A fehérjék szétválasztását és tisztítását széles körben használják a biokémiai kutatásokban és alkalmazásokban, és fontos műveleti készség. Az SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument összeállította a nyers elválasztás és a finom elválasztás tartalmát.fehérjemegtisztulás mindenkinek. Egy tipikus eukarióta sejt több ezer különböző fehérjét tartalmazhat, néhány nagyon gazdag, és néhány csak néhány másolatot tartalmaz. Egy bizonyos fehérje tanulmányozásához először meg kell tisztítani a fehérjét más fehérjéktől és nem fehérje molekuláktól.

Durva elválasztás

Amikor megkapjuk a fehérjekivonatot (néha nukleinsavakkal, poliszacharidokkal stb. keverve), megfelelő módszereket választunk ki a kívánt kivonatok elkülönítésére.fehérjeegyéb szennyeződésektől. Általában ez az elválasztási lépés olyan módszereket használ, mint a kisózás, az izoelektromos pont felhalmozódása és a szerves oldószeres frakcionálás. Ezeket a módszereket az egyszerűség és a nagy feldolgozási kapacitás jellemzi, amelyek sok szennyeződést eltávolítanak és a fehérjeoldatot koncentrálják. Egyes fehérjekivonatok nagy térfogatúak, és nem alkalmasak akkumulációval vagy kisózással történő koncentrálásra. Választhat ultraszűrést, gélszűrést, fagyasztva vákuumszárítást vagy egyéb töményítési módszereket.

Finom elválasztás

A minta durva frakcionálása után a minta térfogata általában kicsi, és a szennyeződések nagy részét eltávolították. A további tisztításhoz a kromatográfiás módszerek általában magukban foglalják a gélszűrést, ioncserélő kromatográfiát, adszorpciós kromatográfiát és affinitáskromatográfiát. Szükség esetén az elektroforézist is választhatja, beleértve a zónaelektroforézist, az izoelektromos pontkészletet stb., mint végső tisztítási eljárást. A felosztási szintű szétválasztásra alkalmazott módszer általában kicsi tervezésű, de nagy felbontású.

A kristályosítás a fehérjeelválasztás és -tisztítás végső folyamata. Bár a kristályosítási folyamat nem biztosítja, hogy a fehérjének egységesnek kell lennie, ez csak akkor történik meg, ha egy bizonyos fehérje előnyt jelent az oldatban, hogy kristályt képezzen. Magát a kristályosítási folyamatot bizonyos fokú tisztítás kíséri, és az átkristályosítással kis mennyiségű hamisított fehérje eltávolítható. Denaturálás ótafehérjeA kristályosodási folyamat során soha nem találták meg, a fehérje kristályosodása nem csak a tisztaság jele, hanem egy erőteljes iránymutatás a termék természetes állapotának meghatározásához.