SPE gouf fir Joerzéngte ronderëm, a fir gudde Grond. Wann d'Wëssenschaftler Hannergrondkomponenten aus hire Proben ewechhuelen wëllen, si si mat der Erausfuerderung konfrontéiert ouni hir Fäegkeet ze reduzéieren fir d'Präsenz an d'Quantitéit vun hirer Interessiverbindung präzis a präzis ze bestëmmen. SPE ass eng Technik déi d'Wëssenschaftler dacks benotze fir hir Proben ze preparéieren fir déi sensibel Instrumentatioun déi fir quantitativ Analyse benotzt gëtt. SPE ass robust, funktionnéiert fir eng breet Palette vu Probetypen, an nei SPE Produkter a Methoden ginn weider entwéckelt. Am Kär vun der Entwécklung vun dëse Methoden ass eng Unerkennung datt och wann d'Wuert "Chromatographie" net am Numm vun der Technik erschéngt, SPE awer eng Form vu chromatografescher Trennung ass.

SPE: The Silent Chromatography

Et gëtt en aalt Spréchwuert "Wann e Bam an e Bësch fällt, a keen ass ronderëm et ze héieren, mécht en nach ëmmer e Klang?" Dat Spréch erënnert un d'SPE. Dat kéint komesch schéngen ze soen, awer wa mir un SPE denken, gëtt d'Fro "wann eng Trennung stattfënnt an et gëtt keen Detektor do fir se opzehuelen, ass d'Chromatographie wierklech geschitt?" Am Fall vun der SPE ass d'Äntwert e kléngt "Jo!" Wann Dir eng SPE Method entwéckelt oder léist, kann et ganz hëllefräich sinn ze erënneren datt SPE just Chromatographie ass ouni Chromatogramm. Wann Dir driwwer denkt, huet de Mikhail Tsvet, bekannt als "de Papp vun der Chromatographie", net gemaach wat mir haut "SPE" nennen? Wann hien seng Mëschunge vu Planzpigmenter getrennt huet andeems d'Schwéierkraaft se droen, an engem Léisungsmëttel opgeléist, duerch e Bett vu Buedemkräid, war et sou vill anescht wéi eng modern SPE-Methode?

Verstinn Är Prouf

Zënter SPE baséiert op chromatographesche Prinzipien, am Kär vun all gudder SPE Method ass d'Relatioun tëscht den Analyten, der Matrix, der stationärer Phase (de SPE Sorbent), an der mobiler Phase (d'Léisungsmëttel déi benotzt gi fir d'Probe ze wäschen oder ze elueren) .

D'Natur vun Ärer Probe sou vill wéi méiglech ze verstoen ass déi bescht Plaz fir unzefänken wann Dir eng SPE-Methode muss entwéckelen oder troubleshoot. Fir onnéideg Versuch a Feeler während der Methodentwécklung ze vermeiden, sinn d'Beschreiwunge vun de physikaleschen a chemeschen Eegeschafte vun Ären Analyten an der Matrix ganz hëllefräich. Wann Dir iwwer Är Probe wësst, sidd Dir an enger besserer Positioun fir dës Probe mat engem passenden SPE Produkt ze passen. Zum Beispill, d'relativ Polaritéit vun den Analyten am Verglach mateneen ze kennen an d'Matrix kann Iech hëllefen ze entscheeden ob d'Polaritéit benotzt fir Analyten vun der Matrix ze trennen déi richteg Approche ass. Wësse ob Är Analyten neutral sinn oder a gelueden Staaten existéiere kënnen och hëllefen Iech op SPE Produkter ze dirigéieren déi spezialiséiert sinn fir Neutraler, positiv gelueden oder negativ gelueden Arten ze behalen oder ze eluéieren. Dës zwee Konzepter representéieren zwee vun de meescht benotzten Analyteigenschaften fir ze profitéieren wann Dir SPE Methoden entwéckelen an SPE Produkter auswielen. Wann Dir Är Analyten an déi prominent Matrixkomponenten an dëse Begrëffer beschreiwen kënnt, sidd Dir um Wee fir eng gutt Richtung fir Är SPE Method Entwécklung ze wielen.

Trennung duerch Affinitéit

D'Prinzipien déi d'Trennungen definéieren déi an enger LC Kolonn optrieden, zum Beispill, sinn an enger SPE Trennung am Spill. D'Basis vun all chromatografescher Trennung ass d'Schafung vun engem System, dee variéiert Grad vun Interaktioun tëscht de Komponente vun der Probe an den zwou Phasen präsent an der Kolonn oder der SPE Patroun, der mobiler Phase an der stationärer Phase huet.

Ee vun den éischte Schrëtt fir sech bequem ze fillen mat der SPE Methodentwécklung ass d'Bekanntheet mat den zwou meeschte begéinte Aarte vun Interaktiounen ze hunn, déi an der SPE Trennung beschäftegt ginn: Polaritéit an / oder Ladungszoustand.

