Нуклейн хүчил нь дезоксирибонуклеины хүчил (ДНХ) ба рибонуклеины хүчил (РНХ) гэж хуваагддаг бөгөөд тэдгээрийн дотор РНХ нь рибосомын РНХ (рРНХ), элч РНХ (мРНХ), дамжуулагч РНХ (тРНХ) гэж өөр өөр функцээр хуваагддаг.

ДНХ нь голчлон цөм, митохондри, хлоропластуудад төвлөрдөг бол РНХ нь цитоплазмд голчлон тархдаг.

Пурины суурь ба пиримидины суурь нь нуклейн хүчилд хосолсон давхар холбоотой байдаг тул нуклейн хүчлүүд нь хэт ягаан туяа шингээх шинж чанартай байдаг. ДНХ-ийн натрийн давсны хэт ягаан туяаны шингээлт нь ойролцоогоор 260 нм бөгөөд түүний шингээлтийг A260 гэж илэрхийлдэг бөгөөд 230 нм-ийн шингээлтийн ёроолд байдаг тул хэт ягаан туяаны спектроскопи ашиглаж болно. Нуклейн хүчлийг гэрэлтэгч хэмжигчээр тоон болон чанарын хувьд тодорхойлно.

Нуклейн хүчлүүд нь амфолитууд бөгөөд тэдгээр нь поли хүчилтэй тэнцүү юм. Нуклейн хүчлийг саармаг эсвэл шүлтлэг буфер ашиглан анион болгон задалж, анод руу шилжихийн тулд цахилгаан талбарт байрлуулж болно. Энэ бол электрофорезийн зарчим юм.

Нуклейн хүчлийн олборлолт, цэвэршүүлэх зарчим, шаардлага

1. Нуклейн хүчлийн анхдагч бүтцийн нэгдмэл байдлыг хангах

2. Бусад молекулуудын бохирдлыг арилгах (ДНХ гаргаж авах үед РНХ-ийн хөндлөнгийн оролцоог хасах гэх мэт)

3. Нуклейн хүчлийн дээжинд ферментийг дарангуйлдаг органик уусгагч, өндөр концентрацитай металлын ионууд байх ёсгүй.

4. Уураг, полисахарид, липид зэрэг макромолекулын бодисыг аль болох багасгах.

Нуклейн хүчлийн олборлолт, цэвэршүүлэх арга

1. Фенол/хлороформ олборлох арга

Үүнийг 1956 онд зохион бүтээсэн. Эсийн эвдэрсэн шингэн буюу эдийн гомогенатыг фенол/хлороформоор боловсруулсны дараа нуклейн хүчлийн бүрэлдэхүүн хэсгүүд, голчлон ДНХ нь усан фазад уусдаг, липидүүд нь ихэвчлэн органик үе шатанд, уурагууд нь энэ хоёрын хооронд байрладаг. үе шатууд.

2. Архины хур тунадас

Этанол нь нуклейн хүчлийн усжилтын давхаргыг арилгаж, сөрөг цэнэгтэй фосфатын бүлгийг ил гаргах ба NA﹢ зэрэг эерэг цэнэгтэй ионууд нь фосфатын бүлэгтэй нийлж тунадас үүсгэдэг.

3. Хроматографийн баганын арга

Тусгай цахиурт суурилсан шингээх материалаар дамжуулан ДНХ-г тусгайлан шингээж авах боломжтой бол РНХ, уураг нь саадгүй нэвтэрч, дараа нь нуклейн хүчлийг холбохын тулд өндөр давс, бага рН-ийг ашиглан нуклейныг ялгаж, цэвэршүүлэхийн тулд бага давс, өндөр рН-ийг ашиглан шүүж болно. хүчил.

4. Дулааны хагарлын шүлтийн арга

Шүлтлэг олборлолт нь ковалент хаалттай дугуй плазмид ба шугаман хроматин хоорондын топологийн ялгааг голчлон тэдгээрийг салгахад ашигладаг. Шүлтлэг нөхцөлд денатуржуулсан уураг уусдаг.

5. Буцалгах пиролизийн арга

Шугаман ДНХ молекулуудын шинж чанарыг ашиглахын тулд ДНХ-ийн уусмалыг дулааны боловсруулалтанд оруулан центрифуг хийх замаар денатуржуулсан уураг болон эсийн хог хаягдлаас үүссэн тунадасаас ДНХ-ийн хэлтэрхийүүдийг ялгаж авдаг.

6. Нано соронзон бөмбөлгүүдийн арга

Нанотехнологийг ашиглан супер парамагнит нано хэсгүүдийн гадаргууг сайжруулж, өөрчлөхийн тулд супер парамагнит цахиурын ислийн нано-соронзон бөмбөлгүүдийг бэлтгэдэг. Соронзон бөмбөлгүүдийг нь микроскопийн интерфейс дээр нуклейн хүчлийн молекулуудыг тусгайлан таньж, үр дүнтэй холбож чаддаг. Цахиурын нано бөмбөрцгийн супер парамагнит шинж чанарыг ашиглан хаотроп давс (гуанидин гидрохлорид, гуанидин изотиоцианат гэх мэт) болон гадаад соронзон орны нөлөөн дор цус, амьтны эд, хоол хүнс, эмгэг төрүүлэгч бичил биетүүд болон бусад дээжээс ДНХ, РНХ-ийг тусгаарласан.