Metode dan pemurnian pemurnian protein

Metodepemurnian protein:

Metode pemurnian protein, pemisahan dan pemurnian protein, protein dilepaskan dari sel atau jaringan asli dalam keadaan terlarut dan tetap dalam keadaan alami aslinya tanpa kehilangan aktivitas biologis. Oleh karena itu, bahan harus menghilangkan jaringan hewani dan adiposa, bahan benih bahkan harus menghilangkan kontaminasi kulit biji dari zat-zat seperti tanin, dan minyak biji sebaiknya menggunakan pelarut organik dengan titik didih rendah.

1. Metode pemurnian protein, ukuran dan metode analisis pemisahan yang berbeda: dialisis dan ultrafiltrasi menggunakan protein ini untuk melewati sifat molekul yang tidak dapat melewati membran semi permeabel; sentrifugasi gradien kepadatan Kualitas dan kepadatan protein dalam medium akan berdampak lebih besar pada partikel. Kecepatan penyelesaian lebih cepat; filtrasi gel adalah sejenis kromatografi kolom.

2. Pemisahan perbedaan kelarutan dalam penggunaan: elektro-presipitasi karena muatan bersih molekul protein berada pada titik isoelektrik nol, mengurangi tolakan elektrostatik antar molekul, mudah beragregasi, dan kelarutan minimum; larutan garam digunakan dengan larutan garam Konsentrasinya meningkatkan atau menurunkan kelarutan protein.

3. Muatan dipisahkan dan dianalisis dengan metode yang berbeda, isi utamanya meliputi elektroforesis dan kromatografi penukar ion.

4. Metodepemurnian proteinAdsorpsi selektif dan pemisahan protein memanfaatkan kekuatan adsorpsi partikel.

5. Kromatografi afinitas didasarkan pada pemisahan ligan. Karakteristik biologis ini memungkinkan molekul protein untuk berikatan secara spesifik, bukan secara kovalen, dengan molekul lain yang disebut ligan.

6. Metode pemurnian protein: Metode pengendapan pelarut organik suhu rendah: Gunakan pelarut organik yang dapat larut dengan air, seperti metanol, etanol, untuk mengurangi kelarutan dan pengendapan sebagian besar protein. Metode ini lebih tinggi daripada resolusi salting out, tetapi protein lebih banyak mengalami denaturasi. Jika mudah, sebaiknya dilakukan pada suhu rendah.

6ca4b93f5

Cara memurnikanpemurnian protein:

Cara memurnikan protein, protein adalah molekul besar, dan berbagai ukuran molekul albumin, ada beberapa metode yang lebih sederhana untuk memisahkan protein dan bahan molekul kecil, serta memisahkan campuran protein. Metode utama untuk memisahkan protein dengan ukuran molekul berbeda adalah dialisis, ultrafiltrasi, filtrasi gel, dan pemisahan sentrifugal. Dialisis dan ultrafiltrasi biasanya digunakan dalam metode pemisahan protein. Campuran dialisis yang akan dipisahkan ditempatkan dalam kantong dialisis yang terbuat dari membran semipermeabel, kemudian direndam dalam larutan dialisis untuk pemisahan. Ultrafiltrasi adalah proses melewatkan air dan molekul kecil lainnya menggunakan gaya atau tekanan sentrifugal pada membran semipermeabel dan menjebak protein dalam membran semipermeabel. Kedua metode ini dapat memisahkan makromolekul berbasis protein dan molekul kecil berbasis garam anorganik. Mereka sering kali diasinkan, digunakan bersamaan dengan metode pelarutan garam, atau dapat digunakan untuk menghilangkan kedua metode ini setelah penggaraman menggunakan larutan garam anorganik.

1. Cara memurnikan protein dengan metode salting-out: Dasar dari metode salting-out adalah kelarutan protein dalam larutan garam encer akan meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi garam, namun bila konsentrasi garam meningkat sampai nilai tertentu, maka aktivitas air akan meningkat. Penurunan, yang pada gilirannya dapat menyebabkan beberapa protein menghasilkan muatan melalui permukaan struktur molekul secara bertahap dinetralkan, dan membran hidrasi secara bertahap dihancurkan, yang pada akhirnya dapat menyebabkan protein dan molekul terkait mengembangkan aglomerasi dan mengendap dari larutan yang berbeda.

2. Metode pengendapan pelarut organik: Ada dua alasan untuk mengurangi kelarutan protein dalam pelarut organik: cara memurnikan protein sebagai larutan garam dengan dehidrasi; kedua, konstanta dielektrik pelarut organik dibandingkan air dapat dikurangi dalam pelarut polar.

3. Zat pengendap protein: protein sebagai zat pengendap hanya bekerja pada satu jenis atau salah satu pengendapan protein, yang umum adalah basa, protein, lektin, dan logam berat.

4. Pengendapan polietilen glikol: Cara memurnikan polimer non-ionik yang larut dalam airpemurnian protein, seperti polietilen glikol dan natrium dekstran sulfat untuk mengendapkan protein.


Waktu posting: 27 Oktober 2020