Нуклеин кислотасы дезоксирибонуклеиндик кислотага (ДНК) жана рибонуклеиндик кислотага (РНК) бөлүнөт, алардын арасында РНК рибосомалык РНКга (рРНК), кабарчы РНКга (мРНК) жана трансфер РНКга (тРНК) ар кандай функциялары боюнча бөлүнөт.

ДНК негизинен ядродо, митохондрияларда жана хлоропласттарда топтолсо, РНК негизинен цитоплазмада таралган.

Пуриндик негиздер менен пиримидиндик негиздер нуклеиндик кислоталарда кош байланыштарга ээ болгондуктан, нуклеиндик кислоталар ультра кызгылт көк сиңирүүчү өзгөчөлүктөргө ээ. ДНК натрий туздарынын ультра кызгылт көк сиңирүү 260 нм тегерегинде жана анын абсорбенциясы A260 катары көрсөтүлөт, ал эми 230 нмде сиңирүү чуңкурунда болот, ошондуктан ультрафиолет спектроскопиясын колдонсо болот. Нуклеиндик кислоталар сандык жана сапаттык жактан люминометр аркылуу аныкталат.

Нуклеин кислоталары амфолиттер болуп саналат, алар поликислоталарга барабар. Нуклеиндик кислоталар нейтралдуу же щелочтук буферлердин жардамы менен аниондорго ажырап, анодду көздөй жылыш үчүн электр талаасына жайгаштырылышы мүмкүн. Бул электрофорездин принциби.

Нуклеин кислотасын алуу жана тазалоо принциптери жана талаптары

1. Нуклеин кислотасынын биринчи структурасынын бүтүндүгүн камсыз кылуу

2. Башка молекулалардын булганышын жок кылуу (мисалы, ДНКны экстракциялоодо РНК интерференциясын жок кылуу)

3. Нуклеин кислоталарынын үлгүлөрүндө ферменттерди ингибирлөөчү органикалык эриткичтер жана металл иондорунун жогорку концентрациясы болбошу керек.

4. Белоктор, полисахариддер жана липиддер сыяктуу макромолекулярдык заттарды мүмкүн болушунча азайтыңыз

Нуклеин кислотасын алуу жана тазалоо ыкмасы

1. Фенол/хлороформ алуу ыкмасы

Ал 1956-жылы ойлоп табылган. Клетканын сынган суюктугун же кыртыш гомогенатын фенол/хлороформ менен дарылагандан кийин нуклеин кислотасынын компоненттери, негизинен ДНК суулуу фазада эрийт, липиддер негизинен органикалык фазада, ал эми белоктор экөөнүн ортосунда жайгашкан. фазалары.

2. Спирттин тунушу

Этанол нуклеин кислотасынын гидратация катмарын жок кыла алат жана терс заряддуу фосфат тобун ачат, ал эми NA﹢ сыяктуу оң заряддуу иондор фосфат тобу менен биригип, чөкмө пайда кыла алат.

3. Хроматографиялык колонна ыкмасы

Атайын кремнеземге негизделген адсорбциялык материал аркылуу ДНКны атайын адсорбциялоого болот, ал эми РНК жана белок жай аркылуу өтүп, андан кийин нуклеин кислотасын байланыштыруу үчүн жогорку туз жана төмөн рН колдонсо болот, ал эми нуклеинди бөлүү жана тазалоо үчүн аз туз жана жогорку рН менен элюта алат. кислота.

4. Термикалык крекинг щелочтук ыкмасы

Алкалиндик экстракцияда негизинен коваленттүү жабык тегерек плазмидалар менен сызыктуу хроматиндин ортосундагы топологиялык айырмачылыктар колдонулат. щелочтуу шарттарда денатуратталган белоктор эрийт.

5. Кайнатуу пиролиз ыкмасы

ДНК эритмеси центрифугалоо жолу менен денатуратталган протеиндер жана клеткалык калдыктар менен пайда болгон чөкмөдөн ДНК фрагменттерин бөлүп алуу үчүн сызыктуу ДНК молекулаларынын касиеттерин пайдалануу үчүн жылуулук менен иштетилет.

6. Наномагниттик шурулар ыкмасы

Суперпарамагниттик нанобөлүкчөлөрдүн бетин жакшыртуу жана өзгөртүү үчүн нанотехнологияны колдонуу менен суперпарамагниттик кремний оксиди нано-магниттик мончоктор даярдалат. Магниттик мончоктор микроскопиялык интерфейсте нуклеиндик кислотанын молекулаларын атайын таанып, эффективдүү байланыша алат. Кремний наносфераларынын суперпарамагниттик касиеттерин колдонуу менен, хаотроптук туздардын (гуанидин гидрохлориди, гуанидин изоцианаты ж.б.) жана тышкы магнит талаасынын таасири астында ДНК жана РНК кандан, жаныбарлардын ткандарынан, тамак-аштан, патогендик микроорганизмдерден жана башка үлгүлөрдөн бөлүнүп алынган.