Baltymų atskyrimas ir gryninimas yra plačiai naudojamas biochemijos tyrimuose ir taikyme ir yra svarbus veiklos įgūdis. „SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument“ sudarė neapdoroto ir smulkaus atskyrimo turinį.baltymųapsivalymas kiekvienam. Įprastoje eukariotų ląstelėje gali būti tūkstančiai skirtingų baltymų, kai kurie yra labai turtingi, o kai kuriuose yra tik kelios kopijos. Norint ištirti tam tikrą baltymą, pirmiausia reikia išvalyti baltymą nuo kitų baltymų ir nebaltyminių molekulių.

Grubus atskyrimas

Kai gaunamas baltymų ekstraktas (kartais sumaišytas su nukleino rūgštimis, polisacharidais ir kt.), parenkamas atitinkamų metodų rinkinys norimam atskirti.baltymųnuo kitų priemaišų. Paprastai šiame atskyrimo etape naudojami tokie metodai kaip išsūdymas, izoelektrinio taško kaupimas ir organinio tirpiklio frakcionavimas. Šie metodai pasižymi paprastumu ir dideliu apdorojimo pajėgumu, kuris gali pašalinti daug nešvarumų ir sukoncentruoti baltymų tirpalą. Kai kurie baltymų ekstraktai yra didelio tūrio ir nėra tinkami koncentruoti kaupiant ar išsūdant. Koncentravimui galite rinktis ultrafiltravimą, filtravimą geliu, džiovinimą šaldant vakuume ar kitus metodus.

Puikus atskyrimas

Po grubios mėginio frakcionavimo jo tūris paprastai yra mažas, o dauguma priemaišų buvo pašalintos. Tolesniam gryninimui chromatografijos metodai paprastai apima gelio filtravimą, jonų mainų chromatografiją, adsorbcinę chromatografiją ir afininę chromatografiją. Jei reikia, kaip galutinį valymo procesą galite pasirinkti ir elektroforezę, įskaitant zoninę elektroforezę, izoelektrinio taško rinkinį ir kt. Atskyrimo poskyrio lygiu metodas paprastai yra nedidelis, tačiau turi didelę skiriamąją gebą.

Kristalizacija yra galutinis baltymų atskyrimo ir gryninimo procesas. Nors kristalizacijos procesas neužtikrina, kad baltymas turi būti vienodas, tik tada, kai tam tikras baltymas turi pranašumą tirpale, kad susidarytų kristalas. Pats kristalizacijos procesas yra lydimas tam tikro gryninimo laipsnio, o perkristalizavus galima pašalinti nedidelį suklastotų baltymų kiekį. Nuo denatūruotobaltymųkristalizacijos proceso metu niekada nebuvo rasta, baltymų kristalizacija yra ne tik grynumo požymis, bet ir galinga gairė, leidžianti nustatyti, ar produktas yra natūralios būklės.