Pemisahan dan pemurnian protein banyak digunakan dalam penelitian dan penerapan biokimia dan merupakan keterampilan operasional yang penting. Perusahaan Sistem Pemurnian Protein SCG-Saipu Instrument telah menyusun kandungan pemisahan kasar dan pemisahan halusproteinpemurnian untuk semua orang. Sel eukariotik yang khas dapat mengandung ribuan protein berbeda, ada yang sangat kaya dan ada yang hanya berisi sedikit salinan. Untuk mempelajari suatu protein tertentu, perlu dilakukan pemurnian terlebih dahulu terhadap protein tersebut dari protein lain dan molekul non-protein.

Pemisahan kasar

Ketika ekstrak protein (terkadang dicampur dengan asam nukleat, polisakarida, dll.) diperoleh, serangkaian metode yang tepat dipilih untuk memisahkan protein yang diinginkan.proteindari pengotor lainnya. Umumnya langkah pemisahan ini menggunakan metode seperti salting out, akumulasi titik isoelektrik dan fraksinasi pelarut organik. Metode ini dicirikan oleh kesederhanaan dan kapasitas pemrosesan yang besar, yang dapat menghilangkan banyak pengotor dan memekatkan larutan protein. Beberapa ekstrak protein memiliki volume yang besar dan tidak cocok untuk dikonsentrasikan dengan cara diakumulasi atau diasinkan. Anda dapat memilih ultrafiltrasi, filtrasi gel, pengeringan vakum pembekuan, atau metode konsentrasi lainnya.

Pemisahan yang baik

Setelah sampel difraksinasi secara kasar, volumenya umumnya kecil, dan sebagian besar pengotor telah dihilangkan. Untuk pemurnian lebih lanjut, metode kromatografi umumnya meliputi filtrasi gel, kromatografi penukar ion, kromatografi adsorpsi, dan kromatografi afinitas. Jika perlu, Anda juga dapat memilih elektroforesis, termasuk elektroforesis zona, kumpulan titik isoelektrik, dll. sebagai proses pemurnian akhir. Metode yang digunakan untuk pemisahan tingkat subdivisi umumnya kecil dalam perencanaan, namun dengan resolusi tinggi.

Kristalisasi adalah proses akhir pemisahan dan pemurnian protein. Meskipun proses kristalisasi tidak menjamin bahwa protein harus seragam, proses kristalisasi hanya terjadi jika protein tertentu mempunyai keunggulan dalam larutan untuk membentuk kristal. Proses kristalisasi itu sendiri disertai dengan tingkat pemurnian tertentu, dan rekristalisasi dapat menghilangkan sejumlah kecil protein palsu. Sejak didenaturasiproteinbelum pernah ditemukan selama proses kristalisasi, kristalisasi protein tidak hanya merupakan tanda kemurnian, tetapi juga merupakan pedoman yang ampuh untuk menentukan bahwa produk tersebut dalam keadaan alami.