Apa metode pemurnian sistem pemurnian protein

Apa metode pemurniannyasistem pemurnian protein? Penting untuk mengetahui urutan DNA pengkode dari protein yang dimurnikan, untuk melihat sel atau jaringan mana yang diekspresikan secara berlebihan pada gen target, dan untuk merancang primer gen untuk memperkuat arf dari fragmen DNA target. Inilah yang disebut perolehan fragmen gen target.

Konstruksi vektor ekspresi: Pada vektor ekspresi prokariotik atau eukariotik dengan karakteristik ekspresi gen yang diperoleh itu sendiri, masalah utama dari langkah ini adalah membangun plasmid dan gen yang diinginkan, serta sistem ekspresi. Waktu ekspresi prokariotik singkat, biayanya rendah, dan ekspresi dalam jumlah besar merupakan prioritas; gen tidak diekspresikan dalam E. coli, dan masalah terjadi pada optimasi kodon. Dengan pertimbangan aktivitas dan pemurnian protein yang lebih baik, para peneliti memilih untuk mengekspresikannya dalam ragi Pichi. Ekspresi optimasi kodon yang berhasil adalah penting.

19

Apa metode pemurnian sistem pemurnian protein:

1. Curah hujan.

2. Elektroforesis: Protein bermuatan lebih tinggi atau lebih rendah dari titik isoelektriknya dan dapat dipindahkan ke elektroda negatif atau elektroda positif medan listrik dalam medan listrik. Mendukung elektroforesis film, elektroforesis, dll.

3. Dialisis: Metode yang menggunakan dua kantong dialisis untuk memisahkan molekul besar dari protein dan senyawa organik molekul kecil.

4. Kromatografi: Kromatografi penukar ion menggunakan sifat bebas protein. Pada pH tertentu, muatan dan sifat protein berbeda, dan keduanya dapat dipisahkan dengan kromatografi penukar ion. Dalam kromatografi penukar anion, protein dengan daya negatif rendah dielusi terlebih dahulu. Saringan molekuler, juga dikenal sebagai filtrasi gel. Protein kecil masuk ke pori-pori dan bertahan di dalamnya untuk waktu yang lama. Protein berukuran besar tidak dapat masuk ke pori-pori dan langsung mengalir keluar.

5. Apa metode pemurniannyasistem pemurnian protein? Ultrasentrifugasi: Pemurnian protein dapat digunakan untuk menentukan berat molekul dan dapat digunakan sebagai protein. Pembentukan protein dengan kepadatan berbeda dipisahkan.


Waktu posting: 21 April-2021