എന്ന രീതികൾപ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണം:

പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണം, വേർതിരിക്കൽ, പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണം എന്നിവയുടെ രീതി, പ്രോട്ടീൻ യഥാർത്ഥ കോശങ്ങളിൽ നിന്നോ ടിഷ്യൂകളിൽ നിന്നോ അലിഞ്ഞുചേർന്ന അവസ്ഥയിൽ പുറത്തിറങ്ങുകയും ജൈവിക പ്രവർത്തനം നഷ്ടപ്പെടാതെ യഥാർത്ഥ സ്വാഭാവിക അവസ്ഥയിൽ തുടരുകയും ചെയ്യുന്നു. ഇക്കാരണത്താൽ, മെറ്റീരിയൽ മൃഗങ്ങളെയും അഡിപ്പോസ് ടിഷ്യുകളെയും നീക്കം ചെയ്യണം, വിത്ത് മെറ്റീരിയൽ ടാന്നിൻസ് പോലുള്ള വസ്തുക്കളിൽ നിന്ന് വിത്ത് കോട്ടിൻ്റെ മലിനീകരണം പോലും നീക്കം ചെയ്യണം, എണ്ണ വിത്ത് കുറഞ്ഞ തിളപ്പിക്കുന്ന ജൈവ ലായകമാണ് ഉപയോഗിക്കുന്നത്.

1. പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണ രീതി, വലിപ്പം, വ്യത്യസ്ത വേർതിരിക്കൽ വിശകലന രീതികൾ: ഡയാലിസിസ്, അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ എന്നിവ ഈ പ്രോട്ടീനുകളെ അർദ്ധ-പ്രവേശന സ്തരത്തിലൂടെ കടന്നുപോകാൻ കഴിയാത്ത തന്മാത്രകളുടെ സ്വഭാവത്തിലൂടെ കടന്നുപോകാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു; സാന്ദ്രത ഗ്രേഡിയൻ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ മീഡിയത്തിലെ പ്രോട്ടീൻ്റെ ഗുണനിലവാരവും സാന്ദ്രതയും കണികകളിൽ കൂടുതൽ സ്വാധീനം ചെലുത്തും. സെറ്റ്ലിംഗ് വേഗത വേഗത്തിലാണ്; ജെൽ ഫിൽട്രേഷൻ ഒരു തരം കോളം ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിയാണ്.

2. ഉപയോഗത്തിലെ സൊല്യൂബിലിറ്റി വ്യത്യാസത്തിൻ്റെ വേർതിരിവ്: പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രകളുടെ നെറ്റ് ചാർജ് പൂജ്യം ഐസോഇലക്ട്രിക് പോയിൻ്റിലായതിനാൽ ഇലക്ട്രോ-പ്രെസിപിറ്റേഷൻ, തന്മാത്രകൾ തമ്മിലുള്ള ഇലക്ട്രോസ്റ്റാറ്റിക് വികർഷണം കുറയ്ക്കുന്നു, സമാഹരിക്കാൻ എളുപ്പമാണ്, ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ ലായകത; ഉപ്പ് ലായനിയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഉപ്പ് ലായനി പ്രോട്ടീൻ്റെ ലായകത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയോ കുറയ്ക്കുകയോ ചെയ്യുന്നു.

3. ചാർജ് വ്യത്യസ്ത രീതികളാൽ വേർതിരിച്ച് വിശകലനം ചെയ്യുന്നു, പ്രധാന ഉള്ളടക്കങ്ങളിൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു.

4. രീതികൾപ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണംപ്രോട്ടീനുകളുടെ സെലക്ടീവ് അഡ്‌സോർപ്‌ഷനും വേർതിരിക്കലും കണികാ അഡ്‌സോർപ്‌ഷൻ്റെ ശക്തി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

5. അഫിനിറ്റി ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി ലിഗാൻഡുകൾ വേർതിരിക്കുന്നതിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്. ഈ ജൈവിക സ്വഭാവം പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രകളെ ലിഗാൻഡ് എന്ന് വിളിക്കുന്ന മറ്റൊരു തന്മാത്രയുമായി സഹവർത്തിത്വത്തിന് പകരം പ്രത്യേകമായി ബന്ധിപ്പിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു.

6. പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണ രീതി: കുറഞ്ഞ താപനിലയുള്ള ഓർഗാനിക് ലായക മഴയുടെ രീതി: മിക്ക പ്രോട്ടീനുകളുടെയും ലയിക്കുന്നതും മഴയും കുറയ്ക്കുന്നതിന്, മെഥനോൾ, എത്തനോൾ പോലെയുള്ള വെള്ളത്തിൽ ലയിക്കുന്ന ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുക. ഈ രീതി റെസലൂഷൻ ഉപ്പിടുന്നതിനേക്കാൾ ഉയർന്നതാണ്, പക്ഷേ പ്രോട്ടീൻ കൂടുതൽ ഡിനേച്ചർ ചെയ്യുന്നു, എളുപ്പമുള്ളപ്പോൾ, കുറഞ്ഞ താപനിലയിൽ ഇത് ചെയ്യണം.

എങ്ങനെ ശുദ്ധീകരിക്കാംപ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണം:

പ്രോട്ടീൻ എങ്ങനെ ശുദ്ധീകരിക്കാം, പ്രോട്ടീൻ ഒരു വലിയ തന്മാത്രയാണ്, കൂടാതെ ആൽബുമിൻ്റെ വിവിധ തന്മാത്രാ വലുപ്പങ്ങൾ, പ്രോട്ടീനും ചെറിയ തന്മാത്ര വസ്തുക്കളും വേർതിരിക്കാൻ ചില ലളിതമായ രീതികളുണ്ട്, കൂടാതെ വേർതിരിക്കുന്ന പ്രോട്ടീൻ മിശ്രിതവും. ഡയാലിസിസ്, അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ, ജെൽ ഫിൽട്ടറേഷൻ, അപകേന്ദ്ര വേർതിരിക്കൽ എന്നിവയാണ് വിവിധ തന്മാത്രാ വലിപ്പത്തിലുള്ള പ്രോട്ടീനുകളെ വേർതിരിക്കുന്നതിനുള്ള പ്രധാന മാർഗ്ഗങ്ങൾ. പ്രോട്ടീൻ വേർതിരിക്കൽ രീതികളിൽ ഡയാലിസിസും അൾട്രാഫിൽട്രേഷനും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. വേർപെടുത്തേണ്ട ഡയാലിസിസ് മിശ്രിതം ഒരു സെമിപെർമെബിൾ മെംബ്രൺ കൊണ്ട് നിർമ്മിച്ച ഒരു ഡയാലിസിസ് ബാഗിൽ വയ്ക്കുന്നു, തുടർന്ന് വേർപെടുത്തുന്നതിനായി ഡയാലിസിസ് ലായനിയിൽ മുക്കിയിരിക്കും. അൾട്രാഫിൽട്രേഷൻ എന്നത് ഒരു സെമി-പെർമിബിൾ മെംബ്രണിലെ അപകേന്ദ്രബലം അല്ലെങ്കിൽ മർദ്ദം ഉപയോഗിച്ച് വെള്ളവും മറ്റ് ചെറിയ തന്മാത്രകളും കടന്നുപോകുകയും അർദ്ധ-പ്രവേശന സ്തരത്തിൽ പ്രോട്ടീനുകളെ കുടുക്കുകയും ചെയ്യുന്ന പ്രക്രിയയാണ്. ഈ രണ്ട് രീതികളും പ്രോട്ടീൻ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള മാക്രോമോളിക്യൂളുകളിൽ നിന്നും അജൈവ ഉപ്പ് അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ചെറിയ തന്മാത്രകളിൽ നിന്നും വേർതിരിക്കാം. അവ പലപ്പോഴും ഉപ്പിട്ടതാണ്, ഉപ്പ് പിരിച്ചുവിടൽ രീതിയുമായി സംയോജിച്ച് ഉപയോഗിക്കുന്നു, അല്ലെങ്കിൽ അജൈവ ഉപ്പ് ലായനികൾ ഉപയോഗിച്ച് ഉപ്പിട്ട ശേഷം ഈ രണ്ട് രീതികൾ പുറത്തെടുക്കാൻ പരിചയപ്പെടുത്താം.

