċarġjat b'mod pożittiv, tipikament ikun hemm speċi ċċarġjata b'mod negattiv (anjoni) inizjalment marbuta magħha. Jekk l-analite iċċarġjat b'mod negattiv tiegħek jiġi introdott fis-sistema, għandu l-kapaċità li jċaqlaq l-anjoni inizjalment marbut u jinteraġixxi mal-wiċċ SPE iċċarġjat b'mod pożittiv. Dan jirriżulta fiż-żamma tal-analite fuq il-fażi SPE. Dan l-iskambju ta 'anjoni jissejjaħ "Skambju Anjoniku" u huwa biss eżempju wieħed tal-kategorija usa' ta 'prodotti SPE "Skambju Ioniku". F'dan l-eżempju, speċi ċċarġjati b'mod pożittiv ikollhom inċentiv qawwi biex jibqgħu fil-fażi mobbli u ma jinteraġixxux mal-wiċċ SPE ċċarġjat b'mod pożittiv, u għalhekk ma jinżammux. U, sakemm is-superfiċje SPE ma kellhiex karatteristiċi oħra minbarra l-proprjetajiet ta’ skambju joniku tagħha, l-ispeċi newtrali wkoll jinżammu minimament (għalkemm, tali prodotti mħallta SPE jeżistu, li jippermettulek tutilizza skambju joniku u mekkaniżmi ta’ żamma ta’ fażi inversa fl-istess medju SPE ).

Distinzjoni importanti li wieħed iżomm f'moħħu meta tuża mekkaniżmi ta 'skambju joniku hija n-natura ta' l-istat ta 'ċarġ ta' l-analite. Jekk l-analit ikun dejjem iċċarġjat, irrispettivament mill-pH tas-soluzzjoni li jkun fih, jitqies bħala speċi "qawwija". Jekk l-analite jiġi ċċarġjat biss taħt ċerti kundizzjonijiet tal-pH, jitqies bħala speċi "dgħajfa". Din hija karatteristika importanti li wieħed jifhem dwar l-analiti tiegħek għaliex se jiddetermina liema tip ta 'midja SPE tuża. F'termini ġenerali, il-ħsieb dwar l-opposti li jmorru flimkien se jgħin hawn. Huwa rakkomandabbli li tgħaqqad sorbent SPE ta 'skambju joniku dgħajjef ma' speċi "b'saħħitha" u sorbent ta 'skambju joniku qawwi ma' analit "dgħajjef".