Pemisahan kasar dan pemisahan halus penulenan protein

Pengasingan dan penulenan protein digunakan secara meluas dalam penyelidikan dan aplikasi biokimia dan merupakan kemahiran operasi yang penting. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument telah menyusun kandungan pengasingan mentah dan pengasingan halusproteinpenyucian untuk semua orang. Sel eukariotik biasa boleh mengandungi beribu-ribu protein yang berbeza, ada yang sangat kaya dan ada yang mengandungi hanya beberapa salinan. Untuk mengkaji protein tertentu, perlu terlebih dahulu membersihkan protein daripada protein lain dan molekul bukan protein.

19

Pemisahan kasar

Apabila ekstrak protein (kadang-kadang dicampur dengan asid nukleik, polisakarida, dll.) diperolehi, satu set kaedah yang sesuai dipilih untuk memisahkan yang dikehendaki.proteindaripada kekotoran lain. Secara amnya, langkah pengasingan ini menggunakan kaedah seperti pengasinan keluar, pengumpulan titik isoelektrik dan pecahan pelarut organik. Kaedah ini dicirikan oleh kesederhanaan dan kapasiti pemprosesan yang besar, yang boleh menghilangkan banyak kekotoran dan menumpukan penyelesaian protein. Sesetengah ekstrak protein mempunyai isipadu yang besar dan tidak sesuai untuk kepekatan melalui pengumpulan atau pengasinan. Anda boleh memilih ultrafiltrasi, penapisan gel, pengeringan vakum beku atau kaedah lain untuk kepekatan.

Pemisahan yang halus

Selepas pecahan kasar sampel, isipadu biasanya kecil, dan kebanyakan kekotoran telah dikeluarkan. Untuk penulenan selanjutnya, kaedah kromatografi umumnya termasuk penapisan gel, kromatografi pertukaran ion, kromatografi penjerapan dan kromatografi pertalian. Jika perlu, anda juga boleh memilih elektroforesis, termasuk elektroforesis zon, set titik isoelektrik, dan lain-lain sebagai proses penulenan akhir. Kaedah yang digunakan untuk pemisahan peringkat subbahagian biasanya kecil dalam perancangan, tetapi dengan resolusi tinggi.

Penghabluran adalah proses terakhir pemisahan dan penulenan protein. Walaupun proses penghabluran tidak memastikan bahawa protein mestilah seragam, ia hanya apabila protein tertentu mempunyai kelebihan dalam larutan untuk membentuk kristal. Proses penghabluran itu sendiri disertai dengan tahap penulenan tertentu, dan penghabluran semula boleh mengeluarkan sejumlah kecil protein tercemar. Sejak denaturasiproteintidak pernah ditemui semasa proses penghabluran, penghabluran protein bukan sahaja tanda ketulenan, tetapi juga garis panduan yang kuat untuk menentukan bahawa produk berada dalam keadaan semula jadi.


Masa siaran: Nov-19-2020