Салах аргуудын уураг цэвэршүүлэх

Уургийг ялгах, цэвэршүүлэх нь биохимийн судалгаа, хэрэглээнд өргөн хэрэглэгддэг бөгөөд үйл ажиллагааны чухал ур чадвар юм. Ердийн эукариот эс нь олон мянган уураг агуулсан байж болох бөгөөд зарим нь маш баялаг, зарим нь хэдхэн хуулбарыг агуулдаг. Тодорхой зүйлийг судлахын тулдуураг, эхлээд уургийг бусад уураг болон уургийн бус молекулуудаас цэвэршүүлэх шаардлагатай.

6ca4b93f5

1. Давслах аргауураг:

Төвийг сахисан давс нь уургийн уусах чадварт ихээхэн нөлөөлдөг. Ерөнхийдөө давсны агууламж багатай үед давсны агууламж нэмэгдэх тусам уургийн уусах чадвар нэмэгддэг. Үүнийг давслах гэж нэрлэдэг; давсны агууламж нэмэгдсээр байх үед уургийн уусах чадвар янз бүрийн хэмжээгээр буурч, дараалан ялгардаг. Энэ үзэгдлийг давслах гэж нэрлэдэг.

2. Изоэлектрик цэгт овоолгын арга:

Уураг статик үед бөөмс хоорондын цахилгаан статик түлхэлт хамгийн бага байдаг тул уусах чадвар нь мөн хамгийн бага байдаг. Төрөл бүрийн уургийн изоэлектрик цэгүүд өөр өөр байдаг. Ашиглалтын уусмалын рН-ийг уургийн изоэлектрик цэгт хүрэхэд ашиглаж болох бөгөөд үүнийг хуримтлуулна, гэхдээ энэ аргыг дангаар нь хэрэглэх нь ховор бөгөөд давслах аргатай хослуулах боломжтой.

3. Диализ ба хэт шүүлтүүр:

Диализ нь өөр өөр молекулын хэмжээтэй уургийг ялгахын тулд хагас нэвчдэг мембраныг ашигладаг. Хэт шүүлтүүрийн арга нь ус болон бусад жижиг ууссан бодисын молекулуудыг хагас нэвчүүлэх мембранаар нэвтрүүлэхийн тулд өндөр даралт эсвэл төвөөс зугтах хүчийг ашигладаг.уурагмембран дээр үлддэг. Янз бүрийн молекул жинтэй уургийг таслахын тулд та өөр өөр нүхний хэмжээг сонгож болно.

4.Гель шүүлтүүрийн арга:

Хэмжээ хасах хроматографи эсвэл молекул шигшүүрийн хроматографи гэж нэрлэдэг бөгөөд энэ нь уургийн хольцыг молекулын хэмжээгээр ялгах хамгийн ашигтай аргуудын нэг юм. Багананд илүү өргөн хэрэглэгддэг баглаа боодлын материал нь глюкоз гель (Sephadex ged) ба агароз гель (агароз гель) юм.

5. Электрофорез:

Ижил рН-ийн нөхцөлд янз бүрийн уургууд нь өөр өөр молекул жин, цахилгаан талбайн өөр өөр цэнэгийн улмаас салж болно. Амфолитийг тээвэрлэгч болгон ашигладаг изоэлектрик электрофорезид анхаарлаа хандуулах нь зүйтэй. Электрофорезын үед амфолит нь эерэг электродоос сөрөг электрод руу аажмаар нэмэгддэг рН градиент үүсгэдэг. Тодорхой цэнэгтэй уураг дотор нь сэлэх үед бие биедээ хүрнэ. Цахилгаан цэгийн рН-ийн байрлал нь тасалдалтай байдаг бөгөөд энэ аргыг янз бүрийн уургийг шинжлэх, бэлтгэхэд ашиглаж болно.

6.Ионы холбооны хроматографи:

ионы холбооны агентууд нь катион харилцаа холбооны бодисууд (карбоксиметил целлюлоз; CM-целлюлоз гэх мэт) болон анион холбооны бодисууд (диэтиламиноэтил целлюлоз) орно. Ионы холбооны хроматографийн баганаар дамжин өнгөрөхдөө ион холбооны агентын эсрэг цэнэгтэй уураг нь ионы холбооны агент дээр шингэж, дараа нь шингээнэ.уурагрН эсвэл ионы хүчийг өөрчлөх замаар ялгардаг.

7. Ойролцоо хроматографи:

Ойролцоох хроматографи нь уураг ялгах маш ашигтай арга юм. Өндөр цэвэршилттэй, бохир уургийн хольцоос цэвэршүүлэхийн тулд тодорхой уургийг салгахын тулд зөвхөн нэг алхам хийх шаардлагатай болдог.

Энэ арга нь ковалент бус тодорхой уургийг лиганд (Лиганд) гэж нэрлэгддэг өөр молекултай холбоход суурилдаг.

Үндсэн зарчим:

Уургууд нь эд эс эсвэл эсэд эмх замбараагүй холимог хэлбэрээр оршдог бөгөөд эсийн төрөл бүр олон мянган өөр өөр уураг агуулдаг. Тиймээс уураг хоорондын ялгаа нь биохимийн чухал хэсэг бөгөөд дангаараа байгаагүй юм. Эсвэл бэлэн аргуудын багц нь замбараагүй холимог уургаас ямар ч төрлийн уургийг арилгаж чаддаг тул хэд хэдэн аргыг ихэвчлэн хослуулан хэрэглэдэг.


Шуудангийн цаг: 2020 оны 11-р сарын 05-ны өдөр