Nukleinsäure ass opgedeelt an Deoxyribonukleinsäure (DNA) a Ribonukleinsäure (RNA), dorënner RNA kann a Ribosomal RNA (rRNA), Messenger RNA (mRNA) an Transfer RNA (tRNA) opgedeelt ginn no verschiddene Funktiounen.

DNA ass haaptsächlech am Kär, Mitochondrien a Chloroplaste konzentréiert, wärend RNA haaptsächlech am Zytoplasma verdeelt ass.

Well Purinbasen a Pyrimidinbasen Duebelbindungen an Nukleinsäuren konjugéiert hunn, hunn Nukleinsäuren d'Charakteristiken vun der ultravioleter Absorptioun. D'Ultraviolet Absorptioun vun DNA Natriumsalze ass ongeféier 260nm, a seng Absorptioun gëtt als A260 ausgedréckt, an et ass an der Absorptiountrough bei 230nm, sou datt ultraviolet Spektroskopie benotzt ka ginn. Nukleinsäure gi quantitativ a qualitativ duerch e Luminometer bestëmmt.

Nukleinsäuren sinn Ampholyte, déi gläichwäerteg mat Polysäuren sinn. Nukleinsäuren kënnen an Anionen dissoziéiert ginn andeems se neutral oder alkalesch Puffer benotzen, an an en elektrescht Feld plazéiert fir an d'Anode ze bewegen. Dëst ass de Prinzip vun der Elektrophorese.

Nukleinsäure Extraktioun a Reinigungsprinzipien an Ufuerderunge

1. Assuréieren d'Integritéit vun der Nukleinsäure Primärstruktur

2. Eliminéiert d'Kontaminatioun vun anere Molekülen (wéi d'RNA-Interferenz ausgeschloss beim Extrait vun DNA)

3. Et sollt keng organesch Léisungsmëttel an héich Konzentratioune vu Metallionen sinn, déi Enzymen an Nukleinsäureproben hemmen

4. Makromolekulär Substanzen wéi Proteinen, Polysacchariden a Lipiden sou vill wéi méiglech reduzéieren

Nukleinsäure Extraktioun a Reinigungsmethod

1. Phenol / Chloroform Extraktioun Method

Et gouf erfonnt an 1956. No der Behandlung vun der Zell gebrach Flëssegket oder Tissue homogenate mat Phenol / Chloroform, sinn d'Nukleinsäure Komponente, haaptsächlech DNA, an der wässerlecher Phase opgeléist, Lipiden sinn haaptsächlech an der organescher Phase, a Proteine ​​sinn tëscht deenen zwee lokaliséiert. Phasen.

2. Alkohol Nidderschlag

Ethanol kann d'Hydratatiounsschicht vun der Nukleinsäure eliminéieren an déi negativ gelueden Phosphatgrupp aussetze, a positiv gelueden Ionen wéi NA﹢ kënne mat der Phosphatgrupp kombinéieren fir e Nidderschlag ze bilden.

3. Chromatographesch Kolonn Method

Duerch dat speziellt Silica-baséiert Adsorptiounsmaterial kann DNA speziell adsorbéiert ginn, während RNA a Protein glat duerchgoe kënnen, an dann héich Salz an niddereg pH benotze fir Nukleinsäure ze binden, an eluere mat nidderegem Salz an héije pH fir Nuklein ze trennen an ze purifizéieren sauer.

4. Thermesch Rëss Alkali Method

Alkalesch Extraktioun benotzt haaptsächlech déi topologesch Differenzen tëscht kovalent zouene kreesfërmege Plasmiden a linear Chromatin fir se ze trennen. Ënner alkalesche Bedéngungen sinn denaturéiert Proteine ​​​​löslech.

5. Kachen Pyrolyse Method

D'DNA-Léisung gëtt Hëtztbehandelt fir d'Eegeschafte vu linearen DNA-Moleküle ze profitéieren fir DNA-Fragmenter aus dem Nidderschlag ze trennen, geformt duerch denaturéiert Proteinen a zellulären Debris duerch Zentrifugéierung.

6. Nanomagnetesch Perlen Method

Mat Nanotechnologie fir d'Uewerfläch vun superparamagnetesche Nanopartikelen ze verbesseren an z'änneren, ginn superparamagnetesch Siliziumoxid Nanomagnetesch Perlen virbereet. Déi magnetesch Perlen kënnen spezifesch un Nukleinsäuremoleküle op enger mikroskopescher Interface erkennen an effizient binden. Mat Hëllef vun de superparamagnetesche Properties vu Silica Nanosphären, ënner der Handlung vu Chaotropesche Salze (Guanidin-Hydrochlorid, Guanidin-Isothiocyanat, asw.) An e externe Magnéitfeld, DNA an RNA goufen aus Blutt, Déieregewebe, Liewensmëttel, pathogene Mikroorganismen an aner Proben isoléiert.