Hver er hreinsunaraðferðinpróteinhreinsunarkerfi? Nauðsynlegt er að þekkja kóða DNA röð hreinsaða próteinsins, sjá hvaða frumur eða vefir eru oftjáðir í markgeninu og hanna gena frumra til að magna upp arf mark DNA brotsins. Þetta er svokölluð öflun markgena brota.

Smíði tjáningarferju: Í dreifkjörnunga- eða heilkjörnungatjáningarferjunni með eiginleika hinnar fánu genatjáningar sjálfrar er aðalvandamálið í þessu skrefi að smíða plasmíðið og genið sem vekur áhuga, og tjáningarkerfið. Dreifkjarnatjáningartíminn er stuttur, kostnaðurinn er lítill og mikil tjáning er í forgangi; genið er ekki tjáð í E. coli og vandamálið á sér stað í codon optimization. Með hliðsjón af betri virkni og hreinsun próteins völdu vísindamennirnir að tjá í Pichi geri. Árangursrík tjáning codon optimization er mikilvæg.

Hver er hreinsunaraðferð próteinhreinsunarkerfisins:

1. Úrkoma.

2. Rafskaut: Hlaðið prótein er hærra eða lægra en jafnrafpunktur þess og hægt er að færa það yfir á neikvæða rafskautið eða jákvæða rafskaut rafsviðsins í rafsviðinu. Stuðningur við filmu rafdrætti, rafskaut osfrv.

3. Skilun: Aðferð sem notar tvo skilunarpoka til að skilja stórar sameindir frá próteinum og litlum sameindalífrænum efnasamböndum.

4. Litskiljun: Jónaskiptaskiljun notar frjálsa eiginleika próteina. Við ákveðið pH eru hleðslur og eiginleikar próteina mismunandi og hægt er að aðskilja þau með jónaskiptaskiljun. Í anjónaskiptaskiljun eru prótein með lágan neikvæðan kraft skoluð út fyrst. Sameindasigti, einnig þekkt sem hlaupsíun. Lítil prótein komast inn í svitaholurnar og dvelja í þeim í langan tíma. Stór prótein komast ekki inn í svitaholurnar og flæða beint út.

5. Hver er hreinsunaraðferðinpróteinhreinsunarkerfi? Ofskilvinding: Hægt er að nota próteinhreinsun til að ákvarða mólþunga og er hægt að nota sem prótein. Myndun próteina með mismunandi þéttleika er aðskilin.