Wat ass d'Reinigungsmethod vun derProtein Reinigungssystem? Et ass néideg fir d'kodéierend DNA Sequenz vum gereinegtem Protein ze kennen, fir ze kucken wéi eng Zellen oder Stoffer am Zilgen iwwerausgedréckt sinn, an Genprimer ze designen fir den Arf vum Zil DNA Fragment ze verstäerken. Dëst ass déi sougenannte Acquisitioun vun Zilgenfragmenter.

Konstruktioun vum Ausdrockvektor: Am prokaryoteschen oder eukaryoteschen Ausdrockvektor mat de Charakteristike vum kritt Genausdrock selwer ass den Haaptproblem vun dësem Schrëtt d'Plasmid an d'Gen vun Interessi, an den Ausdrocksystem ze konstruéieren. Déi prokaryotesch Ausdrockzäit ass kuerz, d'Käschte si niddereg, an eng grouss Quantitéit vum Ausdrock ass eng Prioritéit; de Gen gëtt net an E. coli ausgedréckt, an de Problem geschitt bei der Codonoptimiséierung. Am Hibléck op eng besser Aktivitéit a Reinigung vum Protein, hunn d'Fuerscher gewielt an Pichi Hef auszedrécken. Erfolleg Ausdrock vun der Codon Optimisatioun ass wichteg.

Wat ass d'Reinigungsmethod vum Proteinreinigungssystem:

1. Nidderschlag.

2. Elektrophorese: E gelueden Protein ass méi héich oder méi niddereg wéi säin isoelektresche Punkt a kann op déi negativ Elektrode oder déi positiv Elektrode vum elektresche Feld am elektresche Feld geréckelt ginn. Ënnerstëtzung Film Elektrophorese, Elektrophorese, etc.

3. Dialyse: Eng Method déi zwee Dialysebeutel benotzt fir grouss Moleküle vu Proteinen a kleng molekulare organesch Verbindungen ze trennen.

4. Chromatographie: Ionenaustauschchromatographie benotzt déi fräi Eegeschafte vu Proteinen. Ënnert engem spezifesche pH sinn d'Laascht an d'Eegeschafte vu Proteinen ënnerschiddlech, a si kënnen duerch Ionenaustauschchromatographie getrennt ginn. An Anionaustauschchromatographie ginn Proteine ​​mat gerénger negativer Kraaft als éischt eluéiert. Molekulare Seifen, och bekannt als Gelfiltratioun. Kleng Proteine ​​kommen an d'Poren a bleiwen an hinnen fir eng laang Zäit. Grouss Proteine ​​kënnen net an d'Poren erakommen an direkt ausfléien.

5. Wat ass d'Rengung Method vun derProtein Reinigungssystem? Ultracentrifugation: Proteinreinigung kann benotzt ginn fir d'Molekülgewiicht ze bestëmmen a kann als Protein benotzt ginn. D'Bildung vu Proteinen mat ënnerschiddlechen Dicht gëtt getrennt.