Metodi dipurificazione delle proteine:

Il metodo di purificazione delle proteine, separazione e purificazione delle proteine, la proteina viene rilasciata dalle cellule o dai tessuti originali in uno stato disciolto e rimane nello stato naturale originale senza perdita di attività biologica. Per questo motivo il materiale dovrebbe rimuovere il tessuto animale e adiposo, il materiale del seme dovrebbe anche rimuovere la contaminazione del tegumento da sostanze come tannini e il seme oleoso dovrebbe preferibilmente utilizzare un solvente organico bassobollente.

1. Il metodo di purificazione delle proteine, dimensioni e diversi metodi di analisi di separazione: dialisi e ultrafiltrazione utilizzano queste proteine ​​per passare attraverso la natura delle molecole che non possono passare attraverso la membrana semipermeabile; centrifugazione in gradiente di densità La qualità e la densità della proteina nel mezzo avranno un impatto maggiore sulle particelle. La velocità di assestamento è più veloce; la filtrazione su gel è una sorta di cromatografia su colonna.

2. Separazione della differenza di solubilità nell'uso: elettroprecipitazione perché la carica netta delle molecole proteiche è al punto isoelettrico zero, riducendo la repulsione elettrostatica tra le molecole, facile aggregazione e minima solubilità; soluzione salina utilizzata con soluzione salina La concentrazione aumenta o diminuisce la solubilità della proteina.

3. La carica viene separata e analizzata con diversi metodi, i contenuti principali includono l'elettroforesi e la cromatografia a scambio ionico.

4. Metodi dipurificazione delle proteineL'adsorbimento selettivo e la separazione delle proteine ​​utilizzano la forza di adsorbimento delle particelle.

5. La cromatografia di affinità si basa sulla separazione dei ligandi. Questa caratteristica biologica consente alle molecole proteiche di legarsi in modo specifico anziché covalente a un'altra molecola chiamata ligando.

6. Metodo di purificazione delle proteine: Metodo di precipitazione con solventi organici a bassa temperatura: utilizzare solventi organici miscibili con acqua, come metanolo, etanolo, per ridurre la solubilità e la precipitazione della maggior parte delle proteine. Questo metodo è superiore alla risoluzione della salatura, ma la proteina si denatura di più. Quando è facile, dovrebbe essere eseguita a bassa temperatura.

Come purificarsipurificazione delle proteine:

Come purificare le proteine, le proteine ​​sono grandi molecole e l'albumina ha varie dimensioni molecolari. Esistono alcuni metodi più semplici per separare proteine ​​e materiali di piccole molecole e anche miscele proteiche separate. I metodi principali per separare proteine ​​di diverse dimensioni molecolari sono la dialisi, l'ultrafiltrazione, la filtrazione su gel e la separazione centrifuga. La dialisi e l'ultrafiltrazione sono comunemente utilizzate nei metodi di separazione delle proteine. La miscela di dialisi da separare viene posta in una sacca per dialisi costituita da una membrana semipermeabile e quindi immersa nella soluzione di dialisi per la separazione. L'ultrafiltrazione è il processo di passaggio dell'acqua e di altre piccole molecole utilizzando la forza centrifuga o la pressione in una membrana semipermeabile e intrappolando le proteine ​​nella membrana semipermeabile. Questi due metodi possono essere separati da macromolecole a base proteica e piccole molecole a base di sali inorganici. Vengono spesso salati, utilizzati insieme al metodo di dissoluzione del sale, oppure possono essere introdotti per eliminare questi due metodi dopo la salatura utilizzando soluzioni saline inorganiche.

1. Come purificare le proteine ​​con il metodo del salting out: La base del metodo del salting out è che la solubilità delle proteine ​​nella soluzione salina diluita aumenterà con l'aumento della concentrazione di sale, ma quando la concentrazione di sale aumenta fino a un certo valore, il l’attività dell’acqua sarà aumentata. Diminuzione, che a sua volta può far sì che alcune proteine ​​generino cariche attraverso la superficie della struttura molecolare per essere gradualmente neutralizzate e la membrana di idratazione venga gradualmente distrutta, il che può eventualmente causare lo sviluppo di agglomerazioni di proteine ​​e molecole correlate e la precipitazione da diverse soluzioni.

2. Metodo di precipitazione dei solventi organici: esistono due ragioni per ridurre la solubilità delle proteine ​​nei solventi organici: come purificare le proteine ​​come soluzione salina con disidratazione; in secondo luogo, la costante dielettrica dei solventi organici rispetto all'acqua può essere ridotta nei solventi polari.

3. Agente precipitante proteico: le proteine ​​come agente precipitante agiscono solo su un tipo o uno di precipitazione proteica, quelli comuni sono alcalini, proteici, lectina e metalli pesanti.

4. Precipitazione del glicole polietilenico: come purificare i polimeri non ionici idrosolubili perpurificazione delle proteine, come polietilenglicole e sodio destrano solfato per precipitare le proteine.