Протеинді тазартудың өрескел бөлінуі және жұқа бөлінуі

Белоктарды бөлу және тазарту биохимиялық зерттеулер мен қолдануда кеңінен қолданылады және маңызды операциялық дағды болып табылады. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument шикі бөлу және жұқа бөлу мазмұнын құрастырды.ақуызбарлығы үшін тазарту. Әдеттегі эукариоттық жасушада мыңдаған түрлі белоктар болуы мүмкін, олардың кейбіреулері өте бай, ал кейбіреулерінде тек бірнеше көшірмелер бар. Белгілі бір ақуызды зерттеу үшін алдымен белокты басқа белоктардан және белокты емес молекулалардан тазарту қажет.

19

Дөрекі бөлу

Ақуыз сығындысы (кейде нуклеин қышқылдарымен, полисахаридтермен және т.б. араласады) алынғанда, қажетті заттарды бөлу үшін сәйкес әдістер кешені таңдалады.ақуызбасқа қоспалардан. Әдетте, бөлудің бұл сатысы тұздану, изоэлектрлік нүктені жинақтау және органикалық еріткіш фракциялау сияқты әдістерді пайдаланады. Бұл әдістер қарапайымдылығымен және үлкен өңдеу қабілетімен ерекшеленеді, олар көптеген қоспаларды кетіре алады және ақуыз ерітіндісін концентрлей алады. Кейбір ақуыз сығындыларының көлемі үлкен және жинақтау немесе тұздану арқылы концентрацияға жарамайды. Концентрация үшін ультрафильтрация, гельді фильтрация, мұздату вакуумында кептіру немесе басқа әдістерді таңдауға болады.

Жақсы бөлу

Үлгіні өрескел фракциялаудан кейін көлемі әдетте аз болады және қоспалардың көпшілігі жойылды. Әрі қарай тазарту үшін хроматография әдістеріне әдетте гельді сүзу, ион алмасу хроматографиясы, адсорбциялық хроматография және жақындық хроматографиясы жатады. Қажет болса, соңғы тазарту процесі ретінде электрофорезді, соның ішінде аймақтық электрофорезді, изоэлектрлік нүктелер жиынтығын және т.б. таңдауға болады. Бөлімше деңгейін бөлу үшін қолданылатын әдіс жоспарлауда әдетте шағын, бірақ жоғары ажыратымдылықпен.

Кристалдану - ақуызды бөлу мен тазартудың соңғы процесі. Кристалдану процесі ақуыздың біркелкі болуын қамтамасыз етпесе де, кристалды қалыптастыру үшін ерітіндіде белгілі бір ақуыздың артықшылығы болған кезде ғана жүзеге асады. Кристалдану процесінің өзі белгілі дәрежеде тазартумен бірге жүреді, ал қайта кристалдану жалған ақуыздың аз мөлшерін алып тастай алады. Денатуратталғаннан беріақуызкристалдану процесінде ешқашан табылған емес, ақуыздың кристалдануы тек тазалықтың белгісі ғана емес, сонымен қатар өнімнің табиғи күйінде екенін анықтаудың күшті нұсқауы болып табылады.


Жіберу уақыты: 19 қараша 2020 ж