പതിറ്റാണ്ടുകളായി SPE ഉണ്ട്, നല്ല കാരണവുമുണ്ട്. ശാസ്ത്രജ്ഞർ അവരുടെ സാമ്പിളുകളിൽ നിന്ന് പശ്ചാത്തല ഘടകങ്ങൾ നീക്കംചെയ്യാൻ ആഗ്രഹിക്കുമ്പോൾ, അവരുടെ താൽപ്പര്യ സംയുക്തത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യവും അളവും കൃത്യമായും കൃത്യമായും നിർണ്ണയിക്കാനുള്ള അവരുടെ കഴിവ് കുറയ്ക്കാതെ അത് ചെയ്യുന്നതിനുള്ള വെല്ലുവിളി അവർ അഭിമുഖീകരിക്കുന്നു. അളവ് വിശകലനത്തിനായി ഉപയോഗിക്കുന്ന സെൻസിറ്റീവ് ഇൻസ്ട്രുമെൻ്റേഷനായി അവരുടെ സാമ്പിളുകൾ തയ്യാറാക്കാൻ സഹായിക്കുന്നതിന് ശാസ്ത്രജ്ഞർ പലപ്പോഴും ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികതയാണ് SPE. SPE ശക്തമാണ്, സാമ്പിൾ തരങ്ങളുടെ വിശാലമായ ശ്രേണിയിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്നു, പുതിയ SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങളും രീതികളും വികസിപ്പിക്കുന്നത് തുടരുന്നു. ആ രീതികൾ വികസിപ്പിക്കുന്നതിൻ്റെ കാതൽ, ടെക്നിക്കിൻ്റെ പേരിൽ "ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി" എന്ന വാക്ക് പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നില്ലെങ്കിലും, SPE എന്നത് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിവിൻ്റെ ഒരു രൂപമാണ്.

SPE: സൈലൻ്റ് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി

ഒരു പഴഞ്ചൊല്ലുണ്ട് "കാട്ടിൽ ഒരു മരം വീണാൽ, അത് കേൾക്കാൻ ആരും ഇല്ലെങ്കിൽ, അത് ഇപ്പോഴും ശബ്ദമുണ്ടാക്കുമോ?" ആ വാക്ക് SPE യെ ഓർമ്മിപ്പിക്കുന്നു. അത് പറയാൻ വിചിത്രമായി തോന്നിയേക്കാം, എന്നാൽ SPE-യെ കുറിച്ച് ചിന്തിക്കുമ്പോൾ, "ഒരു വേർപിരിയൽ നടക്കുകയും അത് രേഖപ്പെടുത്താൻ ഒരു ഡിറ്റക്ടറും ഇല്ലെങ്കിൽ, ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി ശരിക്കും സംഭവിച്ചോ?" SPE-യുടെ കാര്യത്തിൽ, ഉത്തരം "അതെ!" ഒരു SPE രീതി വികസിപ്പിക്കുകയോ ട്രബിൾഷൂട്ട് ചെയ്യുകയോ ചെയ്യുമ്പോൾ, SPE എന്നത് ക്രോമാറ്റോഗ്രാം ഇല്ലാതെ ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി മാത്രമാണെന്ന് ഓർമ്മിക്കുന്നത് വളരെ സഹായകരമാണ്. നിങ്ങൾ അതിനെക്കുറിച്ച് ചിന്തിക്കുമ്പോൾ, "ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയുടെ പിതാവ്" എന്നറിയപ്പെടുന്ന മിഖായേൽ ഷ്വെറ്റ് ഇന്ന് നമ്മൾ "SPE" എന്ന് വിളിക്കുന്നത് ചെയ്യുന്നില്ലേ? ഒരു ലായകത്തിൽ അലിഞ്ഞുചേർന്ന, നിലത്തുകിടക്കുന്ന ചോക്കിൻ്റെ കട്ടിലിലൂടെ ഗുരുത്വാകർഷണം വഹിക്കാൻ അനുവദിച്ചുകൊണ്ട് സസ്യങ്ങളുടെ പിഗ്മെൻ്റുകളുടെ മിശ്രിതങ്ങളെ വേർതിരിക്കുമ്പോൾ, അത് ആധുനിക SPE രീതിയേക്കാൾ വളരെ വ്യത്യസ്തമായിരുന്നോ?

