әдістеріақуызды тазарту:

Ақуызды тазарту, ақуызды бөлу және тазарту әдісі, ақуыз бастапқы жасушалардан немесе ұлпалардан еріген күйде бөлініп, биологиялық белсенділігін жоғалтпай бастапқы табиғи күйінде қалады. Осы себепті материал жануарлар мен май тіндерін алып тастауы керек, тұқым материалы тіпті таниндер сияқты заттардан тұқым қабығының ластануын алып тастауы керек, ал май тұқымы жақсырақ қайнайтын органикалық еріткішті пайдалануы керек.

1. Ақуызды тазарту әдісі, мөлшері және әртүрлі бөлу талдау әдістері: диализ және ультрафильтрация жартылай өткізгіш мембранадан өте алмайтын молекулалардың табиғатынан өту үшін осы ақуыздарды пайдаланады; тығыздық градиенті центрифугалау Ортадағы ақуыздың сапасы мен тығыздығы бөлшектерге көбірек әсер етеді. Орнату жылдамдығы жылдамырақ; гельді фильтрация - бұл баған хроматографиясының бір түрі.

2. Қолдану кезіндегі ерігіштік айырмашылығының бөлінуі: белок молекулаларының таза заряды нөлдік изоэлектрлік нүктеде болғандықтан, молекулалар арасындағы электростатикалық серпілісті төмендететін, біріктіру оңай және минималды ерігіштік; тұз ерітіндісімен бірге қолданылатын тұз ерітіндісі Концентрация ақуыздың ерігіштігін арттырады немесе азайтады.

3. Заряд әртүрлі әдістермен бөлінеді және талданады, негізгі мазмұнына электрофорез және ион алмасу хроматографиясы жатады.

4. Әдістеріақуызды тазартуБелоктардың селективті адсорбциясы мен бөлінуі бөлшектердің адсорбциясының күшін пайдаланады.

5.Афинитті хроматография лигандтарды бөлуге негізделген. Бұл биологиялық сипаттама ақуыз молекулаларының лиганд деп аталатын басқа молекуламен ковалентті емес, арнайы байланысуына мүмкіндік береді.

6. Ақуызды тазарту әдісі: Төмен температурада органикалық еріткішпен тұндыру әдісі: Көптеген ақуыздардың ерігіштігі мен тұнбасын төмендету үшін метанол, этанол сияқты сумен араласатын органикалық еріткіштерді қолданыңыз. Бұл әдіс тұздану ажыратымдылығынан жоғары, бірақ ақуыз көбірек денатурацияланады. Оңай болғанда, оны төмен температурада жасау керек.

Қалай тазарту керекақуызды тазарту:

Ақуызды қалай тазартуға болады, ақуыз үлкен молекула және альбуминнің әртүрлі молекулалық өлшемдері, ақуызды және шағын молекулалық материалдарды, сондай-ақ бөлінген ақуыз қоспасын бөлудің бірнеше қарапайым әдістері бар. Әртүрлі молекулалық өлшемдегі ақуыздарды бөлудің негізгі әдістері диализ, ультрафильтрация, гельді фильтрация және центрифугалық бөлу болып табылады. Диализ және ультрафильтрация әдетте ақуызды бөлу әдістерінде қолданылады. Бөлінетін диализ қоспасы жартылай өткізгіш мембранадан жасалған диализдік қапшыққа салынады, содан кейін бөлу үшін диализ ерітіндісіне батырылады. Ультрафильтрация – жартылай өткізгіш мембранадағы орталықтан тепкіш күш немесе қысым арқылы суды және басқа да шағын молекулаларды өткізу және жартылай өткізгіш мембранадағы ақуыздарды ұстау процесі. Бұл екі әдісті ақуыз негізіндегі макромолекулалардан және бейорганикалық тұз негізіндегі шағын молекулалардан бөлуге болады. Олар жиі тұздалады, тұзды еріту әдісімен бірге қолданылады немесе бейорганикалық тұз ерітінділерін пайдаланып тұзданғаннан кейін осы екі әдісті алу үшін енгізілуі мүмкін.

1. Тұздау әдісімен ақуызды тазарту әдісі: Тұздау әдісінің негізі - сұйылтылған тұз ерітіндісіндегі ақуыздың ерігіштігі тұз концентрациясының жоғарылауымен жоғарылайды, бірақ тұз концентрациясы белгілі бір мәнге көтерілгенде, су белсенділігі артады. Төмендеу, бұл өз кезегінде кейбір ақуыздардың молекулалық құрылым беті арқылы зарядтардың пайда болуына себеп болуы мүмкін, бірте-бірте бейтараптандырылады, ал гидратация мембранасы біртіндеп жойылады, бұл сайып келгенде, байланысты ақуыздар мен молекулалардың агломерациясын дамытуға және әртүрлі ерітінділерден тұнбаға түсуіне әкелуі мүмкін.

2. Органикалық еріткішпен тұндыру әдісі: Органикалық еріткіштерде белоктың ерігіштігін төмендетудің екі себебі бар: ақуызды сусыздандыру арқылы тұз ерітіндісі ретінде қалай тазарту керек; екіншіден, полярлы еріткіштерде суға қарағанда органикалық еріткіштердің диэлектрлік өтімділігін төмендетуге болады.

3. Протеинді тұндырғыш: ақуыз тұндырғыш ретінде ақуыздың бір немесе бір түріне ғана әсер етеді, кең таралғандары - сілтілі, ақуыз, лектин және ауыр металдар.

4. Полиэтиленгликольді тұндыру: суда еритін ионды емес полимерлерді тазарту әдісіақуызды тазартуақуыздарды тұндыру үшін полиэтиленгликоль және натрий декстран сульфаты сияқты.