Նուկլեինաթթուն բաժանվում է դեզօքսիռիբոնուկլեինաթթվի (ԴՆԹ) և ռիբոնուկլեինաթթվի (ՌՆԹ), որոնցից ՌՆԹ-ն կարելի է բաժանել ռիբոսոմային ՌՆԹ (rRNA), սուրհանդակային ՌՆԹ (mRNA) և փոխանցող ՌՆԹ (tRNA):

ԴՆԹ-ն հիմնականում կենտրոնացած է միջուկում, միտոքոնդրիումներում և քլորոպլաստներում, մինչդեռ ՌՆԹ-ն հիմնականում բաշխված է ցիտոպլազմայում։

Քանի որ պուրինային հիմքերը և պիրիմիդինային հիմքերը նուկլեինաթթուներում ունեն կրկնակի կապեր, նուկլեինաթթուներն ունեն ուլտրամանուշակագույն կլանման առանձնահատկություններ: ԴՆԹ-ի նատրիումի աղերի ուլտրամանուշակագույն կլանումը կազմում է մոտ 260 նմ, և դրա կլանումը արտահայտվում է որպես A260, և այն գտնվում է 230 նմ կլանման միջանցքում, ուստի կարող է օգտագործվել ուլտրամանուշակագույն սպեկտրոսկոպիա: Նուկլեինաթթուները քանակապես և որակապես որոշվում են լուսաչափով։

Նուկլեինաթթուները ամֆոլիտներ են, որոնք համարժեք են պոլիթթուներին։ Նուկլեինաթթուները կարող են տարանջատվել անիոնների՝ օգտագործելով չեզոք կամ ալկալային բուֆերներ և տեղադրվել էլեկտրական դաշտում՝ դեպի անոդ շարժվելու համար: Սա էլեկտրոֆորեզի սկզբունքն է:

Նուկլեինաթթվի արդյունահանման և մաքրման սկզբունքներն ու պահանջները

1. Ապահովել նուկլեինաթթվի առաջնային կառուցվածքի ամբողջականությունը

2. Վերացնել այլ մոլեկուլների աղտոտումը (օրինակ՝ ԴՆԹ-ի արդյունահանման ժամանակ ՌՆԹ-ի միջամտության բացառումը)

3. Նուկլեինաթթվի նմուշներում չպետք է լինեն օրգանական լուծիչներ և մետաղական իոնների բարձր կոնցենտրացիաներ, որոնք արգելակում են ֆերմենտները:

4. Որքան հնարավոր է նվազեցնել մակրոմոլեկուլային նյութերը, ինչպիսիք են սպիտակուցները, պոլիսախարիդները և լիպիդները

Նուկլեինաթթվի արդյունահանման և մաքրման մեթոդ

1. Ֆենոլի/քլորոֆորմի արդյունահանման մեթոդ

Այն հայտնագործվել է 1956 թվականին: Բջջային կոտրված հեղուկը կամ հյուսվածքի միաձուլումը ֆենոլ/քլորոֆորմով մշակելուց հետո նուկլեինաթթվի բաղադրիչները, հիմնականում ԴՆԹ-ն, լուծվում են ջրային փուլում, լիպիդները հիմնականում օրգանական փուլում են, իսկ սպիտակուցները՝ երկուսի միջև: փուլերը.

2. Ալկոհոլային տեղումներ

Էթանոլը կարող է վերացնել նուկլեինաթթվի հիդրացիոն շերտը և բացահայտել բացասաբար լիցքավորված ֆոսֆատ խումբը, իսկ դրական լիցքավորված իոնները, ինչպիսին NA﹢-ն է, կարող են միավորվել ֆոսֆատային խմբի հետ՝ ձևավորելով նստվածք:

3. Քրոմատոգրաֆիկ սյունակի մեթոդ

Սիլիցիումի վրա հիմնված հատուկ կլանման նյութի միջոցով ԴՆԹ-ն կարող է հատուկ կլանվել, մինչդեռ ՌՆԹ-ն և սպիտակուցը կարող են սահուն անցնել, այնուհետև օգտագործել բարձր աղ և ցածր pH՝ նուկլեինաթթուն կապելու համար, և զտել ցածր աղով և բարձր pH-ով՝ առանձնացնել և մաքրել նուկլեինները: թթու.

4. Ջերմային ճեղքման ալկալային մեթոդ

Ալկալային արդյունահանումը հիմնականում օգտագործում է կովալենտային փակ շրջանաձև պլազմիդների և գծային քրոմատինի տոպոլոգիական տարբերությունները՝ դրանք առանձնացնելու համար։ Ալկալային պայմաններում դենատուրացված սպիտակուցները լուծելի են:

5. Եռման պիրոլիզի մեթոդ

ԴՆԹ-ի լուծույթը ջերմային մշակվում է ԴՆԹ-ի գծային մոլեկուլների հատկություններից օգտվելու համար՝ ԴՆԹ-ի բեկորները դենատուրացված սպիտակուցներից և բջջային բեկորներից առաջացած նստվածքից առանձնացնելու համար ցենտրիֆուգման միջոցով:

6. Նանոմագնիսական ուլունքների մեթոդ

Սուպերպարամագնիսական նանոմասնիկների մակերեսը բարելավելու և փոփոխելու համար նանոտեխնոլոգիա օգտագործելով, պատրաստվում են սիլիցիումի օքսիդի գերպարամագնիսական նանոմագնիսական ուլունքներ: Մագնիսական ուլունքները կարող են հատուկ ճանաչել և արդյունավետ կերպով կապել նուկլեինաթթվի մոլեկուլներին մանրադիտակային միջերեսի վրա: Օգտագործելով սիլիցիումի նանոսֆերաների սուպերպարամագնիսական հատկությունները, քաոտրոպային աղերի (գուանիդինի հիդրոքլորիդ, գուանիդինի իզոթիոցիանատ և այլն) և արտաքին մագնիսական դաշտի ազդեցության տակ ԴՆԹ և ՌՆԹ-ն մեկուսացվել են արյունից, կենդանական հյուսվածքից, սննդից, պաթոգեն միկրոօրգանիզմներից և այլ նմուշներից: