ნუკლეინის მჟავა იყოფა დეზოქსირიბონუკლეინის მჟავად (დნმ) და რიბონუკლეინის მჟავად (რნმ), რომელთა შორის რნმ შეიძლება დაიყოს რიბოსომურ რნმ-ად (rRNA), მესინჯერ რნმ-ად (mRNA) და გადაცემის რნმ-ად (tRNA) სხვადასხვა ფუნქციების მიხედვით.

დნმ ძირითადად კონცენტრირებულია ბირთვში, მიტოქონდრიაში და ქლოროპლასტებში, ხოლო რნმ ძირითადად ციტოპლაზმაშია გავრცელებული.

იმის გამო, რომ პურინის ფუძეებსა და პირიმიდინის ფუძეებს აქვთ კონიუგირებული ორმაგი ბმები ნუკლეინის მჟავებში, ნუკლეინის მჟავებს აქვთ ულტრაიისფერი შთანთქმის მახასიათებლები. დნმ-ის ნატრიუმის მარილების ულტრაიისფერი აბსორბცია არის დაახლოებით 260 ნმ, ხოლო მისი შთანთქმა გამოხატულია როგორც A260 და ის არის შთანთქმის მიდამოში 230 ნმ, ამიტომ ულტრაიისფერი სპექტროსკოპიის გამოყენება შესაძლებელია. ნუკლეინის მჟავები რაოდენობრივად და ხარისხობრივად განისაზღვრება ლუმინომეტრით.

ნუკლეინის მჟავები არის ამფოლიტები, რომლებიც ექვივალენტურია პოლიმჟავების. ნუკლეინის მჟავები შეიძლება დაიშალოს ანიონებად ნეიტრალური ან ტუტე ბუფერების გამოყენებით და მოთავსდეს ელექტრულ ველში ანოდისკენ გადასაადგილებლად. ეს არის ელექტროფორეზის პრინციპი.

ნუკლეინის მჟავას მოპოვებისა და გაწმენდის პრინციპები და მოთხოვნები

1. ნუკლეინის მჟავას პირველადი სტრუქტურის მთლიანობის უზრუნველყოფა

2. აღმოფხვრა სხვა მოლეკულების დაბინძურება (როგორიცაა რნმ-ის ჩარევის გამორიცხვა დნმ-ის ექსტრაქციისას)

3. ნუკლეინის მჟავის ნიმუშებში არ უნდა იყოს ორგანული გამხსნელები და ლითონის იონების მაღალი კონცენტრაცია, რომლებიც აფერხებენ ფერმენტებს.

4. მაქსიმალურად შეამცირეთ მაკრომოლეკულური ნივთიერებები, როგორიცაა ცილები, პოლისაქარიდები და ლიპიდები

ნუკლეინის მჟავას მოპოვებისა და გაწმენდის მეთოდი

1. ფენოლი/ქლოროფორმის ექსტრაქციის მეთოდი

ის გამოიგონეს 1956 წელს. უჯრედის გატეხილი სითხის ან ქსოვილის ჰომოგენატის ფენოლ/ქლოროფორმით დამუშავების შემდეგ, ნუკლეინის მჟავის კომპონენტები, ძირითადად დნმ, იხსნება წყლის ფაზაში, ლიპიდები ძირითადად ორგანულ ფაზაშია და ცილები განლაგებულია ორს შორის. ფაზები.

2. ალკოჰოლური ნალექი

ეთანოლს შეუძლია აღმოფხვრას ნუკლეინის მჟავას დამატენიანებელი ფენა და გამოავლინოს უარყოფითად დამუხტული ფოსფატის ჯგუფი, ხოლო დადებითად დამუხტული იონები, როგორიცაა NA﹢ შეიძლება გაერთიანდეს ფოსფატის ჯგუფთან და წარმოქმნას ნალექი.

3. ქრომატოგრაფიული სვეტის მეთოდი

სპეციალური სილიციუმზე დაფუძნებული ადსორბციული მასალის მეშვეობით, დნმ შეიძლება სპეციალურად შეიწოვოს, ხოლო რნმ და ცილა შეიძლება შეუფერხებლად გაიაროს და შემდეგ გამოიყენოს მაღალი მარილი და დაბალი pH ნუკლეინის მჟავას დასაკავშირებლად, და გამორეცხვა დაბალი მარილით და მაღალი pH-ით, რათა განცალკევდეს და გაასუფთავოს ნუკლეინი. მჟავა.

4. თერმული კრეკინგის ტუტე მეთოდი

ტუტე ექსტრაქცია ძირითადად იყენებს ტოპოლოგიურ განსხვავებებს კოვალენტურად დახურულ წრიულ პლაზმიდებსა და ხაზოვან ქრომატინს შორის მათ გამოსაყოფად. ტუტე პირობებში დენატურირებული ცილები ხსნადია.

5. დუღილის პიროლიზის მეთოდი

დნმ-ის ხსნარი თერმულად მუშავდება, რათა ისარგებლოს დნმ-ის ხაზოვანი მოლეკულების თვისებებით, რათა გამოეყოს დნმ-ის ფრაგმენტები დენატურირებული ცილების და უჯრედული ნარჩენებისგან ცენტრიფუგაციით წარმოქმნილი ნალექისგან.

6. ნანომაგნიტური მძივების მეთოდი

ნანოტექნოლოგიის გამოყენებით სუპერპარამაგნიტური ნანონაწილაკების ზედაპირის გასაუმჯობესებლად და შესაცვლელად, მზადდება სუპერპარამაგნიტური სილიციუმის ოქსიდის ნანო-მაგნიტური მძივები. მაგნიტურ მარცვლებს შეუძლიათ კონკრეტულად ამოიცნონ და ეფექტურად დაუკავშირდნენ ნუკლეინის მჟავის მოლეკულებს მიკროსკოპულ ინტერფეისზე. სილიციუმის ნანოსფეროს სუპერპარამაგნიტური თვისებების გამოყენებით, ქაოტროპული მარილების (გუანიდინის ჰიდროქლორიდი, გუანიდინის იზოთიოციანატი და ა.