Asîda nukleîk di nav asîdên deoksîrîbonukleî (ADN) û asîda ribonukleî (RNA) de tê dabeş kirin, ku di nav wan de RNA li gorî fonksiyonên cihê li ARNya rîbozomî (rRNA), RNA peyamber (mRNA) û RNA veguheztin (tRNA) tê dabeş kirin.

ADN bi giranî di navok, mîtokondrî û kloroplastan de kom dibe, lê RNA bi giranî di nav sîtoplazmayê de belav dibe.

Ji ber ku bazên purine û bazên pyrimidine di asîdên nukleîk de girêdanên ducarî hene, asîdên nukleîk xwedan taybetmendiyên vegirtina ultraviyole ne. Vejandina ultraviyole ya xwêyên sodyûmê DNA li dora 260 nm e, û vegirtina wê wekî A260 tête diyar kirin, û ew di 230 nm de li berika vegirtinê ye, ji ber vê yekê spektroskopiya ultraviyole dikare were bikar anîn. Asîdên nukleîk ji hêla luminometreyê ve ji hêla mîqdar û kalîteyê ve têne destnîşankirin.

Asîdên nukleîk ampholytes in, ku bi polyacidan re wekhev in. Asîdên nukleîk bi karanîna tamponên bêalî an alkalîn di nav anyonan de têne dabeş kirin, û di nav zeviyek elektrîkê de têne danîn da ku berbi anodê ve biçin. Ev prensîba elektroforez e.

Prensîb û hewcedariyên derxistin û paqijkirina asîda nukleîk

1. Yekitiya avahiya bingehîn a asîda nukleîk piştrast bikin

2. Tevliheviya molekulên din ji holê rakin (mîna ku di dema derxistina ADN-ê de destwerdana ARN-ê ji holê rakin)

3. Divê di nimûneyên asîda nukleîk de halên organîk û îyonên metal ên ku enzîman asteng dikin tune bin.

4. Madeyên makromolekulî yên wekî proteîn, polisakkarîd û lîpîd bi qasî ku pêkan kêm bikin.

Rêbaza derxistin û paqijkirina asîda nukleîk

1. Rêbaza derxistina fenol/chloroform

Ew di sala 1956-an de hate îcadkirin. Piştî ku şaneya şikestî an homojenate tevnhev bi fenol/kloroform tê derman kirin, pêkhateyên asîda nukleîk, bi giranî DNA, di qonaxa avî de têne hilweşandin, lîpîd bi giranî di qonaxa organîk de ne û proteîn di navbera her duyan de cih digirin. qonaxan.

2. Barîna alkolê

Etanol dikare tebeqeya hîdratasyonê ya asîda nukleîk ji holê rake û koma fosfatê ya bi barkirina neyînî derxe holê, û îyonên barkirî yên erênî yên wekî NA﹢ dikarin bi koma fosfatê re tevbigerin da ku barkêşek ava bikin.

3. Rêbaza stûna kromatografiyê

Bi navgîniya maddeya adsorpsiyonê ya taybetî-based silica, ADN dikare bi taybetî were veguheztin, dema ku RNA û proteîn dikarin bi rêkûpêk derbas bibin, û dûv re xwêya bilind û pH-ya nizm bikar bînin da ku asîdeya nukleîk ve girêbidin, û bi xwêya kêm û pH-ya bilind ji hev veqetînin û paqij bikin. tirş.

4. Rêbaza alkali ya şikestina termal

Derxistina alkalîn bi giranî cûdahiyên topolojîk ên di navbera plasmîdên dorhêl ên girtî yên kovalentî û kromatîna xêz de bikar tîne da ku wan ji hev veqetîne. Di bin şert û mercên alkaline de, proteînên denatured çareser dibin.

5. Rêbaza pîrolîzê ya kelandinê

Çareseriya ADNyê bi germahî tê dermankirin da ku ji taybetmendiyên molekulên ADN-ya xêzik sûd werbigire da ku perçeyên ADN-ê ji barîna ku ji hêla proteînên denaturedkirî û bermayiyên şaneyê yên bi santrîfugasyonê ve hatî çêkirin veqetîne.

6. Rêbaza mûçikên Nanomagnetic

Bi karanîna nanoteknolojiyê ji bo baştirkirin û guheztina rûbera nanoparçeyên superparamagnetic, mûçikên nano-magnetic oksîdê silicon superparamagnetic têne amadekirin. Mêvikên magnetîkî dikarin bi taybetî bi molekulên asîda nukleîk re li ser navgînek mîkroskopî nas bikin û bi bandor ve girêbidin. Bi karanîna taybetmendiyên superparamagnetic ên nanosferên silica, di bin çalakiya xwêyên kaotropîk (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, hwd.) û zeviyek magnetîkî ya derveyî, DNA û RNA ji xwînê, tevna heywanan, xwarin, mîkroorganîzmayên pathogenîk û nimûneyên din hatin veqetandin.