നിങ്ങളുടെ സാമ്പിൾ മനസ്സിലാക്കുന്നു

SPE ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് തത്ത്വങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതിനാൽ, എല്ലാ നല്ല SPE രീതിയുടെയും ഹൃദയം അനലിറ്റുകൾ, മാട്രിക്സ്, സ്റ്റേഷണറി ഫേസ് (SPE സോർബൻ്റ്), മൊബൈൽ ഘട്ടം (സാമ്പിൾ കഴുകാനോ നീക്കം ചെയ്യാനോ ഉപയോഗിക്കുന്ന ലായകങ്ങൾ) തമ്മിലുള്ള ബന്ധമാണ്. .

നിങ്ങൾക്ക് ഒരു SPE രീതി വികസിപ്പിക്കുകയോ ട്രബിൾഷൂട്ട് ചെയ്യുകയോ ചെയ്യണമെങ്കിൽ നിങ്ങളുടെ സാമ്പിളിൻ്റെ സ്വഭാവം കഴിയുന്നത്ര മനസ്സിലാക്കുന്നത് ആരംഭിക്കാനുള്ള ഏറ്റവും നല്ല സ്ഥലമാണ്. മെത്തേഡ് ഡെവലപ്‌മെൻ്റ് സമയത്ത് അനാവശ്യ ട്രയലും പിശകും ഒഴിവാക്കാൻ, നിങ്ങളുടെ വിശകലനങ്ങളുടെയും മാട്രിക്‌സിൻ്റെയും ഭൗതികവും രാസപരവുമായ ഗുണങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരണങ്ങൾ വളരെ സഹായകരമാണ്. നിങ്ങളുടെ സാമ്പിളിനെക്കുറിച്ച് അറിഞ്ഞുകഴിഞ്ഞാൽ, ഉചിതമായ ഒരു SPE ഉൽപ്പന്നവുമായി ആ സാമ്പിളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുത്താൻ നിങ്ങൾക്ക് മികച്ച സ്ഥാനമുണ്ടാകും. ഉദാഹരണത്തിന്, പരസ്പരം താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അനലിറ്റുകളുടെ ആപേക്ഷിക ധ്രുവത അറിയുന്നത്, മാട്രിക്സിൽ നിന്ന് വിശകലനങ്ങളെ വേർതിരിക്കുന്നതിന് ധ്രുവീകരണം ഉപയോഗിക്കുന്നതാണോ ശരിയായ സമീപനം എന്ന് തീരുമാനിക്കാൻ നിങ്ങളെ സഹായിക്കും. നിങ്ങളുടെ വിശകലനങ്ങൾ ന്യൂട്രൽ ആണോ അതോ ചാർജ്ജ് ചെയ്ത അവസ്ഥകളിൽ നിലനിൽക്കുമോ എന്നറിയുന്നത്, പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള അല്ലെങ്കിൽ നെഗറ്റീവ് ചാർജുള്ള സ്പീഷീസുകളെ നിലനിർത്തുന്നതിനോ ഒഴിവാക്കുന്നതിനോ ഉള്ള SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങളിലേക്ക് നിങ്ങളെ നയിക്കാൻ സഹായിക്കും. ഈ രണ്ട് ആശയങ്ങളും SPE രീതികൾ വികസിപ്പിക്കുമ്പോഴും SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുമ്പോഴും പ്രയോജനപ്പെടുത്തുന്നതിന് സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന രണ്ട് വിശകലന ഗുണങ്ങളെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. ഈ നിബന്ധനകളിൽ നിങ്ങളുടെ അനലിറ്റുകളും പ്രമുഖ മാട്രിക്സ് ഘടകങ്ങളും നിങ്ങൾക്ക് വിവരിക്കാൻ കഴിയുമെങ്കിൽ, നിങ്ങളുടെ SPE രീതി വികസനത്തിന് ഒരു നല്ല ദിശ തിരഞ്ഞെടുക്കാനുള്ള നിങ്ങളുടെ വഴിയിലാണ്.

അഫിനിറ്റി പ്രകാരം വേർപിരിയൽ

ഒരു LC കോളത്തിനുള്ളിൽ സംഭവിക്കുന്ന വേർതിരിവുകൾ നിർവചിക്കുന്ന തത്വങ്ങൾ, ഉദാഹരണത്തിന്, ഒരു SPE വേർതിരിവിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്നു. ഏതെങ്കിലും ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വേർതിരിവിൻ്റെ അടിസ്ഥാനം സാമ്പിളിൻ്റെ ഘടകങ്ങളും കോളത്തിലോ SPE കാട്രിഡ്ജിലോ ഉള്ള രണ്ട് ഘട്ടങ്ങൾ, മൊബൈൽ ഘട്ടം, സ്റ്റേഷണറി ഘട്ടം എന്നിവ തമ്മിലുള്ള വ്യത്യസ്ത അളവിലുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനം ഉള്ള ഒരു സിസ്റ്റം സ്ഥാപിക്കുക എന്നതാണ്.

SPE രീതി വികസിപ്പിക്കുന്നതിൽ സുഖകരമാകുന്നതിനുള്ള ആദ്യ ഘട്ടങ്ങളിലൊന്ന്, SPE വേർതിരിവിൽ ഏറ്റവും സാധാരണയായി കണ്ടുവരുന്ന രണ്ട് തരത്തിലുള്ള ഇടപെടലുകളെ പരിചയപ്പെടുക എന്നതാണ്: പോളാരിറ്റി കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ ചാർജ് അവസ്ഥ.

പോളാരിറ്റി

നിങ്ങളുടെ സാമ്പിൾ വൃത്തിയാക്കാൻ നിങ്ങൾ പോളാരിറ്റി ഉപയോഗിക്കുകയാണെങ്കിൽ, നിങ്ങൾ ആദ്യം തിരഞ്ഞെടുക്കേണ്ട ഒന്നാണ് "മോഡ്" ഏതാണ് മികച്ചതെന്ന് തീരുമാനിക്കുക എന്നതാണ്. താരതമ്യേന ധ്രുവമുള്ള SPE മീഡിയം, താരതമ്യേന നോൺപോളാർ മൊബൈൽ ഫേസ് (അതായത് സാധാരണ മോഡ്) അല്ലെങ്കിൽ വിപരീതമായി, താരതമ്യേന ധ്രുവീയമല്ലാത്ത ഒരു SPE മീഡിയം, താരതമ്യേന ധ്രുവ മൊബൈൽ ഘട്ടം (അതായത്, വിപരീത മോഡ്, വിപരീതമായതിനാൽ പേര് നൽകിയത്. തുടക്കത്തിൽ സ്ഥാപിച്ച "സാധാരണ മോഡ്").

നിങ്ങൾ SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ പര്യവേക്ഷണം ചെയ്യുമ്പോൾ, SPE ഘട്ടങ്ങൾ ധ്രുവങ്ങളുടെ ഒരു ശ്രേണിയിൽ ഉണ്ടെന്ന് നിങ്ങൾ കണ്ടെത്തും. കൂടാതെ, മൊബൈൽ ഫേസ് ലായകത്തിൻ്റെ തിരഞ്ഞെടുപ്പും വൈവിധ്യമാർന്ന ധ്രുവങ്ങൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു, പലപ്പോഴും ലായകങ്ങൾ, ബഫറുകൾ അല്ലെങ്കിൽ മറ്റ് അഡിറ്റീവുകൾ എന്നിവയുടെ മിശ്രിതം ഉപയോഗിച്ച് ട്യൂൺ ചെയ്യാവുന്നതാണ്. മാട്രിക്സ് ഇടപെടലുകളിൽ നിന്ന് (അല്ലെങ്കിൽ പരസ്പരം) നിങ്ങളുടെ അനലിറ്റുകളെ വേർതിരിക്കുന്നതിന് ചൂഷണം ചെയ്യുന്നതിനുള്ള പ്രധാന സ്വഭാവമായി ധ്രുവീയ വ്യത്യാസങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ വലിയ അളവിലുള്ള സൂക്ഷ്മത സാധ്യമാണ്.

