ວິທີການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງລະບົບການຊໍາລະທາດໂປຼຕີນແມ່ນຫຍັງ

ແມ່ນຫຍັງຄືວິທີການຊໍາລະລ້າງຂອງລະບົບການຊໍາລະລ້າງທາດໂປຼຕີນ? ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທີ່ຈະຕ້ອງຮູ້ລໍາດັບ DNA ລະຫັດຂອງທາດໂປຼຕີນທີ່ບໍລິສຸດ, ເພື່ອເບິ່ງວ່າຈຸລັງຫຼືເນື້ອເຍື່ອໃດຖືກສະແດງອອກຫຼາຍເກີນໄປໃນ gene ເປົ້າຫມາຍ, ແລະການອອກແບບ primers gene ເພື່ອຂະຫຍາຍ arf ຂອງຊິ້ນ DNA ເປົ້າຫມາຍ. ນີ້ແມ່ນອັນທີ່ເອີ້ນວ່າການໄດ້ມາຂອງຊິ້ນສ່ວນ gene ເປົ້າຫມາຍ.

ການກໍ່ສ້າງ vector ການສະແດງອອກ: ໃນ vector ການສະແດງອອກ prokaryotic ຫຼື eukaryotic ກັບລັກສະນະຂອງການສະແດງອອກ gene ທີ່ໄດ້ຮັບຕົວມັນເອງ, ບັນຫາຕົ້ນຕໍຂອງຂັ້ນຕອນນີ້ແມ່ນການກໍ່ສ້າງ plasmid ແລະ gene ມີຄວາມສົນໃຈ, ແລະລະບົບການສະແດງອອກ. ໄລຍະເວລາການສະແດງອອກຂອງ prokaryotic ແມ່ນສັ້ນ, ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍແມ່ນຕໍ່າ, ແລະຈໍານວນການສະແດງອອກຢ່າງຫຼວງຫຼາຍແມ່ນເປັນບູລິມະສິດ; gene ບໍ່ໄດ້ສະແດງອອກໃນ E. coli, ແລະບັນຫາເກີດຂື້ນໃນການເພີ່ມປະສິດທິພາບ codon. ໃນການພິຈາລະນາກິດຈະກໍາທີ່ດີກວ່າແລະການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງທາດໂປຼຕີນ, ນັກຄົ້ນຄວ້າໄດ້ເລືອກທີ່ຈະສະແດງອອກໃນເຊື້ອລາ Pichi. ການສະແດງອອກສົບຜົນສໍາເລັດຂອງການເພີ່ມປະສິດທິພາບ codon ແມ່ນສໍາຄັນ.

19

ວິທີການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງລະບົບການຊໍາລະທາດໂປຼຕີນແມ່ນຫຍັງ:

1. ຝົນ.

2. Electrophoresis: ທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄ່າໄຟຟ້າສູງຫຼືຕ່ໍາກວ່າຈຸດ isoelectric ຂອງມັນແລະສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍໄປທີ່ electrode ລົບຫຼື electrode ບວກຂອງພາກສະຫນາມໄຟຟ້າໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ. ສະຫນັບສະຫນູນຮູບເງົາ electrophoresis, electrophoresis, ແລະອື່ນໆ.

3. dialysis: ວິທີການທີ່ໃຊ້ສອງຖົງ dialysis ເພື່ອແຍກໂມເລກຸນຂະຫນາດໃຫຍ່ອອກຈາກທາດໂປຼຕີນແລະທາດປະສົມອິນຊີໂມເລກຸນຂະຫນາດນ້ອຍ.

4. Chromatography: ການແລກປ່ຽນ ion chromatography ໃຊ້ຄຸນສົມບັດຟຣີຂອງທາດໂປຼຕີນ. ພາຍໃຕ້ pH ສະເພາະ, ຄ່າບໍລິການແລະຄຸນສົມບັດຂອງທາດໂປຼຕີນແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ, ແລະພວກເຂົາສາມາດແຍກອອກໂດຍ chromatography ແລກປ່ຽນ ion. ໃນ chromatography ການແລກປ່ຽນ anion, ທາດໂປຼຕີນທີ່ມີພະລັງງານທາງລົບຕ່ໍາແມ່ນໄດ້ຖືກຄັດອອກກ່ອນ. sieves ໂມເລກຸນ, ເອີ້ນກັນວ່າ gel filtration. ທາດໂປຼຕີນຂະຫນາດນ້ອຍເຂົ້າໄປໃນຮູຂຸມຂົນແລະຢູ່ໃນພວກມັນເປັນເວລາດົນນານ. ທາດໂປຼຕີນຂະຫນາດໃຫຍ່ບໍ່ສາມາດເຂົ້າໄປໃນຮູຂຸມຂົນແລະໄຫຼອອກໂດຍກົງ.

5. ແມ່ນຫຍັງຄືວິທີການຊໍາລະລ້າງຂອງລະບົບການຊໍາລະລ້າງທາດໂປຼຕີນ? Ultracentrifugation: ການເຮັດຄວາມສະອາດທາດໂປຼຕີນສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອກໍານົດນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນແລະສາມາດນໍາໃຊ້ເປັນທາດໂປຼຕີນ. ການສ້າງທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນແມ່ນແຍກອອກ.


ເວລາປະກາດ: 21-04-2021