ວິ​ທີ​ການ​ສະ​ກັດ​ຖັນ​ການ​ສະ​ກັດ​ເອົາ​ອາ​ຊິດ Nucleic ແລະ​ຫຼັກ​ການ​

ອາຊິດນິວຄລີອິກແບ່ງອອກເປັນອາຊິດ deoxyribonucleic (DNA) ແລະອາຊິດ ribonucleic (RNA), ຊຶ່ງໃນນັ້ນ RNA ສາມາດແບ່ງອອກເປັນ ribosomal RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) ແລະໂອນ RNA (tRNA) ຕາມຫນ້າທີ່ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

DNA ແມ່ນສຸມໃສ່ຕົ້ນຕໍຢູ່ໃນແກນ, mitochondria ແລະ chloroplasts, ໃນຂະນະທີ່ RNA ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນແຈກຢາຍຢູ່ໃນ cytoplasm.

ເນື່ອງຈາກວ່າຖານ purine ແລະຖານ pyrimidine ໄດ້ປະສົມປະສານພັນທະບັດສອງເທົ່າໃນອາຊິດ nucleic, ອາຊິດ nucleic ມີລັກສະນະຂອງການດູດຊຶມ ultraviolet. ການດູດຊຶມ ultraviolet ຂອງເກືອ DNA sodium ແມ່ນປະມານ 260nm, ແລະການດູດຊຶມຂອງມັນຖືກສະແດງອອກເປັນ A260, ແລະມັນຢູ່ທີ່ trough ການດູດຊຶມຢູ່ທີ່ 230nm, ດັ່ງນັ້ນ ultraviolet spectroscopy ສາມາດນໍາໃຊ້ໄດ້. ອາຊິດນິວຄລີອິກແມ່ນກໍານົດປະລິມານແລະຄຸນນະພາບໂດຍ luminometer.

ອາຊິດນິວເຄຼຍແມ່ນ ampholytes, ເຊິ່ງທຽບເທົ່າກັບ polyacids. ອາຊິດນິວຄລີອິກສາມາດແຍກຕົວອອກເປັນໄອອອນໄດ້ໂດຍການໃຊ້ buffers ທີ່ເປັນກາງ ຫຼື ເປັນດ່າງ, ແລະວາງໄວ້ໃນສະຫນາມໄຟຟ້າເພື່ອເຄື່ອນທີ່ໄປສູ່ anode. ນີ້ແມ່ນຫຼັກການຂອງ electrophoresis.

ວິ​ທີ​ການ​ສະ​ກັດ​ຖັນ​ການ​ສະ​ກັດ​ເອົາ​ອາ​ຊິດ Nucleic ແລະ​ຫຼັກ​ການ​

ການສະກັດເອົາອາຊິດນິວຄລີອິກ ແລະການທໍາຄວາມສະອາດຫຼັກການ ແລະຂໍ້ກໍານົດ

1. ຮັບປະກັນຄວາມສົມບູນຂອງໂຄງສ້າງຫຼັກຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກ

2. ກໍາຈັດການປົນເປື້ອນຂອງໂມເລກຸນອື່ນໆ (ເຊັ່ນ: ບໍ່ລວມເອົາການແຊກແຊງ RNA ເມື່ອສະກັດ DNA)

3. ບໍ່ຄວນມີສານລະລາຍອິນຊີ ແລະ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງຂອງທາດໄອອອນໂລຫະທີ່ຍັບຍັ້ງເອນໄຊໃນຕົວຢ່າງອາຊິດນິວຄລີອິກ.

4. ຫຼຸດຜ່ອນສານ macromolecular ເຊັ່ນ: ໂປຣຕີນ, polysaccharides ແລະ lipids ເທົ່າທີ່ເປັນໄປໄດ້.

ວິ​ທີ​ການ​ສະ​ກັດ​ອາ​ຊິດ Nucleic ແລະ​ບໍ​ລິ​ສຸດ​

1. ວິທີການສະກັດເອົາ phenol/chloroform

ມັນຖືກປະດິດໃນປີ 1956. ຫຼັງຈາກການປິ່ນປົວຂອງແຫຼວທີ່ແຕກຫັກຂອງເຊນຫຼືເນື້ອເຍື່ອປະສົມກັບ phenol / chloroform, ອົງປະກອບຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກ, ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນ DNA, ຖືກລະລາຍໃນໄລຍະທີ່ມີນ້ໍາ, lipids ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຢູ່ໃນຂັ້ນຕອນອິນຊີ, ແລະທາດໂປຼຕີນແມ່ນຕັ້ງຢູ່ລະຫວ່າງສອງ. ໄລຍະ.

