ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಡಿಯೋಕ್ಸಿರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ (ಡಿಎನ್ಎ) ಮತ್ತು ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಕ್ ಆಮ್ಲ (ಆರ್ಎನ್ಎ) ಎಂದು ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಆರ್ಎನ್ಎವನ್ನು ರೈಬೋಸೋಮಲ್ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಆರ್ಆರ್ಎನ್ಎ), ಮೆಸೆಂಜರ್ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಎಂಆರ್ಎನ್ಎ) ಮತ್ತು ವರ್ಗಾವಣೆ ಆರ್ಎನ್ಎ (ಟಿಆರ್ಎನ್ಎ) ವಿವಿಧ ಕಾರ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಬಹುದು.

ಡಿಎನ್‌ಎ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್, ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯಾ ಮತ್ತು ಕ್ಲೋರೊಪ್ಲಾಸ್ಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕೃತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸಂನಲ್ಲಿ ವಿತರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ.

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ಯೂರಿನ್ ಬೇಸ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪಿರಿಮಿಡಿನ್ ಬೇಸ್‌ಗಳು ಸಂಯೋಜಿತ ಡಬಲ್ ಬಾಂಡ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದರಿಂದ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು ನೇರಳಾತೀತ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ. DNA ಸೋಡಿಯಂ ಲವಣಗಳ ನೇರಳಾತೀತ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯು ಸುಮಾರು 260nm ಆಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಅದರ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು A260 ಎಂದು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದು 230nm ನಲ್ಲಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ತೊಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿದೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ನೇರಳಾತೀತ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಸ್ಕೋಪಿಯನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಮತ್ತು ಗುಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಲುಮಿನೋಮೀಟರ್ ನಿರ್ಧರಿಸುತ್ತದೆ.

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು ಆಂಫೋಲೈಟ್‌ಗಳಾಗಿವೆ, ಇದು ಪಾಲಿಯಾಸಿಡ್‌ಗಳಿಗೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ತಟಸ್ಥ ಅಥವಾ ಕ್ಷಾರೀಯ ಬಫರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಅಯಾನುಗಳಾಗಿ ವಿಯೋಜಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಆನೋಡ್ ಕಡೆಗೆ ಚಲಿಸಲು ವಿದ್ಯುತ್ ಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬಹುದು. ಇದು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ನ ತತ್ವವಾಗಿದೆ.

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣದ ತತ್ವಗಳು ಮತ್ತು ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳು

1. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ರಚನೆಯ ಸಮಗ್ರತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ

2. ಇತರ ಅಣುಗಳ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ನಿವಾರಿಸಿ (ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯುವಾಗ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ)

3. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಯಾವುದೇ ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕಗಳು ಮತ್ತು ಲೋಹದ ಅಯಾನುಗಳ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು ಇರಬಾರದು

4. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು, ಪಾಲಿಸ್ಯಾಕರೈಡ್ಗಳು ಮತ್ತು ಲಿಪಿಡ್ಗಳಂತಹ ಮ್ಯಾಕ್ರೋಮಾಲಿಕ್ಯುಲರ್ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನ

1. ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನ

ಇದನ್ನು 1956 ರಲ್ಲಿ ಆವಿಷ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಫೀನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ ನೊಂದಿಗೆ ಕೋಶ ಮುರಿದ ದ್ರವ ಅಥವಾ ಅಂಗಾಂಶ ಹೋಮೋಜೆನೇಟ್ ಅನ್ನು ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ನಂತರ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಘಟಕಗಳು, ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಡಿಎನ್ಎ, ಜಲೀಯ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಕರಗುತ್ತವೆ, ಲಿಪಿಡ್ಗಳು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಸಾವಯವ ಹಂತದಲ್ಲಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಇವೆರಡರ ನಡುವೆ ನೆಲೆಗೊಂಡಿವೆ. ಹಂತಗಳು.

2. ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್ ಮಳೆ

ಎಥೆನಾಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಜಲಸಂಚಯನ ಪದರವನ್ನು ತೊಡೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಋಣಾತ್ಮಕ ಚಾರ್ಜ್ಡ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಗುಂಪನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು NA﹢ ನಂತಹ ಧನಾತ್ಮಕ ಆವೇಶದ ಅಯಾನುಗಳು ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಗುಂಪಿನೊಂದಿಗೆ ಸೇರಿಕೊಂಡು ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು ರೂಪಿಸಬಹುದು.

3. ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಫಿಕ್ ಕಾಲಮ್ ವಿಧಾನ

ವಿಶೇಷ ಸಿಲಿಕಾ-ಆಧಾರಿತ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ ವಸ್ತುವಿನ ಮೂಲಕ, ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಆದರೆ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಟೀನ್ ಸರಾಗವಾಗಿ ಹಾದು ಹೋಗಬಹುದು, ಮತ್ತು ನಂತರ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲವನ್ನು ಬಂಧಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಪಿಹೆಚ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲು ಕಡಿಮೆ ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪಿಹೆಚ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಎಲ್ಯೂಟ್ ಮಾಡಬಹುದು. ಆಮ್ಲ.

4. ಥರ್ಮಲ್ ಕ್ರ್ಯಾಕಿಂಗ್ ಕ್ಷಾರ ವಿಧಾನ

ಕ್ಷಾರೀಯ ಹೊರತೆಗೆಯುವಿಕೆ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಕೋವೆಲೆಂಟ್ ಆಗಿ ಮುಚ್ಚಿದ ವೃತ್ತಾಕಾರದ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ರೇಖೀಯ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ನಡುವಿನ ಸ್ಥಳಶಾಸ್ತ್ರದ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಬಳಸುತ್ತದೆ. ಕ್ಷಾರೀಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಡಿನೇಚರ್ಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಕರಗುತ್ತವೆ.

5. ಕುದಿಯುವ ಪೈರೋಲಿಸಿಸ್ ವಿಧಾನ

ಡಿಎನ್‌ಎ ದ್ರಾವಣವು ರೇಖೀಯ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಣುಗಳ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಲಾಭವನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಡಿಎನ್‌ಎ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಡಿನೇಚರ್ಡ್ ಪ್ರೊಟೀನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಶಿಲಾಖಂಡರಾಶಿಗಳಿಂದ ರೂಪಿಸುವ ಅವಕ್ಷೇಪದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲು ಶಾಖ-ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.

6. ನ್ಯಾನೊಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳ ವಿಧಾನ

ಸೂಪರ್‌ಪ್ಯಾರಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ನ್ಯಾನೊಪರ್ಟಿಕಲ್‌ಗಳ ಮೇಲ್ಮೈಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಮಾರ್ಪಡಿಸಲು ನ್ಯಾನೊತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ಸೂಪರ್‌ಪ್ಯಾರಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಸಿಲಿಕಾನ್ ಆಕ್ಸೈಡ್ ನ್ಯಾನೊ-ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಮಣಿಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕಾಂತೀಯ ಮಣಿಗಳು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕೀಯ ಇಂಟರ್‌ಫೇಸ್‌ನಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಅಣುಗಳನ್ನು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಗುರುತಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಬಂಧಿಸಬಹುದು. ಸಿಲಿಕಾ ನ್ಯಾನೊಸ್ಪಿಯರ್‌ಗಳ ಸೂಪರ್‌ಪ್ಯಾರಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ಚಾಟ್ರೊಪಿಕ್ ಲವಣಗಳು (ಗ್ವಾನಿಡಿನ್ ಹೈಡ್ರೋಕ್ಲೋರೈಡ್, ಗ್ವಾನಿಡಿನ್ ಐಸೊಥಿಯೋಸೈನೇಟ್, ಇತ್ಯಾದಿ) ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯ ಕಾಂತಕ್ಷೇತ್ರದ ಕ್ರಿಯೆಯ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ, ಡಿಎನ್‌ಎ ಮತ್ತು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಗಳನ್ನು ರಕ್ತ, ಪ್ರಾಣಿ ಅಂಗಾಂಶ, ಆಹಾರ, ರೋಗಕಾರಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗಿದೆ.