Asam nukleat dipérang dadi asam deoksiribonukleat (DNA) lan asam ribonukleat (RNA), ing antarané RNA bisa dipérang dadi RNA ribosom (rRNA), RNA messenger (mRNA) lan RNA transfer (tRNA) miturut fungsi sing béda.

DNA utamané klempakan ing nukleus, mitokondria lan kloroplas, nalika RNA utamané disebarake ing sitoplasma.

Amarga basa purin lan basa pirimidin nduweni ikatan rangkap konjugasi ing asam nukleat, asam nukleat nduweni karakteristik penyerapan ultraviolet. Penyerapan ultraviolet saka uyah natrium DNA watara 260nm, lan absorbansi kasebut ditulis minangka A260, lan ana ing panyerepan ing 230nm, supaya spektroskopi ultraviolet bisa digunakake. Asam nukleat ditemtokake sacara kuantitatif lan kualitatif kanthi luminometer.

Asam nukleat minangka amfolit, sing padha karo poliasam. Asam nukleat bisa dipisahake dadi anion kanthi nggunakake buffer netral utawa alkali, lan diselehake ing medan listrik kanggo pindhah menyang anoda. Iki minangka prinsip elektroforesis.

Prinsip ekstraksi lan pemurnian asam nukleat lan syarat

1. Njamin integritas struktur primer asam nukleat

2. Ngilangi kontaminasi molekul liyane (kayata ora kalebu gangguan RNA nalika ngekstrak DNA)

3. Aja ana pelarut organik lan konsentrasi ion logam sing dhuwur sing nyandhet enzim ing conto asam nukleat

4. Ngurangi zat makromolekul kayata protein, polisakarida lan lipid sabisa-bisa

Metode ekstraksi lan pemurnian asam nukleat

1. Metode ekstraksi fenol/kloroform

Iki diciptakake ing taun 1956. Sawise ngobati cairan sel sing rusak utawa homogenat jaringan kanthi fenol / kloroform, komponen asam nukleat, utamane DNA, larut ing fase banyu, lipid utamane ing fase organik, lan protein dumunung ing antarane loro kasebut. fase.

2. Udan alkohol

Etanol bisa ngilangi lapisan hidrasi asam nukleat lan mbabarake gugus fosfat sing bermuatan negatif, lan ion sing bermuatan positif kayata NA﹢ bisa gabung karo gugus fosfat kanggo mbentuk endapan.

3. Metode kolom kromatografi

Liwat materi adsorpsi basis silika khusus, DNA bisa diserap khusus, dene RNA lan protein bisa dilewati kanthi lancar, banjur nggunakake uyah dhuwur lan pH kurang kanggo ngiket asam nukleat, lan elute karo uyah kurang lan pH dhuwur kanggo misahake lan ngresiki nukleat. asam.

4. Thermal cracking cara alkali

Ekstraksi alkali utamane nggunakake beda topologi antarane plasmid bunder sing ditutup kovalen lan kromatin linier kanggo misahake. Ing kahanan alkalin, protèin denaturasi bisa larut.

5. Metode pirolisis nggodhok

Solusi DNA diolah kanthi panas kanggo njupuk kauntungan saka sifat molekul DNA linier kanggo misahake pecahan DNA saka endapan sing dibentuk dening protein sing didenaturasi lan puing seluler kanthi sentrifugasi.

6. Metode manik-manik nanomagnetik

Nggunakake nanoteknologi kanggo nambah lan ngowahi permukaan nanopartikel superparamagnetik, manik-manik nano-magnetik silikon oksida superparamagnetik disiapake. Manik-manik magnetik khusus bisa ngenali lan kanthi efisien ngiket molekul asam nukleat ing antarmuka mikroskopis. Nggunakake sifat superparamagnetic saka nanospheres silika, miturut tumindak uyah Chaotropic (guanidine hydrochloride, guanidine isothiocyanate, etc.) Lan medan magnet eksternal, DNA lan RNA diisolasi saka getih, jaringan kewan, panganan, mikroorganisme patogen lan conto liyane.