Fanadiovana proteinina ny fomba fisarahana

Ny fisarahana sy ny fanadiovana ny proteinina dia ampiasaina betsaka amin'ny fikarohana sy fampiharana biochemistry ary fahaiza-manao lehibe amin'ny asa. Ny sela eukaryotic mahazatra dia mety ahitana proteinina an'arivony isan-karazany, ny sasany manankarena ary ny sasany tsy misy afa-tsy kopia vitsivitsy. Mba hianarana zavatra irayproteinina, dia ilaina aloha ny fanadiovana ny proteinina amin'ny proteinina hafa sy ny molekiola tsy proteinina.

6ca4b93f5

1. Fomba fanaovana siraproteinina:

Ny sira tsy miandany dia misy fiantraikany lehibe amin'ny fahasosoran'ny proteinina. Amin'ny ankapobeny, miaraka amin'ny fampitomboana ny fatran'ny sira eo ambanin'ny fatran'ny sira ambany, dia mitombo ny solubility ny proteinina. Izany no atao hoe sira; rehefa mitombo hatrany ny fatran'ny sira, Mihena amin'ny ambaratonga isan-karazany ny solubility ny proteinina ary misaraka. Ity tranga ity dia antsoina hoe salting out.

2. Isoelectric teboka stacking fomba:

Ny fandroahana electrostatic eo amin'ny poti dia kely indrindra rehefa static ny proteinina, noho izany dia kely indrindra ny solubility. Ny teboka isoelektrik'ny proteinina isan-karazany dia samy hafa. Ny pH amin'ny vahaolana amin'ny conditionnement dia azo ampiasaina mba hahatongavana amin'ny teboka isoelektrique amin'ny proteinina Atao miangona, saingy io fomba io dia zara raha ampiasaina irery ary azo atambatra amin'ny fomba fanasiana sira.

3. Dialysis sy ultrafiltration:

Ny dialyse dia mampiasa membrane semi-permeable hanasaraka ireo proteinina misy habe molekiola samihafa. Ny fomba ultrafiltration dia mampiasa tsindry ambony na hery centrifugal mba hahatonga ny rano sy ny molekiola solute hafa mandalo amin'ny membrane semi-permeable, raha nyproteininamijanona eo amin'ny membrane. Azonao atao ny misafidy ny haben'ny mason-koditra mba hisakanana proteinina amin'ny lanja molekiola samihafa.

4.Gel filtration fomba:

Antsoina koa hoe chromatography exclusion size na molecular sieve chromatography, io no iray amin'ireo fomba mahasoa indrindra hanasarahana ny fangaro proteinina araka ny haben'ny molekiola. Ny fitaovana famenoana fampiasa matetika indrindra ao amin'ny tsanganana dia gel glucose (Sephadex ged) sy gel agarose (gel agarose).

5. Electrophoresis:

Ao anatin'ny fepetra pH mitovy, ny proteinina isan-karazany dia azo sarahina noho ny lanjan'ny molekiola samihafa sy ny fiampangana samihafa ao amin'ny sehatry ny herinaratra. Ilaina ny mitandrina ny isoelectric set electrophoresis, izay mampiasa ampholyte ho toy ny mpitatitra. Mandritra ny electrophoresis, ny ampholyte dia mamorona gradient pH izay ampiana tsikelikely avy amin'ny electrode positive mankany amin'ny electrode ratsy. Rehefa milomano ao anatiny ny proteinina misy fiampangana iray, dia hifandona izy. Ny toeran'ny pH amin'ny teboka elektrika dia tsy miato, ary io fomba io dia azo ampiasaina handinihana sy hanomanana proteinina isan-karazany.

6. Ion fifandraisana chromatography:

Ny mpiasan'ny fifandraisana ion dia ahitana ny cationic communication agents (toy ny carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) ary ny anionic communication agents (diethylaminoethyl cellulose). Rehefa mandalo ny tsanganana chromatography fifandraisana ion, ny proteinina miaraka amin'ny fiampangana mifanohitra amin'ny ion fifandraisana mpandraharaha dia adsorbed amin'ny ion fifandraisana mpandraharaha, ary avy eo ny adsorbed.proteininadia eluted amin'ny alalan'ny fanovana ny pH na ionic hery.

7. Affinity chromatography:

Ny chromatography affinity dia fomba tena ilaina amin'ny fanasarahana proteinina. Matetika dia mila dingana iray ihany ny manasaraka proteinina iray mba hodiovina amin'ny fifangaroan'ny proteinina mikorontana miaraka amin'ny fahadiovana ambony.

Ity fomba ity dia mifototra amin'ny fatorana manokana fa tsy covalent amin'ny proteinina sasany amin'ny molekiola hafa antsoina hoe ligand (Ligand).

Ny fitsipika fototra:

Misy proteinina ao anaty fifangaroana mikorontana ao anaty sela na sela, ary ny karazana sela tsirairay dia misy proteinina an'arivony samihafa. Noho izany, ny fanavahana ny proteinina dia ampahany manan-danja amin'ny biochemistry, ary tsy irery. Na ny fomba iray efa vita dia afaka manala ny karazana proteinina amin'ny proteinina mifangaro mikorontana, ka matetika no ampiasaina miaraka ny fomba maro.


Fotoana fandefasana: Nov-05-2020