Грубо одвојување и фино одвојување на прочистување на протеините

Одвојувањето и прочистувањето на протеините е широко користено во биохемиското истражување и примена и е важна оперативна вештина. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ја состави содржината на сурово раздвојување и фино раздвојување напротеинипрочистување за секого. Типична еукариотска клетка може да содржи илјадници различни протеини, некои се многу богати, а некои содржат само неколку копии. За да се проучи одреден протеин, потребно е прво да се прочисти протеинот од други протеини и непротеински молекули.

19

Грубо одвојување

Кога ќе се добие протеинскиот екстракт (понекогаш измешан со нуклеински киселини, полисахариди итн.), се избира збир на соодветни методи за да се одвои саканиотпротеиниод други нечистотии. Општо земено, овој чекор на одвојување користи методи како што се солење, акумулација на изоелектрична точка и фракционирање на органски растворувач. Овие методи се карактеризираат со едноставност и голем капацитет за обработка, што може да отстрани многу нечистотии и да го концентрира протеинскиот раствор. Некои протеински екстракти се големи по волумен и не се погодни за концентрација со акумулација или солење. Можете да изберете ултрафилтрација, филтрација со гел, сушење со вакуум со замрзнување или други методи за концентрација.

Фино одвојување

По грубата фракционирање на примерокот, волуменот е генерално мал, а повеќето нечистотии се отстранети. За понатамошно прочистување, методите на хроматографија генерално вклучуваат филтрација со гел, хроматографија за размена на јони, адсорпциона хроматографија и афинитетна хроматографија. Доколку е потребно, можете да изберете и електрофореза, вклучително и зонска електрофореза, изоелектрична точка и сл. како финален процес на прочистување. Методот што се користи за одвојување на ниво на поделба е генерално мал во планирањето, но со висока резолуција.

Кристализацијата е последниот процес на сепарација и прочистување на протеините. Иако процесот на кристализација не гарантира дека протеинот мора да биде униформен, тоа е само кога одреден протеин има предност во растворот да формира кристал. Самиот процес на кристализација е придружен со одреден степен на прочистување, а со рекристализација може да се отстрани мала количина на фалсификуван протеин. Од денатуриранапротеининикогаш не е пронајден за време на процесот на кристализација, кристализацијата на протеините не е само знак на чистота, туку и моќно упатство за да се утврди дека производот е во природна состојба.


Време на објавување: 19-11-2020 година