2. ຝົນເຫຼົ້າ

ເອທານອນສາມາດກຳຈັດຊັ້ນນ້ຳຂອງອາຊິດນິວຄລີອິກ ແລະ ເປີດເຜີຍກຸ່ມຟອສເຟດທີ່ມີຄ່າທາງລົບ, ແລະ ໄອອອນທີ່ມີຄ່າທາງບວກເຊັ່ນ NA﹢ ສາມາດສົມທົບກັບກຸ່ມຟອສເຟດເພື່ອສ້າງເປັນ precipitate.

3. ວິທີການຖັນ Chromatographic

ໂດຍຜ່ານອຸປະກອນການດູດຊຶມທີ່ອີງໃສ່ຊິລິກາພິເສດ, DNA ສາມາດດູດຊຶມໂດຍສະເພາະ, ໃນຂະນະທີ່ RNA ແລະທາດໂປຼຕີນສາມາດຜ່ານຢ່າງລຽບງ່າຍ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນໃຊ້ເກືອສູງແລະ pH ຕ່ໍາເພື່ອຜູກມັດອາຊິດນິວຄລີອິກ, ແລະ elute ດ້ວຍເກືອຕ່ໍາແລະ pH ສູງເພື່ອແຍກແລະຊໍາລະ nucleic. ອາຊິດ.

4. ວິທີການຂັດຄວາມຮ້ອນເປັນດ່າງ

ການສະກັດເອົາເປັນດ່າງສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ຄວາມແຕກຕ່າງທາງດ້ານ topological ລະຫວ່າງ plasmids ວົງທີ່ປິດ covalently ແລະ chromatin linear ເພື່ອແຍກພວກມັນ. ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເປັນດ່າງ, ທາດໂປຼຕີນຈາກ denatured ແມ່ນລະລາຍ.

5. ວິທີການຕົ້ມ pyrolysis

ການແກ້ໄຂ DNA ແມ່ນໄດ້ຮັບການປິ່ນປົວດ້ວຍຄວາມຮ້ອນເພື່ອໃຊ້ປະໂຫຍດຈາກຄຸນສົມບັດຂອງໂມເລກຸນ DNA ເສັ້ນເພື່ອແຍກຊິ້ນ DNA ອອກຈາກ precipitate ທີ່ສ້າງຂຶ້ນໂດຍທາດໂປຼຕີນຈາກ denatured ແລະສິ່ງເສດເຫຼືອຂອງຈຸລັງໂດຍການ centrifugation.

6. ວິທີການລູກປັດ Nanomagnetic

ການນໍາໃຊ້ nanotechnology ເພື່ອປັບປຸງແລະດັດແປງພື້ນຜິວຂອງ superparamagnetic nanoparticles, superparamagnetic silicon oxide nano-magnetic beads ໄດ້ຖືກກະກຽມ. ລູກປັດແມ່ເຫຼັກສາມາດຮັບຮູ້ໂດຍສະເພາະແລະປະສິດທິພາບຜູກມັດກັບໂມເລກຸນອາຊິດ nucleic ໃນການໂຕ້ຕອບກ້ອງຈຸລະທັດ. ການນໍາໃຊ້ຄຸນສົມບັດ superparamagnetic ຂອງ silica nanospheres, ພາຍໃຕ້ການປະຕິບັດຂອງເກືອ Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, ແລະອື່ນໆ) ແລະພາກສະຫນາມແມ່ເຫຼັກພາຍນອກ, DNA ແລະ RNA ໄດ້ຖືກແຍກອອກຈາກເລືອດ, ເນື້ອເຍື່ອສັດ, ອາຫານ, ຈຸລິນຊີທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດພະຍາດແລະຕົວຢ່າງອື່ນໆ.


ເວລາປະກາດ: 18-03-2022