វិធីសាស្រ្តនៃការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន:
វិធីសាស្រ្តនៃការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន ការបំបែក និងការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានបញ្ចេញចេញពីកោសិកាដើម ឬជាលិកាក្នុងស្ថានភាពរំលាយ ហើយនៅតែស្ថិតក្នុងសភាពធម្មជាតិដើមដោយមិនបាត់បង់សកម្មភាពជីវសាស្ត្រ។ សម្រាប់ហេតុផលនេះ សម្ភារៈគួរតែយកជាលិកាសត្វ និង adipose ចេញ សម្ភារៈគ្រាប់ពូជគួរតែបកការចម្លងរោគនៃស្រទាប់គ្រាប់ពូជចេញពីសារធាតុដូចជា tannins ហើយគ្រាប់ពូជប្រេងគួរតែប្រើសារធាតុរំលាយសរីរាង្គដែលឆ្អិនទាប។
1. វិធីសាស្រ្តនៃការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន ទំហំ និងវិធីវិភាគការបំបែកផ្សេងគ្នា៖ ការលាងឈាម និងអ៊ុលត្រាសោន ប្រើប្រូតេអ៊ីនទាំងនេះដើម្បីឆ្លងកាត់ធម្មជាតិនៃម៉ូលេគុលដែលមិនអាចឆ្លងកាត់ភ្នាសពាក់កណ្តាល permeable បាន; density gradient centrifugation គុណភាព និងដង់ស៊ីតេនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកនឹងមានឥទ្ធិពលកាន់តែខ្លាំងទៅលើភាគល្អិត។ ល្បឿននៃការដោះស្រាយគឺលឿនជាងមុន; តម្រងជែលគឺជាប្រភេទនៃ chromatography ជួរឈរ។
2. ការបំបែកភាពខុសប្លែកគ្នានៃការរលាយក្នុងការប្រើប្រាស់៖ ចរន្តអគ្គិសនីដោយសារការចោទប្រកាន់សុទ្ធនៃម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនគឺស្ថិតនៅចំណុចសូន្យអ៊ីសូអេឡិចត្រិច កាត់បន្ថយការច្រានចោលអេឡិចត្រូស្ទិចរវាងម៉ូលេគុល ងាយស្រួលប្រមូលផ្តុំ និងកម្រិតរលាយអប្បបរមា។ សូលុយស្យុងអំបិលប្រើជាមួយសូលុយស្យុងអំបិលកំហាប់បង្កើនឬបន្ថយការរលាយនៃប្រូតេអ៊ីន។
3. ការចោទប្រកាន់ត្រូវបានបំបែកនិងវិភាគដោយវិធីសាស្រ្តផ្សេងគ្នា មាតិកាសំខាន់រួមមាន electrophoresis និង ion exchange chromatography ។
4. វិធីសាស្រ្តនៃការបន្សុតប្រូតេអ៊ីនការស្រូបជ្រើសរើស និងការបំបែកប្រូតេអ៊ីនប្រើប្រាស់កម្លាំងនៃការស្រូបយកភាគល្អិត។
5. Affinity chromatography គឺផ្អែកលើការបំបែកនៃ ligands ។ លក្ខណៈជីវសាស្រ្តនេះអនុញ្ញាតឱ្យម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនចងជាពិសេសជាជាង covalently ទៅម៉ូលេគុលផ្សេងទៀតហៅថា ligand ។
6. វិធីសាស្រ្តបន្សុទ្ធប្រូតេអ៊ីន៖ វិធីសាស្ត្រទឹកភ្លៀងសរីរាង្គសីតុណ្ហភាពទាប៖ ប្រើសារធាតុរំលាយសរីរាង្គដែលរលាយក្នុងទឹកដូចជា មេតាណុល អេតាណុល ដើម្បីកាត់បន្ថយការរលាយ និងទឹកភ្លៀងនៃប្រូតេអ៊ីនភាគច្រើន។ វិធីសាស្រ្តនេះគឺខ្ពស់ជាងការដោះស្រាយ salting ចេញប៉ុន្តែប្រូតេអ៊ីន denatures កាន់តែច្រើននៅពេលដែលមានភាពងាយស្រួលវាគួរតែត្រូវបានធ្វើនៅសីតុណ្ហភាពទាប។
វិធីសម្អាតការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន:
