핵산은 데옥시리보핵산(DNA)과 리보핵산(RNA)으로 나뉘는데, 그 중 RNA는 기능에 따라 리보솜 RNA(rRNA), 메신저 RNA(mRNA), 전달 RNA(tRNA)로 나눌 수 있다.

DNA는 주로 핵, 미토콘드리아, 엽록체에 집중되어 있는 반면, RNA는 주로 세포질에 분포되어 있습니다.

핵산에는 퓨린 염기와 피리미딘 염기가 공액 이중 결합을 갖고 있기 때문에 핵산은 자외선을 흡수하는 특성을 가지고 있습니다. DNA 나트륨염의 자외선 흡수는 260nm 부근이고 흡광도는 A260으로 표시하며, 흡수 최저점은 230nm이므로 자외선 분광법을 이용할 수 있다. 핵산은 루미노미터(luminometer)에 의해 정량적, 정성적으로 결정됩니다.

핵산은 양쪽성 전해질이며, 이는 다중산과 동일합니다. 핵산은 중성 또는 알칼리성 완충액을 사용하여 음이온으로 해리될 수 있으며, 전기장에 놓아 양극쪽으로 이동할 수 있습니다. 이것이 전기영동의 원리이다.

핵산 추출 및 정제 원리 및 요구사항

1. 핵산 1차 구조의 무결성 보장

2. 다른 분자의 오염 제거(예: DNA 추출 시 RNA 간섭 제외)

3. 핵산 시료에는 효소를 저해하는 유기용매와 고농도의 금속이온이 없어야 합니다.

4. 단백질, 다당류, 지질 등 고분자 물질을 최대한 줄입니다.

핵산 추출 및 정제 방법

1. 페놀/클로로포름 추출방법

1956년에 발명되었습니다. 세포파괴액이나 조직균질액을 페놀/클로로포름으로 처리한 후 핵산성분(주로 DNA)은 수상에 용해되고, 지질은 주로 유기상에 존재하며, 단백질은 둘 사이에 위치하게 됩니다. 단계.

2. 알코올 침전

에탄올은 핵산의 수화층을 제거하고 음전하를 띤 인산기를 노출시킬 수 있으며, NA﹢와 같은 양전하를 띤 이온은 인산기와 결합하여 침전물을 형성할 수 있습니다.

3. 크로마토그래피 컬럼법

특수한 실리카 기반의 흡착물질을 통해 DNA는 특이적으로 흡착하고, RNA와 단백질은 원활하게 통과시킨 후 고염, 저pH로 핵산을 결합시키고, 저염, 고pH로 용출하여 핵산을 분리, 정제할 수 있습니다. 산.

4. 열분해 알칼리법

알칼리 추출은 주로 공유결합으로 닫힌 원형 플라스미드와 선형 염색질 사이의 위상적 차이를 사용하여 분리합니다. 알칼리성 조건에서 변성된 단백질은 가용성입니다.

5. 비등열분해법

선형 DNA 분자의 특성을 활용하기 위해 DNA 용액을 열처리하여 원심분리를 통해 변성된 단백질과 세포 잔해에 의해 형성된 침전물로부터 DNA 단편을 분리합니다.

6. 나노자기비드법

초상자성 나노입자의 표면을 개선하고 개질하는 나노기술을 이용하여 초상자성 산화규소 나노자성 비드를 제조합니다. 자기 비드는 미세한 경계면에서 핵산 분자를 특이적으로 인식하고 효율적으로 결합할 수 있습니다. 실리카 나노스피어의 초상자성 특성을 이용하여 카오트로픽 염(구아니딘 염산염, 구아니딘 이소티오시아네이트 등)과 외부 자기장의 작용하에 혈액, 동물 조직, 식품, 병원성 미생물 및 기타 시료로부터 DNA와 RNA를 분리했습니다.