La separazione e purificazione delle proteine ​​è ampiamente utilizzata nella ricerca e nelle applicazioni biochimiche e costituisce un'importante competenza operativa. SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument ha compilato il contenuto della separazione grezza e della separazione fine diproteinapurificazione per tutti. Una tipica cellula eucariotica può contenere migliaia di proteine ​​diverse, alcune sono molto ricche e altre ne contengono solo poche copie. Per studiare una determinata proteina, è necessario prima purificarla da altre proteine ​​e molecole non proteiche.

Separazione grossolana

Quando si ottiene l'estratto proteico (talvolta miscelato con acidi nucleici, polisaccaridi, ecc.), viene selezionata una serie di metodi appropriati per separare l'estratto desideratoproteinada altre impurità. Generalmente, questa fase di separazione utilizza metodi come la salatura, l'accumulo di punti isoelettrici e il frazionamento dei solventi organici. Questi metodi sono caratterizzati da semplicità e grande capacità di lavorazione, che può rimuovere molte impurità e concentrare la soluzione proteica. Alcuni estratti proteici hanno un volume elevato e non sono adatti alla concentrazione mediante accumulo o salatura. È possibile scegliere l'ultrafiltrazione, la filtrazione su gel, l'essiccazione sotto vuoto o il congelamento o altri metodi di concentrazione.

Separazione fine

Dopo il frazionamento grossolano del campione, il volume è generalmente piccolo e la maggior parte delle impurità sono state rimosse. Per un'ulteriore purificazione, i metodi cromatografici includono generalmente la filtrazione su gel, la cromatografia a scambio ionico, la cromatografia ad adsorbimento e la cromatografia di affinità. Se necessario, è anche possibile scegliere l'elettroforesi, inclusa l'elettroforesi di zona, l'impostazione del punto isoelettrico, ecc. come processo di purificazione finale. Il metodo utilizzato per la separazione dei livelli di suddivisione è generalmente piccolo nella pianificazione, ma con un'alta risoluzione.

La cristallizzazione è il processo finale di separazione e purificazione delle proteine. Anche se il processo di cristallizzazione non garantisce che la proteina debba essere uniforme, è solo quando una determinata proteina ha un vantaggio nella soluzione che forma un cristallo. Il processo di cristallizzazione stesso è accompagnato da un certo grado di purificazione e la ricristallizzazione può rimuovere una piccola quantità di proteina adulterata. Poiché denaturatoproteinanon è mai stato trovato durante il processo di cristallizzazione, la cristallizzazione delle proteine ​​non è solo un segno di purezza, ma anche una potente linea guida per determinare che il prodotto è nel suo stato naturale.