ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣವನ್ನು ಜೀವರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಅನ್ವಯದಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಕಾರ್ಯಾಚರಣಾ ಕೌಶಲ್ಯವಾಗಿದೆ. ಎಸ್‌ಸಿಜಿ ಪ್ರೊಟೀನ್ ಪ್ಯೂರಿಫಿಕೇಶನ್ ಸಿಸ್ಟಂ ಕಂಪನಿ-ಸೈಪು ಇನ್‌ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟ್ ಕಚ್ಚಾ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ವಿಷಯವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದೆಪ್ರೋಟೀನ್ಎಲ್ಲರಿಗೂ ಶುದ್ಧೀಕರಣ. ಒಂದು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಯೂಕ್ಯಾರಿಯೋಟಿಕ್ ಕೋಶವು ಸಾವಿರಾರು ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಕೆಲವು ಅತ್ಯಂತ ಶ್ರೀಮಂತವಾಗಿವೆ ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಕೆಲವೇ ಪ್ರತಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು, ಇತರ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಲ್ಲದ ಅಣುಗಳಿಂದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಮೊದಲು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.

ಒರಟಾದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ

ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾರವನ್ನು (ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು, ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್‌ಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ) ಪಡೆದಾಗ, ಬಯಸಿದದನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಸೂಕ್ತವಾದ ವಿಧಾನಗಳ ಗುಂಪನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.ಪ್ರೋಟೀನ್ಇತರ ಕಲ್ಮಶಗಳಿಂದ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ಈ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಹಂತವು ಉಪ್ಪು ಹಾಕುವಿಕೆ, ಐಸೊಎಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್ ಶೇಖರಣೆ ಮತ್ತು ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕ ವಿಭಜನೆಯಂತಹ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಈ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಸರಳತೆ ಮತ್ತು ದೊಡ್ಡ ಸಂಸ್ಕರಣಾ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಅನೇಕ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಕೆಲವು ಪ್ರೊಟೀನ್ ಸಾರಗಳು ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಶೇಖರಣೆ ಅಥವಾ ಉಪ್ಪು ಹಾಕುವ ಮೂಲಕ ಸಾಂದ್ರತೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ. ನೀವು ಅಲ್ಟ್ರಾಫಿಲ್ಟ್ರೇಶನ್, ಜೆಲ್ ಶೋಧನೆ, ಘನೀಕರಿಸುವ ನಿರ್ವಾತ ಒಣಗಿಸುವಿಕೆ ಅಥವಾ ಸಾಂದ್ರತೆಗಾಗಿ ಇತರ ವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.

ಉತ್ತಮವಾದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ

ಮಾದರಿಯ ಒರಟು ವಿಭಜನೆಯ ನಂತರ, ಪರಿಮಾಣವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ವಿಧಾನಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಜೆಲ್ ಫಿಲ್ಟರೇಶನ್, ಅಯಾನ್ ಎಕ್ಸ್ಚೇಂಜ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ, ಆಡ್ಸರ್ಪ್ಶನ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಮತ್ತು ಅಫಿನಿಟಿ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ, ನೀವು ಅಂತಿಮ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ವಲಯ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್, ಐಸೋಎಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್ ಸೆಟ್, ಇತ್ಯಾದಿ ಸೇರಿದಂತೆ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು. ಉಪವಿಭಾಗ ಮಟ್ಟದ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಗೆ ಬಳಸುವ ವಿಧಾನವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್ ಹೊಂದಿದೆ.

ಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣವು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣದ ಅಂತಿಮ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಏಕರೂಪವಾಗಿರಬೇಕು ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲವಾದರೂ, ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸ್ಫಟಿಕವನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಜನವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವಾಗ ಮಾತ್ರ. ಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮಟ್ಟದ ಶುದ್ಧೀಕರಣದೊಂದಿಗೆ ಇರುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಮರುಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣವು ಅಲ್ಪ ಪ್ರಮಾಣದ ಕಲಬೆರಕೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು. ಡಿನ್ಯಾಚುರೇಟೆಡ್ ರಿಂದಪ್ರೋಟೀನ್ಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಎಂದಿಗೂ ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸ್ಫಟಿಕೀಕರಣವು ಶುದ್ಧತೆಯ ಸಂಕೇತವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಉತ್ಪನ್ನವು ಅದರ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿದೆ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಪ್ರಬಲ ಮಾರ್ಗಸೂಚಿಯಾಗಿದೆ.