СВП постои со децении и има добра причина. Кога научниците сакаат да ги отстранат компонентите на позадината од нивните примероци, тие се соочуваат со предизвикот да го сторат тоа без да ја намалат нивната способност точно и прецизно да го одредат присуството и количината на нивното соединение од интерес. SPE е една техника што научниците често ја користат за да помогнат во подготовката на нивните примероци за чувствителна инструментација што се користи за квантитативна анализа. SPE е робустен, работи за широк спектар на типови примероци, а нови производи и методи на SPE продолжуваат да се развиваат. Во срцето на развојот на тие методи е благодарноста дека иако зборот „хроматографија“ не се појавува во името на техниката, SPE сепак е форма на хроматографско раздвојување.

СПП: Тивката хроматографија

Има една стара поговорка „ако дрво падне во шума, а никој не е наоколу да го слушне, дали сè уште испушта звук? Таа изрека не потсетува на СВП. Тоа може да изгледа чудно да се каже, но кога размислуваме за SPE, прашањето станува „ако се случи раздвојување и нема детектор таму да го сними, дали навистина се случила хроматографијата? Во случајот со СВП, одговорот е убедливо „да!“ Кога развивате или решавате проблеми со метод на SPE, може многу корисно да се запамети дека SPE е само хроматографија без хроматограм. Кога ќе размислите за тоа, зарем Михаил Цвет, познат како „таткото на хроматографијата“, не го правеше она што денес би го нарекле „СВП“? Кога ги одвои своите мешавини од растителни пигменти со тоа што ѝ дозволи на гравитацијата да ги носи, растворени во растворувач, низ корито од мелена креда, дали беше толку многу поразлично од современиот SPE метод?

Разбирање на вашиот примерок

Бидејќи SPE се заснова на хроматографски принципи, во срцето на секој добар SPE метод е односот помеѓу аналитите, матрицата, стационарната фаза (SPE сорбентот) и мобилната фаза (растворувачите што се користат за миење или елуирање на примерокот) .

Разбирањето на природата на вашиот примерок колку што е можно е најдоброто место за почеток ако треба да развиете или да ги решите проблемите со SPE метод. За да избегнете непотребни обиди и грешки за време на развојот на методот, описите на физичките и хемиските својства и на вашите аналити и на матрицата се многу корисни. Откако ќе дознаете за вашиот примерок, ќе бидете во подобра позиција да го совпаднете тој примерок со соодветен SPE производ. На пример, познавањето на релативниот поларитет на аналитите во споредба едни со други и матрицата може да ви помогне да одлучите дали користењето на поларитетот за одвојување на аналитите од матрицата е вистинскиот пристап. Знаењето дали вашите аналити се неутрални или можат да постојат во наелектризирани состојби, исто така, може да ве насочи кон производите на SPE кои се специјализирани за задржување или елуирање на неутрални, позитивно наелектризирани или негативно наелектризирани видови. Овие два концепта претставуваат две од најчесто користените својства на аналитот за да се искористат при развивање методи на SPE и избор на SPE производи. Ако можете да ги опишете вашите аналити и истакнатите компоненти на матрицата со овие термини, на пат сте да изберете добра насока за развојот на вашиот метод на SPE.

Одвојување со афинитет

Принципите што ги дефинираат раздвојувањата што се случуваат во колона LC, на пример, се во игра во раздвојувањето на SPE. Основата на секое хроматографско одвојување е воспоставување на систем кој има различни степени на интеракција помеѓу компонентите на примерокот и двете фази присутни во колоната или SPE патронот, мобилната фаза и стационарната фаза.

Еден од првите чекори кон чувството на удобност со развојот на методот на SPE е да се запознаете со двата најчесто сретнувани типа на интеракции што се користат при раздвојувањето на SPE: поларитетот и/или состојбата на полнење.

Поларитет

Ако сакате да користите поларитет за да го исчистите вашиот примерок, еден од првите избори што треба да го направите е да одлучите кој „режим“ е најдобар. Најдобро е да се работи со релативно поларен SPE медиум и релативно неполарна мобилна фаза (т.е. нормален режим) или спротивно, релативно неполарен SPE медиум поврзан со релативно поларна мобилна фаза (т.е. обратен режим, така наречен само затоа што е спротивен на првично воспоставениот „нормален режим“).

Додека ги истражувате производите на SPE, ќе откриете дека фазите на SPE постојат во низа поларитети. Покрај тоа, изборот на растворувач за мобилна фаза нуди и широк опсег на поларитети, честопати многу прилагодливи преку употреба на мешавини на растворувачи, пуфери или други адитиви. Можен е голем степен на финост кога се користат разликите во поларитетот како клучна карактеристика што треба да се искористи за да се одвојат вашите аналити од матрични пречки (или едни од други).

Само имајте ја на ум старата хемиска поговорка „како се раствора како“ кога го разгледувате поларитетот како двигател за раздвојување. Колку соединението е повеќе слично со поларитетот на мобилната или стационарната фаза, толку е поголема веројатноста за посилна интеракција. Посилните интеракции со стационарната фаза доведуваат до подолго задржување на медиумот SPE. Силните интеракции со мобилната фаза доведуваат до помало задржување и порано елуирање.

Задолжителна држава

Ако аналитите од интерес или секогаш постојат во наелектризирана состојба или се способни да се стават во наелектризирана состојба според условите на растворот во кој се растворени (на пр. pH), тогаш друго моќно средство за нивно одвојување од матрицата (или секој друго) е преку употреба на медиуми на СВП кои можат да ги привлечат со сопствена наплата.

Во овој случај, се применуваат класични правила за електростатско привлекување. За разлика од разделбите кои се потпираат на карактеристиките на поларитетот и моделот на интеракции „сличното се раствора слично“, интеракциите на наелектризираните состојби функционираат според правилото „спротивните страни се привлекуваат“. На пример, може да имате SPE медиум кој има позитивен полнеж на својата површина. За да се балансира таа позитивно наелектризирана површина, обично има негативно наелектризиран вид (анјон) првично врзан за него. Ако вашиот негативно наелектризиран аналит се внесе во системот, тој има способност да го помести првично врзаниот анјон и да комуницира со позитивно наелектризираната SPE површина. Ова резултира со задржување на аналитот во фазата SPE. Оваа размена на анјони се нарекува „Anion Exchange“ и е само еден пример од пошироката категорија на SPE производи „Ion Exchange“. Во овој пример, позитивно наелектризираните видови би имале силен поттик да останат во мобилната фаза и да не комуницираат со позитивно наелектризираната површина SPE, така што нема да бидат задржани. И, освен ако површината на SPE нема други карактеристики покрај нејзините својства за размена на јони, неутралните видови исто така ќе бидат минимално задржани (иако, такви измешани производи SPE постојат, што ви овозможува да користите механизми за јонска размена и обратна фаза за задржување во истиот SPE медиум ).

Важна разлика што треба да се има на ум кога се користат механизми за јонска размена е природата на состојбата на полнење на аналитот. Ако аналитот е секогаш наполнет, без оглед на рН на растворот во кој се наоѓа, тој се смета за „силен“ вид. Ако аналитот се полни само под одредени услови на pH, тој се смета за „слаб“ вид. Тоа е важна карактеристика што треба да се разбере за вашите аналити бидејќи ќе определи кој тип на SPE медиум да се користи. Општо земено, размислувањето за спротивностите заедно ќе помогне тука. Препорачливо е да се спои слаб сорбент за размена на јони SPE со „силен“ вид и силен сорбент за размена на јони со „слаб“ аналит.