Methode vunProtein Reinigung:

D'Methode fir Proteinreinigung, Trennung a Reinigung vum Protein, de Protein gëtt aus den ursprénglechen Zellen oder Stoffer an engem opgeléisten Zoustand verëffentlecht a bleift am ursprénglechen natierlechen Zoustand ouni Verloscht vu biologescher Aktivitéit. Aus dësem Grond sollt d'Material Déieren- a Fettgewierer ewechhuelen, d'Somenmaterial soll souguer d'Verschmotzung vum Sommantel vu Substanzen wéi Tannine ofschielen, an d'Uelegsamen sollten am léifsten e niddereg-kochend organesche Léisungsmëttel benotzen.

1. D'Methode vun der Proteinreinigung, der Gréisst a verschiddene Trennungsanalysemethoden: Dialyse an Ultrafiltratioun benotzen dës Proteine ​​fir duerch d'Natur vu Molekülen ze passen, déi net duerch d'semi-permeabel Membran passéieren kënnen; Dichtgradient Zentrifusioun D'Qualitéit an d'Dicht vum Protein am Medium wäert e méi groussen Impakt op Partikelen hunn. Settlement Geschwindegkeet ass méi séier; Gelfiltratioun ass eng Aart vu Kolonnchromatographie.

2. Trennung vun der Solubilitéitsdifferenz am Gebrauch: Elektro-Nidderschlag, well d'Nettoladung vu Proteinmoleküle um null isoelektresche Punkt ass, wat d'elektrostatesch Oflehnung tëscht Molekülen reduzéiert, einfach ze aggregéieren, a minimal Solubilitéit; Salzléisung benotzt mat Salzléisung D'Konzentratioun erhéicht oder reduzéiert d'Léisbarkeet vum Protein.

3. D'Laascht gëtt getrennt an analyséiert duerch verschidde Methoden, den Haaptinhalt enthält Elektrophorese an Ionenaustauschchromatographie.

4. Methode vunProtein ReinigungDéi selektiv Adsorptioun an Trennung vu Proteinen notzen d'Kraaft vun der Partikeladsorptioun.

5. Affinitéitschromatographie baséiert op der Trennung vu Liganden. Dës biologesch Charakteristik erlaabt Proteinmoleküle spezifesch ze bindelen anstatt kovalent un eng aner Molekül genannt Ligand.

6. Methode vun der Proteinreinigung: Low-Temperatur organesch Léisungsmëttel Nidderschlagsmethod: Benotzt organesch Léisungsmëttel, déi mat Waasser mëschbar sinn, wéi Methanol, Ethanol, fir d'Léisbarkeet an d'Ausfäll vun de meeschte Proteinen ze reduzéieren. Dës Method ass méi héich wéi d'Resolutioun aussalzen, awer de Protein denaturéiert méi Wann et einfach ass, sollt et bei niddreger Temperatur gemaach ginn.

Wéi ze purifizéierenProtein Reinigung:

Wéi Protein ze purifizéieren, Protein ass eng grouss Molekül, a verschidde molekulare Gréissten vum Albumin, et ginn e puer méi einfach Methoden fir Protein a kleng Molekülmaterialien ze trennen, an och getrennt Proteinmëschung. D'Haaptmethoden fir Proteine ​​vu verschiddene molekulare Gréissten ze trennen sinn Dialyse, Ultrafiltratioun, Gelfiltratioun an Zentrifugal Trennung. Dialyse an Ultrafiltratioun ginn allgemeng a Protein Trennungsmethoden benotzt. D'Dialysemëschung, déi getrennt ass, gëtt an enger Dialysebeutel aus enger semipermeabeler Membran plazéiert, an dann an d'Dialyseléisung fir d'Trennung taucht. Ultrafiltratioun ass de Prozess vu Waasser an aner kleng Moleküle mat Zentrifugalkraaft oder Drock an enger semi-permeabeler Membran ze passéieren an Proteinen an der semi-permeabeler Membran ze fangen. Dës zwou Methoden kënne vu Protein-baséiert Makromoleküle an anorganesch Salz-baséiert kleng Moleküle getrennt ginn. Si ginn dacks aussalzéiert, a Verbindung mat der Salzopléisungsmethod benotzt, oder kënne agefouert ginn fir dës zwou Methoden erauszehuelen nodeems se mat anorganesche Salzléisungen aussalzen.

1. Wéi de Protein duerch d'Salting-out Method ze purifizéieren: D'Basis vun der Salting-out Method ass datt d'Léisbarkeet vum Protein an enger verdënnter Salzléisung mat der Erhéijung vun der Salzkonzentratioun eropgeet, awer wann d'Salzkonzentratioun op e bestëmmte Wäert eropgeet, Waasseraktivitéit gëtt erhéicht. Ofsenkung, wat am Tour kann e puer Proteine ​​​​verursaache fir Ladungen duerch d'molekulare Strukturuewerfläch ze generéieren fir graduell neutraliséiert ze ginn, an d'Hydratatiounsmembran gëtt graduell zerstéiert, wat schlussendlech verwandte Proteinen a Moleküle verursaache kann Agglomeratioun z'entwéckelen an aus verschiddene Léisungen auszeschléissen.

2. Organesch Léisungsmëttel Nidderschlagsmethod: Et ginn zwee Grënn fir d'Léisbarkeet vum Protein an organeschen Léisungsmëttelen ze reduzéieren: wéi Dir Protein als Salzléisung mat Dehydratioun purifizéiert; zweetens, kann d'dielectric konstante vun organesch Léisungsmëttelen wéi Waasser reduzéiert ginn A polare Léisungsmëttelen.

3. Protein Nidderschlag Agent: Protein als Nidderschlag Agent Akten nëmmen op eng Zort oder ee vun Protein Nidderschlag, gemeinsam sinn alkalesch, Protein, lectin, a Schwéiermetaller.

4. Polyethylenglycol Nidderschlag: Wéi purifizéiere Waasserlöslech net-ionesch Polymere firProtein Reinigung, wéi Polyethylenglycol an Natriumdextransulfat fir Proteinen auszeschléissen.