Polaritéit

Wann Dir Polaritéit benotzt fir Är Probe ze botzen, ass eng vun den éischte Choixen déi Dir maache musst ass ze entscheeden wat "Modus" am Beschten ass. Et ass am beschten mat engem relativ polare SPE Medium an enger relativ onpolarer mobiler Phase (dh Normalmodus) ze schaffen oder de Géigendeel, e relativ netpolare SPE Medium gekoppelt mat enger relativ polare mobiler Phase (dh ëmgedréint Modus, sou genannt just well et de Géigendeel ass vum ufanks etabléierten "normale Modus").

Wann Dir SPE Produkter entdeckt, fannt Dir datt SPE Phasen an enger Rei vu Polaritéiten existéieren. Ausserdeem bitt d'Wiel vum mobilen Phase Léisungsmëttel och eng breet Palette vu Polaritéiten, dacks ganz tunable duerch d'Benotzung vu Mëschunge vu Léisungsmëttelen, Puffer oder aner Additive. Et ass e grousse Grad vu Finesse méiglech wann Dir Polaritéitsdifferenzen als Schlësselcharakteristik benotzt fir ze exploitéieren fir Är Analyten vu Matrixinterferenzen (oder vuneneen) ze trennen.

Bedenkt just den alen Chimie Adage "wéi opgeléist wéi" wann Dir Polaritéit als Chauffeur fir Trennung berücksichtegt. Wat méi gläich eng Verbindung mat der Polaritéit vun enger mobiler oder stationärer Phase ass, wat méi wahrscheinlech ass et méi staark ze interagéieren. Méi staark Interaktioune mat der stationärer Phase féieren zu méi laang Retentiounen um SPE Medium. Staark Interaktioune mat der mobiler Phase féieren zu manner Retentioun a fréierer Elutioun.

Charge Staat

Wann d'Analyten vun Interessi entweder ëmmer an engem geluedenen Zoustand existéieren oder fäeg sinn duerch d'Konditioune vun der Léisung an deem se opgeléist sinn (zB pH) an e geluedenen Zoustand ze setzen, dann e weidert mächtegt Mëttel fir se vun der Matrix ze trennen (oder all aner) ass duerch d'Benotzung vu SPE Medien déi se mat enger eegener Charge unzéien kënnen.

An dësem Fall gëllen klassesch electrostatic Attraktioun Regelen. Am Géigesaz zu Trennungen, déi op Polaritéitseigenschaften vertrauen an dem "Like opléist wéi" Modell vun Interaktiounen, funktionnéieren gelueden Staatsinteraktiounen op der Regel vun "Opposite lackele." Zum Beispill kënnt Dir e SPE Medium hunn deen eng positiv Ladung op senger Uewerfläch huet. Fir déi positiv gelueden Uewerfläch ze balancéieren, gëtt et typesch eng negativ gelueden Spezies (en Anion) am Ufank un et gebonnen. Wann Ären negativ geluedenen Analyt an de System agefouert gëtt, huet et d'Fäegkeet den ursprénglech gebonnen Anion ze verdrängen an mat der positiv gelueden SPE Uewerfläch ze interagéieren. Dëst resultéiert an der Retention vum Analyt op der SPE Phase. Dësen Austausch vun Anionen gëtt "Anion Exchange" genannt an ass just ee Beispill vun der méi breet Kategorie vun "Ion Exchange" SPE Produkter. An dësem Beispill, positiv gelueden Spezies hätt e staarken Ureiz fir an der mobiler Phase ze bleiwen an net mat der positiv gelueden SPE Uewerfläch ze interagéieren, sou datt se net behalen ginn. An, ausser wann d'SPE Uewerfläch aner Charakteristiken zousätzlech zu hiren Ionenaustauscheigenschaften hat, wieren neutral Aarten och minimal behalen (obwuel sou gemëschte SPE Produkter existéieren, wat Iech erlaabt Ionenaustausch a Reversed Phase Retention Mechanismen am selwechte SPE Medium ze benotzen ).

E wichtegen Ënnerscheed fir am Kapp ze halen wann Dir Ionenaustauschmechanismen benotzt ass d'Natur vum Ladungszoustand vum Analyt. Wann den Analyt ëmmer gelueden ass, onofhängeg vum pH vun der Léisung an där et ass, gëtt et als "staark" Spezies ugesinn. Wann den Analyt nëmmen ënner bestëmmte pH Bedéngungen gelueden ass, gëtt et als "schwaach" Spezies ugesinn. Dat ass eng wichteg Feature fir iwwer Är Analyten ze verstoen well et wäert bestëmmen wéi eng Zort SPE Medien ze benotzen. Am Allgemengen, denken iwwer Géigewier zesummen wäert hëllefen eraus. Et ass unzeroden e schwaache Ionenaustausch SPE Sorbent mat enger "staark" Spezies an e staarken Ioneaustausch Sorbent mat engem "schwaache" Analyt ze koppelen.