Нуклеинската киселина е поделена на деоксирибонуклеинска киселина (ДНК) и рибонуклеинска киселина (РНК), меѓу кои РНК може да се подели на рибозомална РНК (рРНК), РНК гласник (мРНК) и трансферна РНК (тРНК) според различни функции.

ДНК е главно концентрирана во јадрото, митохондриите и хлоропластите, додека РНК главно се дистрибуира во цитоплазмата.

Бидејќи пуринските бази и пиримидинските бази имаат конјугирани двојни врски во нуклеинските киселини, нуклеинските киселини имаат карактеристики на апсорпција на ултравиолетови. Ултравиолетова апсорпција на натриумовите соли на ДНК е околу 260 nm, а нејзината апсорпција се изразува како А260 и е на корито на апсорпција на 230 nm, така што може да се користи ултравиолетова спектроскопија. Нуклеинските киселини квантитативно и квалитативно се одредуваат со луминометар.

Нуклеинските киселини се амфолити, кои се еквивалентни на поликиселините. Нуклеинските киселини можат да се дисоцираат во анјони со употреба на неутрални или алкални пуфери и да се стават во електрично поле за да се движат кон анодата. Ова е принципот на електрофореза.

Принципи и барања за екстракција и прочистување на нуклеинска киселина

1. Обезбедете го интегритетот на примарната структура на нуклеинската киселина

2. Елиминирајте ја контаминацијата на други молекули (како што е исклучување на интерференцијата на РНК при екстракција на ДНК)

3. Не треба да има органски растворувачи и високи концентрации на метални јони кои ги инхибираат ензимите во примероците на нуклеинска киселина

4. Намалете ги макромолекуларните супстанции како што се протеините, полисахаридите и липидите колку што е можно повеќе

Метод на екстракција и прочистување на нуклеинска киселина

1. Метод на екстракција на фенол/хлороформ

Измислен е во 1956 година. По третирањето на скршената течност или ткиво хомогенат со фенол/хлороформ, компонентите на нуклеинската киселина, главно ДНК, се раствораат во водната фаза, липидите главно се во органска фаза, а протеините се наоѓаат помеѓу двете фази.

2. Алкохолни врнежи

Етанолот може да го елиминира хидратантниот слој на нуклеинската киселина и да ја изложи негативно наелектризираната фосфатна група, а позитивно наелектризираните јони како NA﹢ може да се комбинираат со фосфатната група за да формираат талог.

3. Метод на хроматографска колона

Преку специјалниот материјал за адсорпција базиран на силициум диоксид, ДНК може да се адсорбира специфично, додека РНК и протеинот може непречено да поминат низ, а потоа да користат висока сол и ниска pH вредност за врзување на нуклеинската киселина и да се елуираат со ниска сол и висока pH за да се одвојат и прочистат нуклеинските киселина.

4. Метод на алкално термичко пукање

Алкалната екстракција главно ги користи тополошките разлики помеѓу ковалентно затворените кружни плазмиди и линеарниот хроматин за да ги раздвои. Во алкални услови, денатурираните протеини се растворливи.

5. Метод на пиролиза на вриење

Растворот на ДНК е термички обработен за да ги искористи својствата на линеарните молекули на ДНК за да ги одвои фрагментите на ДНК од талогот формиран од денатурирани протеини и клеточниот отпад со центрифугирање.

6. Метод на наномагнетни монистра

Со користење на нанотехнологијата за подобрување и менување на површината на суперпарамагнетните наночестички, се подготвуваат суперпарамагнетни нано-магнетни зрна од силициум оксид. Магнетните зрнца можат конкретно да препознаат и ефикасно да се врзат за молекулите на нуклеинската киселина на микроскопски интерфејс. Користејќи ги суперпарамагнетните својства на силициумските наносфери, под дејство на хаотропните соли (гванидин хидрохлорид, гванидин изотиоцијанат, итн.) и надворешното магнетно поле, ДНК и РНК беа изолирани од крв, животинско ткиво, храна, патогени микроорганизми и други примероци.