ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിനെ ഡിയോക്‌സിറൈബോ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് (ഡിഎൻഎ), റൈബോ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് (ആർഎൻഎ) എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിരിക്കുന്നു, അവയിൽ ആർഎൻഎയെ റൈബോസോമൽ ആർഎൻഎ (ആർആർഎൻഎ), മെസഞ്ചർ ആർഎൻഎ (എംആർഎൻഎ) എന്നിങ്ങനെ വിഭജിക്കാം, വ്യത്യസ്ത പ്രവർത്തനങ്ങൾക്കനുസരിച്ച് ആർഎൻഎ (ടിആർഎൻഎ) കൈമാറ്റം ചെയ്യാം.

ഡിഎൻഎ പ്രധാനമായും ന്യൂക്ലിയസ്, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ, ക്ലോറോപ്ലാസ്റ്റുകൾ എന്നിവയിൽ കേന്ദ്രീകരിച്ചിരിക്കുന്നു, അതേസമയം ആർഎൻഎ പ്രധാനമായും സൈറ്റോപ്ലാസത്തിലാണ് വിതരണം ചെയ്യുന്നത്.

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളിൽ പ്യൂരിൻ ബേസുകളും പിരിമിഡിൻ ബേസുകളും സംയോജിപ്പിച്ച ഇരട്ട ബോണ്ടുകൾ ഉള്ളതിനാൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾക്ക് അൾട്രാവയലറ്റ് ആഗിരണത്തിൻ്റെ സവിശേഷതകളുണ്ട്. ഡിഎൻഎ സോഡിയം ലവണങ്ങളുടെ അൾട്രാവയലറ്റ് ആഗിരണം ഏകദേശം 260nm ആണ്, അതിൻ്റെ ആഗിരണം A260 ആയി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് 230nm-ൽ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന തൊട്ടിയിലാണ്, അതിനാൽ അൾട്രാവയലറ്റ് സ്പെക്ട്രോസ്കോപ്പി ഉപയോഗിക്കാം. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ ഒരു ലുമിനോമീറ്റർ ഉപയോഗിച്ച് അളവിലും ഗുണപരമായും നിർണ്ണയിക്കപ്പെടുന്നു.

പോളി ആസിഡുകൾക്ക് തുല്യമായ ആംഫോലൈറ്റുകളാണ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ. ന്യൂട്രൽ അല്ലെങ്കിൽ ആൽക്കലൈൻ ബഫറുകൾ ഉപയോഗിച്ച് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളെ അയോണുകളായി വിഘടിപ്പിക്കുകയും ആനോഡിലേക്ക് നീങ്ങാൻ ഒരു വൈദ്യുത മണ്ഡലത്തിൽ സ്ഥാപിക്കുകയും ചെയ്യാം. ഇതാണ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൻ്റെ തത്വം.

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും ശുദ്ധീകരണ തത്വങ്ങളും ആവശ്യകതകളും

1. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് പ്രാഥമിക ഘടനയുടെ സമഗ്രത ഉറപ്പാക്കുക

2. മറ്റ് തന്മാത്രകളുടെ മലിനീകരണം ഇല്ലാതാക്കുക (ഡിഎൻഎ എക്‌സ്‌ട്രാക്റ്റുചെയ്യുമ്പോൾ ആർഎൻഎ ഇടപെടൽ ഒഴിവാക്കുന്നത് പോലെ)

3. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് സാമ്പിളുകളിൽ എൻസൈമുകളെ തടയുന്ന ജൈവ ലായകങ്ങളും ലോഹ അയോണുകളുടെ ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയും ഉണ്ടാകരുത്.

4. പ്രോട്ടീനുകൾ, പോളിസാക്രറൈഡുകൾ, ലിപിഡുകൾ തുടങ്ങിയ മാക്രോമോളികുലാർ പദാർത്ഥങ്ങൾ കഴിയുന്നത്ര കുറയ്ക്കുക

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും ശുദ്ധീകരണ രീതിയും

1. ഫിനോൾ / ക്ലോറോഫോം എക്സ്ട്രാക്ഷൻ രീതി

1956-ലാണ് ഇത് കണ്ടുപിടിച്ചത്. കോശം തകർന്ന ലിക്വിഡ് അല്ലെങ്കിൽ ടിഷ്യു ഹോമോജെനേറ്റ് ഫിനോൾ/ക്ലോറോഫോം ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിച്ച ശേഷം, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഘടകങ്ങൾ, പ്രധാനമായും ഡിഎൻഎ, ജലീയ ഘട്ടത്തിൽ ലയിക്കുന്നു, ലിപിഡുകൾ പ്രധാനമായും ഓർഗാനിക് ഘട്ടത്തിലാണ്, പ്രോട്ടീനുകൾ രണ്ടിനും ഇടയിലാണ് സ്ഥിതി ചെയ്യുന്നത്. ഘട്ടങ്ങൾ.

