Mi a tisztítási módszere afehérjetisztító rendszer? Ismerni kell a tisztított fehérje kódoló DNS-szekvenciáját, látni kell, hogy mely sejtek vagy szövetek expresszálódnak túlzottan a célgénben, és génprimereket kell tervezni a cél DNS-fragmentum arf-jának amplifikálására. Ez a célgén-fragmensek úgynevezett megszerzése.

Expressziós vektor megalkotása: A prokarióta vagy eukarióta expressziós vektorban, amely magával a kapott génexpresszió jellemzőivel rendelkezik, ennek a lépésnek a fő problémája a kívánt plazmid és gén, valamint az expressziós rendszer megalkotása. A prokarióta expressziós ideje rövid, a költségek alacsonyak, és a nagy mennyiségű expresszió prioritást élvez; a gén nem expresszálódik E. coliban, és a probléma a kodonoptimalizálásban jelentkezik. A fehérje jobb aktivitása és tisztítása miatt a kutatók a Pichi élesztőben történő expresszió mellett döntöttek. Fontos a kodonoptimalizálás sikeres kifejezése.

Mi a fehérjetisztító rendszer tisztítási módszere:

1. Csapadék.

2. Elektroforézis: Egy töltött fehérje magasabb vagy alacsonyabb, mint az izoelektromos pontja, és az elektromos térben a negatív elektródához vagy az elektromos tér pozitív elektródájához mozgatható. Támogató film-elektroforézis, elektroforézis stb.

3. Dialízis: Olyan módszer, amely két dialíziszsákot használ a nagy molekulák fehérjéktől és kis molekulájú szerves vegyületektől való elválasztására.

4. Kromatográfia: Az ioncserélő kromatográfia a fehérjék szabad tulajdonságait használja fel. Adott pH mellett a fehérjék töltése és tulajdonságai eltérőek, és ioncserélő kromatográfiával szétválaszthatók. Az anioncserélő kromatográfiában először az alacsony negatív teljesítményű fehérjék eluálódnak. Molekulaszűrők, más néven gélszűrés. A kis fehérjék bejutnak a pórusokba, és hosszú ideig ott maradnak. A nagy fehérjék nem tudnak bejutni a pórusokba és közvetlenül kifolyni.

5. Mi a tisztítási módszere afehérjetisztító rendszer? Ultracentrifugálás: A fehérjetisztítás felhasználható a molekulatömeg meghatározására, és felhasználható fehérjeként. Elkülönül a különböző sűrűségű fehérjék képződése.