វិធីសាស្រ្ត និងគោលការណ៍នៃការទាញយកជួរឈរទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក

អាស៊ីត nucleic ត្រូវបានបែងចែកទៅជាអាស៊ីត deoxyribonucleic (DNA) និងអាស៊ីត ribonucleic (RNA) ដែលក្នុងនោះ RNA អាចបែងចែកទៅជា ribosomal RNA (rRNA) messenger RNA (mRNA) និងផ្ទេរ RNA (tRNA) តាមមុខងារផ្សេងៗគ្នា។

DNA ត្រូវបានប្រមូលផ្តុំជាចម្បងនៅក្នុងស្នូល mitochondria និង chloroplasts ខណៈពេលដែល RNA ត្រូវបានចែកចាយជាចម្បងនៅក្នុង cytoplasm ។

ដោយសារតែមូលដ្ឋាន purine និងមូលដ្ឋាន pyrimidine បានរួមបញ្ចូលគ្នានូវចំណងទ្វេរដងនៅក្នុងអាស៊ីត nucleic អាស៊ីត nucleic មានលក្ខណៈនៃការស្រូបយកអ៊ុលត្រាវីយូឡេ។ ការស្រូបអ៊ុលត្រាវីយូឡេនៃអំបិល DNA សូដ្យូមគឺប្រហែល 260nm ហើយការស្រូបរបស់វាត្រូវបានបង្ហាញជា A260 ហើយវាស្ថិតនៅរន្ធស្រូបនៅ 230nm ដូច្នេះអាចប្រើកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេ។ អាស៊ីត nucleic ត្រូវបានកំណត់ដោយបរិមាណ និងគុណភាពដោយ luminometer ។

អាស៊ីត nucleic គឺជា ampholytes ដែលស្មើនឹង polyacids ។ អាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកអាចត្រូវបានបំបែកទៅជាអ៊ីយ៉ុងដោយប្រើសតិបណ្ដោះអាសន្នអព្យាក្រឹត ឬអាល់កាឡាំង ហើយដាក់ក្នុងវាលអគ្គិសនីដើម្បីផ្លាស់ទីឆ្ពោះទៅកាន់អាណូត។ នេះគឺជាគោលការណ៍នៃ electrophoresis ។

វិធីសាស្រ្ត និងគោលការណ៍នៃការទាញយកជួរឈរទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក

ការទាញយកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក និងការបន្សុតគោលការណ៍ និងតម្រូវការ

1. ធានាបាននូវភាពសុចរិតនៃរចនាសម្ព័ន្ធបឋមនៃអាស៊ីត nucleic

2. លុបបំបាត់ការចម្លងរោគនៃម៉ូលេគុលផ្សេងទៀត (ដូចជាការមិនរាប់បញ្ចូលការជ្រៀតជ្រែក RNA នៅពេលទាញយក DNA)

3. មិនគួរមានសារធាតុរំលាយសរីរាង្គ និងកំហាប់ខ្ពស់នៃអ៊ីយ៉ុងដែកដែលរារាំងអង់ស៊ីមក្នុងសំណាកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក

4. កាត់បន្ថយសារធាតុម៉ាក្រូម៉ូលេគុលដូចជា ប្រូតេអ៊ីន ប៉ូលីសាខ័រ និង lipid ឱ្យបានច្រើនតាមដែលអាចធ្វើទៅបាន។

វិធីសាស្រ្តចម្រាញ់ និងបន្សុទ្ធអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ែរ

1. វិធីសាស្រ្តទាញយកសារធាតុ Phenol/chloroform

វាត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងឆ្នាំ 1956។ បន្ទាប់ពីបានព្យាបាលកោសិកាដែលខូច អង្គធាតុរាវ ឬជាលិកាដូចគ្នាជាមួយ phenol/chloroform សមាសធាតុអាស៊ីត nucleic ដែលភាគច្រើនជា DNA ត្រូវបានរំលាយក្នុងដំណាក់កាល aqueous ជាតិខ្លាញ់ភាគច្រើនស្ថិតក្នុងដំណាក់កាលសរីរាង្គ ហើយប្រូតេអ៊ីនស្ថិតនៅចន្លោះទាំងពីរ។ ដំណាក់កាល។

2. របបទឹកភ្លៀង

អេតាណុលអាចលុបបំបាត់ស្រទាប់ជាតិទឹកនៃអាស៊ីត nucleic និងបញ្ចេញក្រុមផូស្វាតដែលមានបន្ទុកអវិជ្ជមាន ហើយអ៊ីយ៉ុងដែលមានបន្ទុកវិជ្ជមានដូចជា NA﹢ អាចផ្សំជាមួយក្រុមផូស្វាតដើម្បីបង្កើតជាទឹកភ្លៀង។

3. វិធីសាស្រ្តនៃជួរឈរ Chromatographic

តាមរយៈសម្ភារៈ adsorption ដែលមានមូលដ្ឋានលើស៊ីលីកាពិសេស DNA អាចត្រូវបាន adsorbed យ៉ាងពិសេស ខណៈពេលដែល RNA និងប្រូតេអ៊ីនអាចឆ្លងកាត់យ៉ាងរលូន ហើយបន្ទាប់មកប្រើអំបិលខ្ពស់ និង pH ទាបដើម្បីចងអាស៊ីត nucleic ហើយ elute ជាមួយអំបិលទាប និង pH ខ្ពស់ដើម្បីបំបែក និងបន្សុទ្ធ nucleic អាស៊ីត។

4. វិធីសាស្រ្តបំបែកកំដៅអាល់កាឡាំង

ការស្រង់ចេញអាល់កាឡាំងប្រើប្រាស់ជាចម្បងនូវភាពខុសគ្នានៃ topological រវាង plasmids រាងជារង្វង់បិទជិត covalently និង chromatin លីនេអ៊ែរដើម្បីបំបែកពួកវា។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌអាល់កាឡាំងប្រូតេអ៊ីន denatured គឺរលាយ។

5. វិធីសាស្រ្ត pyrolysis រំពុះ

ដំណោះស្រាយ DNA ត្រូវបានព្យាបាលដោយកំដៅ ដើម្បីទាញយកអត្ថប្រយោជន៍ពីលក្ខណៈសម្បត្តិនៃម៉ូលេគុល DNA លីនេអ៊ែរ ដើម្បីបំបែកបំណែក DNA ចេញពីទឹកភ្លៀងដែលបង្កើតឡើងដោយប្រូតេអ៊ីន denatured និងកំទេចកំទីកោសិកាដោយការ centrifugation ។

6. វិធីសាស្រ្តអង្កាំ Nanomagnetic

ដោយប្រើបច្ចេកវិទ្យាណាណូដើម្បីកែលម្អ និងកែប្រែផ្ទៃនៃ superparamagnetic nanoparticles, superparamagnetic silicon oxide nano-magnetic beads ត្រូវបានរៀបចំ។ អង្កាំម៉ាញេទិកអាចសម្គាល់យ៉ាងជាក់លាក់ និងមានប្រសិទ្ធភាពភ្ជាប់ទៅនឹងម៉ូលេគុលអាស៊ីត nucleic នៅលើចំណុចប្រទាក់មីក្រូទស្សន៍។ ដោយប្រើលក្ខណៈសម្បត្តិ superparamagnetic នៃ silica nanospheres ក្រោមសកម្មភាពនៃអំបិល Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate ។


ពេលវេលាប្រកាស៖ ថ្ងៃទី ១៨-២២ ខែមីនា