Тазарту әдісі қандайақуызды тазарту жүйесі? Тазартылған ақуыздың кодтаушы ДНҚ тізбегін білу, мақсатты генде қандай жасушалар немесе тіндер артық экспрессияланғанын көру және мақсатты ДНҚ фрагментінің арфін күшейту үшін гендік праймерлерді жобалау қажет. Бұл мақсатты ген фрагменттерін алу деп аталады.

Экспрессия векторының құрылысы: Алынған гендік экспрессияның өзіне тән сипаттамалары бар прокариоттық немесе эукариоттық экспрессия векторында бұл қадамның негізгі мәселесі плазмида мен қызығушылық генін және экспрессия жүйесін құру болып табылады. Прокариоттардың экспрессия уақыты қысқа, құны төмен және экспрессияның үлкен көлемі басымдық болып табылады; ген E. coli-де экспрессияланбайды және мәселе кодонды оңтайландыруда пайда болады. Белсенділік пен ақуыздың жақсырақ тазартылуын ескере отырып, зерттеушілер Пичи ашытқысында экспрессияны таңдады. Кодонды оңтайландырудың сәтті көрінісі маңызды.

Ақуызды тазарту жүйесінің тазарту әдісі қандай:

1. Жауын-шашын.

2. Электрофорез: Зарядталған ақуыз өзінің изоэлектрлік нүктесінен жоғары немесе төмен және теріс электродқа немесе электр өрісіндегі электр өрісінің оң электродына жылжытылуы мүмкін. Қолдау пленка электрофорез, электрофорез және т.б.

3. Диализ: үлкен молекулаларды ақуыздардан және кіші молекулалы органикалық қосылыстардан бөлу үшін екі диализдік қапшықты пайдаланатын әдіс.

4. Хроматография: ион алмасу хроматографиясы белоктардың бос қасиеттерін пайдаланады. Белгілі бір рН кезінде белоктардың зарядтары мен қасиеттері әртүрлі және оларды ион алмасу хроматографиясы арқылы бөлуге болады. Анионалмастырғыш хроматографияда алдымен теріс қуаты төмен белоктар элюцияланады. Молекулярлық електер, сондай-ақ гельді фильтрация ретінде белгілі. Кішкентай ақуыздар тесіктерге еніп, оларда ұзақ уақыт қалады. Үлкен белоктар тесіктерге еніп, тікелей ағып кете алмайды.

5. Тазарту әдісі қандайақуызды тазарту жүйесі? Ультрацентрифугалау: ақуызды тазарту молекулалық салмақты анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін және ақуыз ретінде пайдаланылуы мүмкін. Әртүрлі тығыздықтағы белоктардың түзілуі бөлінеді.