Is-separazzjoni u l-purifikazzjoni tal-proteini tintuża ħafna fir-riċerka u l-applikazzjoni tal-bijokimika u hija ħila operattiva importanti. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ġabar is-separazzjoni mhux raffinata u l-kontenut ta 'separazzjoni multa ta'proteinapurifikazzjoni għal kulħadd. Ċellula ewkarjotika tipika jista 'jkun fiha eluf ta' proteini differenti, xi wħud huma sinjuri ħafna u xi wħud fihom biss ftit kopji. Sabiex tiġi studjata ċerta proteina, huwa meħtieġ li l-ewwel tiġi purifikata l-proteina minn proteini oħra u molekuli mhux proteini.

Separazzjoni oħxon

Meta jinkiseb l-estratt tal-proteini (xi kultant imħallat ma 'aċidi nuklejċi, polisakkaridi, eċċ.), jintgħażel sett ta' metodi xierqa biex jisseparaw dak mixtieq.proteinaminn impuritajiet oħra. Ġeneralment, dan il-pass ta 'separazzjoni juża metodi bħal tmelliħ, akkumulazzjoni ta' punt iżoelettriku u frazzjonament tas-solvent organiku. Dawn il-metodi huma kkaratterizzati minn sempliċità u kapaċità ta 'proċessar kbira, li jistgħu jneħħu ħafna impuritajiet u jikkonċentraw is-soluzzjoni tal-proteina. Xi estratti tal-proteini huma kbar fil-volum u mhumiex adattati għall-konċentrazzjoni bl-akkumulazzjoni jew it-tmelliħ. Tista 'tagħżel ultrafiltrazzjoni, filtrazzjoni tal-ġel, tnixxif bil-vakwu tal-iffriżar jew metodi oħra għall-konċentrazzjoni.

Separazzjoni fina

Wara l-frazzjonament mhux maħdum tal-kampjun, il-volum huwa ġeneralment żgħir, u ħafna mill-impuritajiet tneħħew. Għal aktar purifikazzjoni, metodi ta 'kromatografija ġeneralment jinkludu filtrazzjoni tal-ġel, kromatografija ta' skambju joniku, kromatografija ta 'adsorbiment, u kromatografija ta' affinità. Jekk meħtieġ, tista 'wkoll tagħżel elettroforesi, inkluż elettroforesi taż-żona, sett ta' punt iżoelettriku, eċċ bħala l-proċess ta 'purifikazzjoni finali. Il-metodu użat għas-separazzjoni tal-livell tas-suddiviżjoni huwa ġeneralment żgħir fl-ippjanar, iżda b'riżoluzzjoni għolja.

Il-kristallizzazzjoni hija l-proċess finali tas-separazzjoni u l-purifikazzjoni tal-proteini. Għalkemm il-proċess ta 'kristallizzazzjoni ma jiżgurax li l-proteina trid tkun uniformi, huwa biss meta ċerta proteina għandha vantaġġ fis-soluzzjoni biex tifforma kristall. Il-proċess ta 'kristallizzazzjoni innifsu huwa akkumpanjat minn ċertu grad ta' purifikazzjoni, u r-rikristallizzazzjoni tista 'tneħħi ammont żgħir ta' proteina adulterata. Peress żnaturatproteinaqatt ma nstab matul il-proċess ta 'kristallizzazzjoni, il-kristallizzazzjoni tal-proteini mhix biss sinjal ta' purità, iżda wkoll linja gwida qawwija biex tiddetermina li l-prodott huwa fl-istat naturali tiegħu.