Apakah kaedah pemurnian bagisistem penulenan protein? Adalah perlu untuk mengetahui urutan DNA pengekodan protein yang telah dimurnikan, untuk melihat sel atau tisu mana yang diekspresikan secara berlebihan dalam gen sasaran, dan untuk mereka bentuk primer gen untuk menguatkan arf serpihan DNA sasaran. Ini adalah apa yang dipanggil pemerolehan serpihan gen sasaran.

Pembinaan vektor ekspresi: Dalam vektor ekspresi prokariotik atau eukariotik dengan ciri-ciri ekspresi gen yang diperoleh itu sendiri, masalah utama langkah ini adalah untuk membina plasmid dan gen yang diminati, dan sistem ekspresi. Masa ekspresi prokariotik adalah pendek, kosnya rendah, dan sejumlah besar ungkapan adalah keutamaan; gen tidak dinyatakan dalam E. coli, dan masalahnya berlaku dalam pengoptimuman kodon. Dalam pertimbangan aktiviti yang lebih baik dan penulenan protein, para penyelidik memilih untuk menyatakan dalam yis Pichi. Ekspresi pengoptimuman kodon yang berjaya adalah penting.

Apakah kaedah penulenan sistem penulenan protein:

1. Kerpasan.

2. Elektroforesis: Protein bercas lebih tinggi atau lebih rendah daripada titik isoelektriknya dan boleh dialihkan ke elektrod negatif atau elektrod positif medan elektrik dalam medan elektrik. Sokongan elektroforesis filem, elektroforesis, dll.

3. Dialisis: Kaedah yang menggunakan dua beg dialisis untuk memisahkan molekul besar daripada protein dan sebatian organik molekul kecil.

4. Kromatografi: Kromatografi pertukaran ion menggunakan sifat bebas protein. Di bawah pH tertentu, cas dan sifat protein adalah berbeza, dan ia boleh dipisahkan dengan kromatografi pertukaran ion. Dalam kromatografi pertukaran anion, protein dengan kuasa negatif yang rendah dielusi terlebih dahulu. Ayak molekul, juga dikenali sebagai penapisan gel. Protein kecil memasuki liang dan kekal di dalamnya untuk masa yang lama. Protein yang besar tidak boleh masuk ke dalam liang dan mengalir keluar terus.

5. Apakah kaedah penyucian bagisistem penulenan protein? Ultracentrifugation: Pembersihan protein boleh digunakan untuk menentukan berat molekul dan boleh digunakan sebagai protein. Pembentukan protein dengan ketumpatan yang berbeza diasingkan.