ການແຍກແລະການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງທາດໂປຼຕີນແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການຄົ້ນຄວ້າແລະການນໍາໃຊ້ທາງຊີວະເຄມີແລະເປັນທັກສະການດໍາເນີນງານທີ່ສໍາຄັນ. ຈຸລັງ eukaryotic ປົກກະຕິສາມາດບັນຈຸທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍພັນຊະນິດ, ບາງຊະນິດອຸດົມສົມບູນຫຼາຍແລະບາງຊະນິດມີພຽງສອງສາມຕົວເທົ່ານັ້ນ. ໃນ​ຄໍາ​ສັ່ງ​ທີ່​ຈະ​ສຶກ​ສາ​ສະ​ເພາະ​ໃດ​ຫນຶ່ງ​ທາດໂປຼຕີນ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທໍາອິດທີ່ຈະຊໍາລະທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນແລະໂມເລກຸນທີ່ບໍ່ແມ່ນທາດໂປຼຕີນອື່ນໆ.

1. ວິທີການເກືອອອກຂອງທາດໂປຼຕີນ:

ເກືອທີ່ເປັນກາງມີຜົນກະທົບທີ່ສໍາຄັນຕໍ່ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນ. ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ດ້ວຍການເພີ່ມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເກືອພາຍໃຕ້ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເກືອຕ່ໍາ, ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນເພີ່ມຂຶ້ນ. ອັນນີ້ເອີ້ນວ່າ salting; ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງເກືອຍັງສືບຕໍ່ເພີ່ມຂື້ນ, ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນຫຼຸດລົງໃນລະດັບທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະແຍກອອກຈາກກັນ. ປະກົດການນີ້ເອີ້ນວ່າ salting ອອກ.

2. ວິທີການ stacking ຈຸດ isoelectric:

ການ repulsion electrostatic ລະຫວ່າງອະນຸພາກແມ່ນນ້ອຍທີ່ສຸດໃນເວລາທີ່ທາດໂປຼຕີນແມ່ນຄົງທີ່, ສະນັ້ນການລະລາຍແມ່ນຍັງນ້ອຍທີ່ສຸດ. ຈຸດ isoelectric ຂອງທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ. pH ຂອງ​ການ​ແກ້​ໄຂ​ປັບ​ສະ​ພາບ​ສາ​ມາດ​ນໍາ​ໃຊ້​ເພື່ອ​ໄປ​ເຖິງ​ຈຸດ isoelectric ຂອງ​ທາດ​ໂປຼ​ຕີນ​ທີ່​ເຮັດ​ໃຫ້​ມັນ​ສະ​ສົມ​, ແຕ່​ວິ​ທີ​ການ​ນີ້​ແມ່ນ​ບໍ່​ຄ່ອຍ​ຈະ​ນໍາ​ໃຊ້​ຢ່າງ​ດຽວ​ແລະ​ສາ​ມາດ​ລວມ​ເຂົ້າ​ກັບ​ວິ​ທີ​ການ​ອອກ​ເກືອ​.

3.ການ​ລ້າງ​ອາ​ກາດ​ແລະ ultrafiltration​:

Dialysis ໃຊ້ເຍື່ອເຄິ່ງ permeable ເພື່ອແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຂະຫນາດໂມເລກຸນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ວິທີການ ultrafiltration ໃຊ້ຄວາມກົດດັນສູງຫຼືຜົນບັງຄັບໃຊ້ centrifugal ເພື່ອເຮັດໃຫ້ນ້ໍາແລະໂມເລກຸນລະລາຍຂະຫນາດນ້ອຍອື່ນໆຜ່ານເຍື່ອ semi-permeable, ໃນຂະນະທີ່ທາດໂປຼຕີນຍັງຄົງຢູ່ໃນເຍື່ອ. ທ່ານ​ສາ​ມາດ​ເລືອກ​ເອົາ​ຂະ​ຫນາດ pore ທີ່​ແຕກ​ຕ່າງ​ກັນ​ເພື່ອ​ຂັດຂວາງ​ໂປຣ​ຕີນ​ຂອງ​ນ​້​ໍ​າ​ໂມ​ເລ​ກຸນ​ທີ່​ແຕກ​ຕ່າງ​ກັນ​.