1. സാൾട്ടിംഗ്-ഔട്ട് രീതി ഉപയോഗിച്ച് പ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതെങ്ങനെ: ഉപ്പ് ലായനിയിലെ പ്രോട്ടീൻ്റെ ലായകത ഉപ്പിൻ്റെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് വർദ്ധിക്കും എന്നതാണ്, എന്നാൽ ഉപ്പിൻ്റെ സാന്ദ്രത ഒരു നിശ്ചിത മൂല്യത്തിലേക്ക് വർദ്ധിക്കുമ്പോൾ, ജല പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കും. കുറയുന്നു, തന്മാത്രാ ഘടനയുടെ ഉപരിതലത്തിലൂടെ ചാർജുകൾ സൃഷ്ടിക്കാൻ ചില പ്രോട്ടീനുകൾക്ക് കാരണമാകും, ഇത് ക്രമേണ നിർവീര്യമാക്കുകയും ഹൈഡ്രേഷൻ മെംബ്രൺ ക്രമേണ നശിപ്പിക്കപ്പെടുകയും ചെയ്യുന്നു, ഇത് ഒടുവിൽ അനുബന്ധ പ്രോട്ടീനുകളും തന്മാത്രകളും കൂട്ടിച്ചേർക്കാനും വ്യത്യസ്ത പരിഹാരങ്ങളിൽ നിന്ന് അവശിഷ്ടമാകാനും ഇടയാക്കും.

2. ഓർഗാനിക് സോൾവെൻ്റ് പെർസിപിറ്റേഷൻ രീതി: ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങളിൽ പ്രോട്ടീൻ്റെ ലായകത കുറയ്ക്കാൻ രണ്ട് കാരണങ്ങളുണ്ട്: നിർജ്ജലീകരണം ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഉപ്പ് ലായനിയായി പ്രോട്ടീൻ എങ്ങനെ ശുദ്ധീകരിക്കാം; രണ്ടാമതായി, ധ്രുവീയ ലായകങ്ങളിൽ വെള്ളത്തേക്കാൾ ഓർഗാനിക് ലായകങ്ങളുടെ വൈദ്യുത സ്ഥിരാങ്കം കുറയ്ക്കാൻ കഴിയും.

3. പ്രോട്ടീൻ പ്രിസിപിറ്റേറ്റിംഗ് ഏജൻ്റ്: പ്രോട്ടീൻ ഒരു പ്രിസിപിറ്റേറ്റിംഗ് ഏജൻ്റ് എന്ന നിലയിൽ ഒരു തരം അല്ലെങ്കിൽ പ്രോട്ടീൻ മഴയിൽ മാത്രമേ പ്രവർത്തിക്കൂ, സാധാരണമായവ ആൽക്കലൈൻ, പ്രോട്ടീൻ, ലെക്റ്റിൻ, ഹെവി ലോഹങ്ങൾ എന്നിവയാണ്.

4. പോളിയെത്തിലീൻ ഗ്ലൈക്കോൾ മഴ: വെള്ളത്തിൽ ലയിക്കുന്ന അയോണിക് അല്ലാത്ത പോളിമറുകൾ എങ്ങനെ ശുദ്ധീകരിക്കാംപ്രോട്ടീൻ ശുദ്ധീകരണം, പോളിയെത്തിലീൻ ഗ്ലൈക്കോൾ, സോഡിയം ഡെക്‌സ്‌ട്രാൻ സൾഫേറ്റ് എന്നിവ പ്രോട്ടീനുകളെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു.