Metode sakapurifikasi protein:

Cara pemurnian protein, pemisahan lan pemurnian protein, protein dibebasake saka sel utawa jaringan asli ing negara sing larut lan tetep ing kahanan alam asli tanpa mundhut aktivitas biologis. Mulane, materi kasebut kudu mbusak jaringan kewan lan adipose, materi wiji malah kudu ngilangi kontaminasi jas wiji saka bahan kayata tanin, lan wiji minyak luwih becik nggunakake pelarut organik sing nggodhok.

1. Cara pemurnian protein, ukuran lan cara analisis pemisahan sing beda: dialisis lan ultrafiltrasi nggunakake protein kasebut kanggo ngliwati sifat molekul sing ora bisa ngliwati membran semi-permeabel; centrifugation gradien Kapadhetan Kualitas lan Kapadhetan saka protein ing medium bakal duwe impact luwih ing partikel. Kacepetan penyelesaian luwih cepet; filtrasi gel minangka jinis kromatografi kolom.

2. Pemisahan prabédan kelarutan digunakake: elektro-udhara amarga muatan net molekul protein ing nol titik isoelektrik, ngurangi tolak elektrostatik antarane molekul, gampang kanggo aggregate, lan kelarutan minimal; larutan uyah sing digunakake karo larutan uyah Konsentrasi nambah utawa nyuda kelarutan protein.

3. Pangisian daya dipisahake lan dianalisis kanthi cara sing beda-beda, isi utama kalebu elektroforesis lan kromatografi pertukaran ion.

4. Metode sakapurifikasi proteinAdsorpsi selektif lan pamisahan protein nggunakake kekuatan adsorpsi partikel.

5. Kromatografi afinitas adhedhasar pemisahan ligan. Karakteristik biologis iki ngidini molekul protein ngiket sacara khusus tinimbang kovalen karo molekul liya sing diarani ligan.

6. Cara pemurnian protein: Metode presipitasi pelarut organik suhu rendah: Gunakake pelarut organik sing bisa larut karo banyu, kayata metanol, etanol, kanggo nyuda kelarutan lan udan sing paling akeh protein. Cara iki luwih dhuwur tinimbang resolusi salting metu, nanging protein denatures liyane Nalika gampang, iku kudu rampung ing suhu kurang.

Carane ngresikipurifikasi protein:

Carane ngresiki protein, protein minangka molekul gedhe, lan macem-macem ukuran molekul albumin, ana sawetara cara sing luwih gampang kanggo misahake protein lan bahan molekul cilik, lan uga campuran protein sing dipisahake. Cara utama kanggo misahake protein saka macem-macem ukuran molekul yaiku dialisis, ultrafiltrasi, filtrasi gel, lan pamisahan centrifugal. Dialisis lan ultrafiltrasi umume digunakake ing metode pamisahan protein. Campuran dialisis sing bakal dipisahake dilebokake ing tas dialisis sing digawe saka membran semipermeabel, banjur dicelupake ing larutan dialisis kanggo pamisahan. Ultrafiltrasi yaiku proses ngliwati banyu lan molekul cilik liyane kanthi nggunakake gaya sentrifugal utawa tekanan ing membran semi-permeabel lan nangkep protein ing membran semi-permeabel. Loro cara iki bisa dipisahake saka makromolekul basis protein lan molekul cilik adhedhasar uyah anorganik. Padha asring salted metu, digunakake magepokan karo cara pembubaran uyah, utawa bisa ngenalaken kanggo njupuk metu loro cara iki sawise salting metu nggunakake solusi uyah anorganik.

1. Cara ngresiki protein kanthi metode salting-out: Basis metode salting-out yaiku kelarutan protein ing larutan uyah encer bakal mundhak kanthi nambah konsentrasi uyah, nanging nalika konsentrasi uyah mundhak nganti nilai tartamtu, aktivitas banyu bakal tambah. Mudhunake, kang siji bisa nimbulaké sawetara protèin kanggo generate biaya liwat lumahing struktur molekul kanggo mboko sithik neutralized, lan membran hidrasi mboko sithik numpes, kang pungkasanipun bisa nimbulaké protèin lan molekul related kanggo berkembang agglomeration lan precipitate saka solusi beda.

2. Cara presipitasi pelarut organik: Ana rong alasan kanggo nyuda kelarutan protein ing pelarut organik: carane ngresiki protein minangka larutan uyah kanthi dehidrasi; sareh, pancet dielektrik saka pelarut organik saka banyu bisa suda Ing pelarut polar.

3. Agen precipitating protein: protein minangka agen precipitating mung tumindak ing siji jinis utawa siji saka udan protein, sing umum yaiku alkali, protein, lektin, lan logam abot.

4. Presipitasi polietilen glikol: Cara ngresiki polimer non-ionik sing larut ing banyu kanggopurifikasi protein, kayata polyethylene glycol lan sodium dextran sulfate kanggo precipitate protein.