របៀបបន្សុទ្ធប្រូតេអ៊ីន ប្រូតេអ៊ីនគឺជាម៉ូលេគុលធំមួយ និងទំហំម៉ូលេគុលផ្សេងៗនៃអាល់ប៊ុយមីន មានវិធីសាស្រ្តសាមញ្ញមួយចំនួនដើម្បីបំបែកប្រូតេអ៊ីន និងវត្ថុធាតុម៉ូលេគុលតូចៗ ព្រមទាំងល្បាយប្រូតេអ៊ីនដែលបំបែកផងដែរ។ វិធីសាស្រ្តសំខាន់ៗសម្រាប់ការបំបែកប្រូតេអ៊ីននៃទំហំម៉ូលេគុលខុសៗគ្នាគឺ ការលាងឈាម ការបន្សុទ្ធ ultrafiltration ជែល និងការបំបែកដោយ centrifugal ។ Dialysis និង ultrafiltration ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅក្នុងវិធីសាស្រ្តបំបែកប្រូតេអ៊ីន។ ល្បាយលាងឈាមដែលត្រូវបំបែកត្រូវបានដាក់ក្នុងថង់លាងឈាមដែលធ្វើពីភ្នាស semipermeable ហើយបន្ទាប់មកជ្រមុជក្នុងដំណោះស្រាយលាងឈាមដើម្បីបំបែក។ Ultrafiltration គឺជាដំណើរការនៃការឆ្លងកាត់ទឹក និងម៉ូលេគុលតូចៗផ្សេងទៀតដោយប្រើកម្លាំង centrifugal ឬសម្ពាធនៅក្នុងភ្នាសពាក់កណ្តាល permeable និងអន្ទាក់ប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងភ្នាសពាក់កណ្តាល permeable ។ វិធីសាស្រ្តទាំងពីរនេះអាចត្រូវបានបំបែកចេញពី macromolecules ដែលមានមូលដ្ឋានលើប្រូតេអ៊ីន និងម៉ូលេគុលតូចៗដែលមានមូលដ្ឋានលើអំបិលអសរីរាង្គ។ ពួកវាច្រើនតែត្រូវបានប្រៃចេញ ប្រើដោយភ្ជាប់ជាមួយវិធីសាស្ត្ររំលាយអំបិល ឬអាចត្រូវបានណែនាំដើម្បីយកវិធីទាំងពីរនេះចេញ បន្ទាប់ពីអំបិលចេញដោយប្រើដំណោះស្រាយអំបិលអសរីរាង្គ។
1. របៀបបន្សុទ្ធប្រូតេអ៊ីនដោយវិធីអំបិលចេញ៖ មូលដ្ឋាននៃវិធីសាស្ត្របញ្ចេញជាតិប្រៃ គឺថា ភាពរលាយនៃប្រូតេអ៊ីនក្នុងសូលុយស្យុងអំបិលនឹងកើនឡើងជាមួយនឹងការកើនឡើងកំហាប់អំបិល ប៉ុន្តែនៅពេលដែលកំហាប់អំបិលកើនឡើងដល់តម្លៃជាក់លាក់មួយ សកម្មភាពទឹកនឹងកើនឡើង។ ការថយចុះ ដែលនៅក្នុងវេនអាចបណ្តាលឱ្យប្រូតេអ៊ីនមួយចំនួនបង្កើតបន្ទុកតាមរយៈផ្ទៃរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុលត្រូវបានបន្សាបបន្តិចម្តងៗ ហើយភ្នាសជាតិទឹកត្រូវបានបំផ្លាញបន្តិចម្តងៗ ដែលអាចបណ្តាលឱ្យប្រូតេអ៊ីន និងម៉ូលេគុលដែលពាក់ព័ន្ធបង្កើតការប្រមូលផ្តុំ និង precipitate ពីដំណោះស្រាយផ្សេងៗ។
2. វិធីសាស្រ្តទឹកភ្លៀងសារធាតុរំលាយសរីរាង្គ៖ មានហេតុផលពីរយ៉ាងដើម្បីកាត់បន្ថយការរលាយនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងសារធាតុរំលាយសរីរាង្គ៖ របៀបបន្សុទ្ធប្រូតេអ៊ីនជាដំណោះស្រាយអំបិលជាមួយនឹងការខះជាតិទឹក; ទីពីរ ថេរ dielectric នៃសារធាតុរំលាយសរីរាង្គជាងទឹកអាចត្រូវបានកាត់បន្ថយនៅក្នុងសារធាតុរំលាយប៉ូល។
3. ភ្នាក់ងារ precipitating ប្រូតេអ៊ីន: ប្រូតេអ៊ីនជាភ្នាក់ងារ precipitating តែមួយប្រភេទឬមួយនៃ precipitation ប្រូតេអ៊ីន, ធម្មតាគឺអាល់កាឡាំង, ប្រូតេអ៊ីន, lectin និងលោហៈធ្ងន់។
4. Polyethylene glycol precipitation: របៀបបន្សុទ្ធសារធាតុប៉ូលីម៊ែរដែលមិនរលាយក្នុងទឹកសម្រាប់ការបន្សុតប្រូតេអ៊ីនដូចជា polyethylene glycol និង sodium dextran sulfate ដើម្បី precipitate ប្រូតេអ៊ីន។
ពេលវេលាផ្សាយ៖ ថ្ងៃទី ២៧ ខែ តុលា ឆ្នាំ ២០២០