2. മദ്യപാനം

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിൻ്റെ ജലാംശം പാളി ഇല്ലാതാക്കാനും നെഗറ്റീവ് ചാർജുള്ള ഫോസ്ഫേറ്റ് ഗ്രൂപ്പിനെ തുറന്നുകാട്ടാനും എത്തനോളിന് കഴിയും, കൂടാതെ NA﹢ പോലുള്ള പോസിറ്റീവ് ചാർജുള്ള അയോണുകൾ ഫോസ്ഫേറ്റ് ഗ്രൂപ്പുമായി സംയോജിച്ച് ഒരു അവശിഷ്ടം ഉണ്ടാക്കുന്നു.

3. ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് കോളം രീതി

പ്രത്യേക സിലിക്ക അധിഷ്‌ഠിത ആഡ്‌സോർപ്‌ഷൻ മെറ്റീരിയലിലൂടെ, ഡിഎൻഎ പ്രത്യേകമായി ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടും, അതേസമയം ആർഎൻഎയും പ്രോട്ടീനും സുഗമമായി കടന്നുപോകാൻ കഴിയും, തുടർന്ന് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിനെ ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഉയർന്ന ഉപ്പും കുറഞ്ഞ pH ഉം ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ ന്യൂക്ലിക്കിനെ വേർതിരിച്ച് ശുദ്ധീകരിക്കാൻ കുറഞ്ഞ ഉപ്പും ഉയർന്ന pH ഉം ഉള്ള elute ഉപയോഗിക്കുന്നു. ആസിഡ്.

4. തെർമൽ ക്രാക്കിംഗ് ആൽക്കലി രീതി

ആൽക്കലൈൻ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ പ്രധാനമായും അവയെ വേർതിരിക്കുന്നതിന് കോവാലൻ്റ്ലി അടച്ച വൃത്താകൃതിയിലുള്ള പ്ലാസ്മിഡുകളും ലീനിയർ ക്രോമാറ്റിനും തമ്മിലുള്ള ടോപ്പോളജിക്കൽ വ്യത്യാസങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു. ക്ഷാരാവസ്ഥയിൽ, ഡിനേച്ചർഡ് പ്രോട്ടീനുകൾ ലയിക്കുന്നു.

5. തിളയ്ക്കുന്ന പൈറോളിസിസ് രീതി

ഡിഎൻഎ സൊല്യൂഷൻ ലീനിയർ ഡിഎൻഎ തന്മാത്രകളുടെ ഗുണങ്ങൾ പ്രയോജനപ്പെടുത്തി ഡിഎൻഎ ശകലങ്ങളെ ഡിനേച്ചർഡ് പ്രോട്ടീനുകളും സെല്ലുലാർ അവശിഷ്ടങ്ങളും സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ വഴി രൂപപ്പെടുന്ന അവശിഷ്ടങ്ങളിൽ നിന്ന് വേർതിരിക്കുന്നു.

6. നാനോമാഗ്നറ്റിക് ബീഡ്സ് രീതി

സൂപ്പർപരമാഗ്നറ്റിക് നാനോപാർട്ടിക്കിളുകളുടെ ഉപരിതലം മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നതിനും പരിഷ്‌ക്കരിക്കുന്നതിനും നാനോ ടെക്‌നോളജി ഉപയോഗിച്ച്, സൂപ്പർപാരാമഗ്നെറ്റിക് സിലിക്കൺ ഓക്‌സൈഡ് നാനോ-മാഗ്നറ്റിക് ബീഡുകൾ തയ്യാറാക്കുന്നു. കാന്തിക മുത്തുകൾക്ക് ഒരു മൈക്രോസ്കോപ്പിക് ഇൻ്റർഫേസിലെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് തന്മാത്രകളെ പ്രത്യേകമായി തിരിച്ചറിയാനും കാര്യക്ഷമമായി ബന്ധിപ്പിക്കാനും കഴിയും. സിലിക്ക നാനോസ്ഫിയറുകളുടെ സൂപ്പർപാരാമാഗ്നറ്റിക് ഗുണങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ച്, ചയോട്രോപിക് ലവണങ്ങൾ (ഗ്വാനിഡിൻ ഹൈഡ്രോക്ലോറൈഡ്, ഗ്വാനിഡിൻ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് മുതലായവ), ഒരു ബാഹ്യ കാന്തികക്ഷേത്രം, ഡിഎൻഎ, ആർഎൻഎ എന്നിവ രക്തം, മൃഗകലകൾ, ഭക്ഷണം, രോഗകാരികളായ സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ, മറ്റ് സാമ്പിളുകൾ എന്നിവയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചു.