שיטות שלטיהור חלבון:
שיטת טיהור החלבון, הפרדה וטיהור החלבון, החלבון משתחרר מהתאים או הרקמות המקוריות במצב מומס ונשאר במצב הטבעי המקורי ללא אובדן פעילות ביולוגית. מסיבה זו, החומר צריך להסיר רקמת בעלי חיים ורקמות שומן, חומר הזרע צריך אפילו לקלף את הזיהום של מעטפת הזרעים מחומרים כמו טאנינים, ורצוי שזרעי השמן ישתמשו בממס אורגני בעל רתיחה נמוכה.
1. שיטת טיהור החלבון, גודל ושיטות ניתוח הפרדה שונות: דיאליזה ואולטרה סינון משתמשות בחלבונים אלו כדי לעבור דרך הטבע של מולקולות שאינן יכולות לעבור דרך הממברנה החדירה למחצה; צנטריפוגה צפיפות לאיכות וצפיפות החלבון במדיום תהיה השפעה גדולה יותר על החלקיקים. מהירות ההתיישבות מהירה יותר; סינון ג'ל הוא סוג של כרומטוגרפיה עמודה.
2. הפרדת הבדל מסיסות בשימוש: משקעים אלקטרו מכיוון שהמטען הנקי של מולקולות החלבון נמצא בנקודה איזואלקטרית אפס, מפחית את הדחייה האלקטרוסטטית בין מולקולות, קל לצבירה ומסיסות מינימלית; תמיסת מלח בשימוש עם תמיסת מלח הריכוז מעלה או מקטין את מסיסות החלבון.
3. המטען מופרד ומנתח בשיטות שונות, התכולה העיקרית כוללת אלקטרופורזה וכרומטוגרפיה של חילופי יונים.
4. שיטות שלטיהור חלבוןהספיחה וההפרדה הסלקטיבית של חלבונים מנצלים את החוזק של ספיחת החלקיקים.
5. כרומטוגרפיה זיקה מבוססת על הפרדה של ליגנדים. מאפיין ביולוגי זה מאפשר למולקולות חלבון להיקשר באופן ספציפי ולא קוולנטי למולקולה אחרת הנקראת ליגנד.
6. שיטת טיהור חלבונים: שיטת משקעים ממס אורגני בטמפרטורה נמוכה: השתמשו בממיסים אורגניים הניתנים לערבב עם מים, כמו מתנול, אתנול, כדי להפחית את המסיסות והמשקעים של רוב החלבונים. שיטה זו גבוהה יותר מאשר הרזולוציה של ההמלחה, אך החלבון מתהפך יותר כאשר קל, זה צריך להיעשות בטמפרטורה נמוכה.
איך לטהרטיהור חלבון:
איך לטהר חלבון, חלבון הוא מולקולה גדולה, וגדלים מולקולריים שונים של אלבומין, יש כמה שיטות פשוטות יותר להפרדת חלבון וחומרי מולקולה קטנות, וגם תערובת חלבון מופרדת. השיטות העיקריות להפרדת חלבונים בגדלים מולקולריים שונים הן דיאליזה, אולטרה סינון, סינון ג'ל והפרדה צנטריפוגלית. דיאליזה ואולטרה סינון משמשים בדרך כלל בשיטות הפרדת חלבונים. את תערובת הדיאליזה שיש להפריד שמים בשקית דיאליזה עשויה קרום חדיר למחצה, ולאחר מכן טובלים בתמיסת הדיאליזה להפרדה. אולטרה סינון הוא תהליך העברת מים ומולקולות קטנות אחרות תוך שימוש בכוח או לחץ צנטריפוגלי בממברנה חדירה למחצה ולכידת חלבונים בקרום החדיר למחצה. ניתן להפריד בין שתי השיטות הללו ממאקרומולקולות המבוססות על חלבון וממולקולות קטנות המבוססות על מלח אנאורגני. לעתים קרובות הם מומלחים, בשימוש בשילוב עם שיטת פירוק המלח, או שניתן להציג אותם כדי להוציא את שתי השיטות הללו לאחר המלחה באמצעות תמיסות מלח אנאורגניות.
1. כיצד לטהר חלבון בשיטת ההמלחה: הבסיס לשיטת ההמלחה הוא שמסיסות החלבון בתמיסת מלח מדוללת תגדל עם עליית ריכוז המלח, אך כאשר ריכוז המלח עולה לערך מסוים, פעילות המים תוגבר. ירידה, אשר בתורה יכולה לגרום לחלבונים מסוימים ליצור מטענים דרך פני המבנה המולקולריים לנטרול הדרגתי, וקרום ההידרציה נהרס בהדרגה, מה שעלול בסופו של דבר לגרום לחלבונים ומולקולות קשורות לפתח צבירה ומשקעים מתמיסות שונות.
2. שיטת משקעים ממס אורגני: ישנן שתי סיבות להפחית את מסיסות החלבון בממיסים אורגניים: כיצד לטהר חלבון כתמיסת מלח עם התייבשות; שנית, ניתן להפחית את הקבוע הדיאלקטרי של ממיסים אורגניים מאשר מים בממסים קוטביים.
3. חומר משקעים חלבון: חלבון כחומר משקעים פועל רק על סוג אחד או אחד של משקעי חלבון, הנפוצים הם אלקליין, חלבון, לקטין ומתכות כבדות.
4. משקעים של פוליאתילן גליקול: כיצד לטהר פולימרים לא יוניים מסיסים במים עבורטיהור חלבון, כגון פוליאתילן גליקול ונתרן דקסטרן סולפט לזרז חלבונים.
זמן פרסום: 27 באוקטובר 2020