の方法タンパク質の精製:

タンパク質の精製、タンパク質の分離および精製の方法。タンパク質は溶解状態で元の細胞または組織から放出され、生物活性を失うことなく元の自然な状態に残ります。このため、材料は動物組織や脂肪組織を除去する必要があり、種子材料はタンニンなどの物質による種皮の汚染さえも剥離する必要があり、油糧種子は低沸点有機溶媒を使用することが好ましい。

1. タンパク質の精製方法、サイズおよびさまざまな分離分析方法: 透析および限外濾過は、これらのタンパク質を使用して、半透膜を通過できない分子の性質を通過させます。密度勾配遠心分離 培地中のタンパク質の品質と密度は、粒子に大きな影響を与えます。整定速度が速くなります。ゲル濾過はカラムクロマトグラフィーの一種です。

2. 使用時の溶解度差の分離: タンパク質分子の正味電荷は等電点ゼロにあり、分子間の静電反発力が減少し、凝集しやすく、溶解度が最小になるため、電気沈殿。食塩水と一緒に使用される食塩水の濃度は、タンパク質の溶解度を増加または減少させます。

3. 電荷はさまざまな方法で分離および分析されます。主な内容には、電気泳動とイオン交換クロマトグラフィーが含まれます。

4. 方法タンパク質の精製粒子の吸着力を利用して、タンパク質の選択的な吸着と分離を行います。

5. アフィニティークロマトグラフィーはリガンドの分離に基づいています。この生物学的特性により、タンパク質分子はリガンドと呼ばれる別の分子に共有結合ではなく特異的に結合することができます。

6. タンパク質精製方法: 低温有機溶媒沈殿法: メタノール、エタノールなどの水と混和性の有機溶媒を使用すると、ほとんどのタンパク質の溶解度が低下し、沈殿が生じます。この方法は塩析より分解能は高いですが、タンパク質の変性が大きくなります。簡単に行う場合は低温で行う必要があります。

浄化方法タンパク質の精製:

タンパク質を精製する方法、タンパク質は高分子であり、アルブミンの分子サイズはさまざまですが、タンパク質と低分子材料を分離するより簡単な方法、およびタンパク質混合物を分離する方法があります。異なる分子サイズのタンパク質を分離する主な方法は、透析、限外濾過、ゲル濾過、および遠心分離です。透析と限外濾過はタンパク質の分離方法で一般的に使用されます。分離する透析液を半透膜からなる透析バッグに入れ、透析液に浸漬して分離する。限外濾過は、半透膜内で遠心力または圧力を使用して水やその他の小分子を通過させ、タンパク質を半透膜内に捕捉するプロセスです。これら 2 つの方法では、タンパク質ベースの高分子と無機塩ベースの小分子を分離できます。塩析法と併用して塩析する場合が多く、無機塩溶液を用いて塩析した後にこれら２つの方法を取り出す方法も導入されています。

1. 塩析法によるタンパク質の精製方法：塩析法の基本は、塩濃度が高くなるとタンパク質の希薄な食塩水への溶解度が増加しますが、塩濃度が一定値以上になると、タンパク質の溶解度が低下します。水分活性が高まります。減少すると、一部のタンパク質が分子構造表面を通じて電荷を生成して徐々に中和され、水和膜が徐々に破壊され、最終的には関連するタンパク質や分子が凝集を起こし、異なる溶液から沈殿する可能性があります。

2. 有機溶媒沈殿法: 有機溶媒に対するタンパク質の溶解度が低下する理由は 2 つあります。1 つはタンパク質を脱水して塩溶液として精製する方法です。第二に、極性溶媒では、水よりも有機溶媒の誘電率を下げることができます。

3. タンパク質沈殿剤: 沈殿剤としてのタンパク質は、1 種類または 1 つのタンパク質沈殿にのみ作用します。一般的なものは、アルカリ、タンパク質、レクチン、重金属です。

4. ポリエチレングリコール沈殿: 水溶性非イオン性ポリマーを精製する方法タンパク質の精製、タンパク質を沈殿させるためのポリエチレングリコールやデキストラン硫酸ナトリウムなど。