4.Gel ວິທີການກອງ:

ຍັງເອີ້ນວ່າ chromatography ການຍົກເວັ້ນຂະຫນາດຫຼື chromatography sieve ໂມເລກຸນ, ນີ້ແມ່ນຫນຶ່ງໃນວິທີການທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ສຸດສໍາລັບການແຍກປະສົມທາດໂປຼຕີນຕາມຂະຫນາດໂມເລກຸນ. ວັດສະດຸຫຸ້ມຫໍ່ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປຫຼາຍໃນຖັນແມ່ນ Glucose gel (Sephadex ged) ແລະ gel agarose (gel agarose).

5. electrophoresis:

ພາຍໃຕ້ສະພາບ pH ດຽວກັນ, ທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆສາມາດແຍກອອກໄດ້ເນື່ອງຈາກນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະຄ່າບໍລິການທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ. ມັນເປັນມູນຄ່າທີ່ຈະເອົາໃຈໃສ່ກັບຊຸດ isoelectric electrophoresis, ເຊິ່ງໃຊ້ ampholyte ເປັນຜູ້ໃຫ້ບໍລິການ. ໃນລະຫວ່າງການ electrophoresis, ampholyte ປະກອບເປັນ gradient pH ຄ່ອຍໆເພີ່ມຈາກ electrode ບວກໄປຫາ electrode ລົບ. ເມື່ອທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄ່າທີ່ແນ່ນອນລອຍຢູ່ໃນມັນ, ມັນຈະເຂົ້າຫາກັນ. ຕໍາແຫນ່ງ pH ຂອງຈຸດໄຟຟ້າແມ່ນບໍ່ຕໍ່ເນື່ອງ, ແລະວິທີການນີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະແລະກະກຽມທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆ.

6.Ion chromatography ການສື່ສານ:

ຕົວແທນການສື່ສານ ion ປະກອບມີຕົວແທນການສື່ສານ cationic (ເຊັ່ນ: carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) ແລະຕົວແທນການສື່ສານ anionic (diethylaminoethyl cellulose). ເມື່ອຜ່ານຖັນ chromatography ການສື່ສານ ion, ທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄ່າກົງກັນຂ້າມກັບຕົວແທນການສື່ສານ ion ຈະຖືກດູດຊຶມໃສ່ຕົວແທນການສື່ສານ ion, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ adsorbed.ທາດໂປຼຕີນແມ່ນ eluted ໂດຍການປ່ຽນແປງ pH ຫຼືຄວາມເຂັ້ມແຂງ ionic.

7.Affinity chromatography:

Affinity chromatography ເປັນວິທີການທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ສຸດສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນ. ມັນມັກຈະຕ້ອງການພຽງແຕ່ຂັ້ນຕອນດຽວເພື່ອແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ແນ່ນອນເພື່ອເຮັດຄວາມສະອາດຈາກການປະສົມທາດໂປຼຕີນທີ່ສັບສົນທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງ.

ວິທີການນີ້ແມ່ນອີງໃສ່ສະເພາະແທນທີ່ຈະເປັນການຜູກມັດ covalent ຂອງທາດໂປຼຕີນບາງຢ່າງກັບໂມເລກຸນອື່ນທີ່ເອີ້ນວ່າ ligand (Ligand).

ຫຼັກການພື້ນຖານ:

ທາດໂປຼຕີນມີຢູ່ໃນສ່ວນປະສົມທີ່ສັບສົນຢູ່ໃນເນື້ອເຍື່ອຫຼືຈຸລັງ, ແລະແຕ່ລະປະເພດຂອງເຊນປະກອບດ້ວຍທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍພັນຊະນິດ. ດັ່ງນັ້ນ, ຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງທາດໂປຼຕີນແມ່ນສ່ວນຫນຶ່ງທີ່ສໍາຄັນຂອງຊີວະເຄມີ, ແລະມັນບໍ່ໄດ້ຢູ່ຄົນດຽວ. ຫຼືຊຸດຂອງວິທີການທີ່ກຽມພ້ອມສາມາດເອົາທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນທີ່ປະສົມທີ່ສັບສົນ, ດັ່ງນັ້ນວິທີການຈໍານວນຫຼາຍມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ໃນການປະສົມປະສານ.