വേർപിരിയലിനുള്ള ചാലകമായി നിങ്ങൾ ധ്രുവീയതയെ പരിഗണിക്കുമ്പോൾ, പഴയ രസതന്ത്രത്തിലെ പഴഞ്ചൊല്ല് ഓർമ്മിക്കുക. ഒരു സംയുക്തം ഒരു മൊബൈൽ അല്ലെങ്കിൽ നിശ്ചല ഘട്ടത്തിൻ്റെ ധ്രുവീകരണത്തിന് എത്രത്തോളം സമാനമാണ്, അത് കൂടുതൽ ശക്തമായി ഇടപഴകാനുള്ള സാധ്യത കൂടുതലാണ്. സ്റ്റേഷണറി ഫേസുമായുള്ള ശക്തമായ ഇടപെടലുകൾ SPE മീഡിയത്തിൽ ദീർഘനേരം നിലനിർത്തുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു. മൊബൈൽ ഫേസുമായുള്ള ശക്തമായ ഇടപെടലുകൾ നിലനിർത്തൽ കുറയുന്നതിലേക്കും നേരത്തെയുള്ള ഒഴിവാക്കലിലേക്കും നയിക്കുന്നു.

ചാർജ് സ്റ്റേറ്റ്

താൽപ്പര്യമുള്ള വിശകലനങ്ങൾ ഒന്നുകിൽ എല്ലായ്പ്പോഴും ചാർജ്ജ് ചെയ്ത അവസ്ഥയിൽ നിലനിൽക്കുകയോ അല്ലെങ്കിൽ അവ ലയിച്ചിരിക്കുന്ന ലായനിയുടെ വ്യവസ്ഥകൾ (ഉദാ. pH) പ്രകാരം ചാർജ്ജ് ചെയ്ത അവസ്ഥയിലാക്കാൻ കഴിയുകയോ ആണെങ്കിൽ, അവയെ മാട്രിക്സിൽ നിന്ന് വേർതിരിക്കുന്നതിനുള്ള മറ്റൊരു ശക്തമായ മാർഗ്ഗം (അല്ലെങ്കിൽ ഓരോന്നും മറ്റുള്ളവ) SPE മീഡിയയുടെ ഉപയോഗത്തിലൂടെയാണ്, അത് അവരുടേതായ ചാർജിലൂടെ അവരെ ആകർഷിക്കാൻ കഴിയും.

ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ക്ലാസിക് ഇലക്ട്രോസ്റ്റാറ്റിക് ആകർഷണ നിയമങ്ങൾ ബാധകമാണ്. ധ്രുവീയ സ്വഭാവസവിശേഷതകളെ ആശ്രയിക്കുന്ന വേർപിരിയലുകളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, "ഇഷ്ടം പോലെ അലിഞ്ഞുചേരുന്ന" ഇടപെടലുകളുടെ മാതൃകയിൽ, ചാർജ്ജ് ചെയ്ത സംസ്ഥാന ഇടപെടലുകൾ "എതിരാളികൾ ആകർഷിക്കുന്നു" എന്ന നിയമത്തിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, നിങ്ങൾക്ക് ഉപരിതലത്തിൽ പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള ഒരു SPE മീഡിയം ഉണ്ടായിരിക്കാം. പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള പ്രതലത്തെ സന്തുലിതമാക്കാൻ, സാധാരണയായി നെഗറ്റീവ് ചാർജുള്ള ഒരു സ്പീഷീസ് (ഒരു അയോൺ) ഉണ്ട്. നിങ്ങളുടെ നെഗറ്റീവ് ചാർജുള്ള അനലിറ്റ് സിസ്റ്റത്തിൽ അവതരിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, തുടക്കത്തിൽ ബന്ധിപ്പിച്ച അയോണിനെ സ്ഥാനഭ്രഷ്ടനാക്കാനും പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള SPE പ്രതലവുമായി സംവദിക്കാനും അതിന് കഴിവുണ്ട്. ഇത് SPE ഘട്ടത്തിൽ വിശകലനം നിലനിർത്തുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു. അയോണുകളുടെ ഈ കൈമാറ്റത്തെ "അനിയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച്" എന്ന് വിളിക്കുന്നു, ഇത് "അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച്" SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ വിശാലമായ വിഭാഗത്തിൻ്റെ ഒരു ഉദാഹരണം മാത്രമാണ്. ഈ ഉദാഹരണത്തിൽ, പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള സ്പീഷിസുകൾക്ക് മൊബൈൽ ഘട്ടത്തിൽ തുടരാനും പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള എസ്പിഇ പ്രതലവുമായി ഇടപഴകാതിരിക്കാനും ശക്തമായ പ്രോത്സാഹനമുണ്ടാകും, അതിനാൽ അവ നിലനിർത്തില്ല. കൂടാതെ, SPE ഉപരിതലത്തിന് അതിൻ്റെ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് പ്രോപ്പർട്ടികൾ കൂടാതെ മറ്റ് സ്വഭാവസവിശേഷതകൾ ഇല്ലെങ്കിൽ, നിഷ്പക്ഷ സ്പീഷീസുകളും ചുരുങ്ങിയത് നിലനിർത്തും (എന്നിരുന്നാലും, അത്തരം മിശ്രിതമായ SPE ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ നിലവിലുണ്ട്, അതേ SPE മീഡിയത്തിൽ തന്നെ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ചും റിവേഴ്സ്ഡ് ഫേസ് നിലനിർത്തൽ സംവിധാനങ്ങളും ഉപയോഗിക്കാൻ നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു. ).

അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് മെക്കാനിസങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ ശ്രദ്ധിക്കേണ്ട ഒരു പ്രധാന വ്യത്യാസം അനലിറ്റിൻ്റെ ചാർജ് നിലയുടെ സ്വഭാവമാണ്. വിശകലനം എല്ലായ്പ്പോഴും ചാർജ്ജ് ചെയ്തിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, അത് ലായനിയുടെ pH പരിഗണിക്കാതെ തന്നെ, അത് "ശക്തമായ" സ്പീഷിസായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. ചില pH വ്യവസ്ഥകളിൽ മാത്രമേ അനലിറ്റ് ചാർജ് ചെയ്തിട്ടുള്ളൂ എങ്കിൽ, അത് "ദുർബലമായ" സ്പീഷിസായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. നിങ്ങളുടെ അനലിറ്റുകളെ കുറിച്ച് മനസ്സിലാക്കാനുള്ള ഒരു പ്രധാന സ്വഭാവമാണിത്, കാരണം ഏത് തരം SPE മീഡിയയാണ് ഉപയോഗിക്കേണ്ടതെന്ന് ഇത് നിർണ്ണയിക്കും. പൊതുവായി പറഞ്ഞാൽ, വിപരീതങ്ങൾ ഒരുമിച്ച് പോകുന്നതിനെക്കുറിച്ച് ചിന്തിക്കുന്നത് ഇവിടെ സഹായിക്കും. ഒരു ദുർബലമായ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് എസ്പിഇ സോർബൻ്റിനെ "ശക്തമായ" സ്പീഷീസുമായും ശക്തമായ അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് സോർബൻ്റിനെ "ദുർബലമായ" അനലിറ്റുമായി ജോടിയാക്കുന്നത് നല്ലതാണ്.