Módszereifehérje tisztítás:

A fehérjetisztítás módszere, a fehérje elválasztása és tisztítása, a fehérje az eredeti sejtekből vagy szövetekből oldott állapotban szabadul fel, és az eredeti természetes állapotában marad biológiai aktivitás elvesztése nélkül. Emiatt az anyagnak el kell távolítania az állati és zsírszövetet, a maganyagnak még a maghéj szennyeződését is le kell húznia az olyan anyagoktól, mint a tanninok, az olajos maghoz pedig lehetőleg alacsony forráspontú szerves oldószert kell használni.

1. A fehérjetisztítás módszere, méret- és elválasztási elemzési módszerek: a dialízis és az ultraszűrés ezeket a fehérjéket használja fel olyan molekulák természetén való átjutásra, amelyek nem tudnak átjutni a féligáteresztő membránon; sűrűséggradiens centrifugálás A tápközegben lévő fehérje minősége és sűrűsége nagyobb hatással lesz a részecskékre. Az ülepedési sebesség gyorsabb; A gélszűrés egyfajta oszlopkromatográfia.

2. Az oldhatósági különbség szétválasztása a használat során: elektroprecipitáció, mivel a fehérjemolekulák nettó töltése nulla izoelektromos ponton van, csökkenti a molekulák közötti elektrosztatikus taszítást, könnyen aggregálható, és minimális oldhatóság; sóoldattal használt sóoldat A koncentráció növeli vagy csökkenti a fehérje oldhatóságát.

3. A töltés szétválasztása és elemzése különböző módszerekkel történik, fő tartalom az elektroforézis és az ioncserélő kromatográfia.

4. Módszereifehérje tisztításA fehérjék szelektív adszorpciója és elválasztása a részecskeadszorpció erejét hasznosítja.

5. Az affinitáskromatográfia a ligandumok elválasztásán alapul. Ez a biológiai jellemző lehetővé teszi, hogy a fehérjemolekulák specifikusan kötődjenek, nem pedig kovalensen egy másik, ligandumnak nevezett molekulához.

6. A fehérjetisztítás módszere: Alacsony hőmérsékletű szerves oldószeres kicsapási módszer: A legtöbb fehérje oldhatóságának és kicsapódásának csökkentése érdekében vízzel elegyedő szerves oldószereket, például metanolt, etanolt használjunk. Ez a módszer nagyobb, mint a kisózás felbontása, de a fehérje jobban denaturál. Amikor könnyű, alacsony hőmérsékleten érdemes elvégezni.

Hogyan tisztítsuk megfehérje tisztítás:

Hogyan tisztítsuk meg a fehérjét, a fehérje egy nagy molekula, és a különböző molekulaméretű albumin, van néhány egyszerűbb módszer a fehérje és a kis molekulájú anyagok elkülönítésére, valamint az elválasztott fehérje keverékre. A különböző molekulaméretű fehérjék szétválasztásának fő módszerei a dialízis, az ultraszűrés, a gélszűrés és a centrifugális elválasztás. A dialízist és az ultraszűrést gyakran használják a fehérjeelválasztási eljárásokban. Az elválasztandó dialíziskeveréket féligáteresztő membránból készült dialízistasakba helyezzük, majd a szétválasztáshoz a dializáló oldatba merítjük. Az ultraszűrés az a folyamat, amikor a vizet és más kis molekulákat centrifugális erő vagy nyomás segítségével egy félig áteresztő membránon átengedik, és a fehérjéket befogják a félig áteresztő membránba. Ez a két módszer elkülöníthető a fehérje alapú makromolekuláktól és a szervetlen só alapú kismolekuláktól. Gyakran kisózzák, a sóoldási módszerrel együtt alkalmazzák, vagy bevezethetők e két módszer eltávolítására szervetlen sóoldatokkal végzett kisózás után.

1. Fehérjetisztítás kisózással: A kisózási módszer alapja, hogy a fehérje oldhatósága híg sóoldatban a sókoncentráció növekedésével nő, de ha a sókoncentráció egy bizonyos értékre emelkedik, a vízaktivitás fokozódik. Csökkenés, ami viszont azt okozhatja, hogy egyes fehérjék töltéseket generálnak a molekulaszerkezet felületén keresztül, fokozatosan semlegesül, és a hidratációs membrán fokozatosan tönkremegy, ami végül a rokon fehérjék és molekulák agglomerációját és a különböző oldatokból történő kicsapódást okozhatja.

2. Szerves oldószeres kicsapási módszer: Két oka van annak, hogy csökkentsük a fehérje oldhatóságát szerves oldószerekben: hogyan tisztítsuk a fehérjét sóoldatként dehidratálással; másodszor, a szerves oldószerek dielektromos állandója, mint a víz, csökkenthető Poláros oldószerekben.

3. Fehérjekicsapó ágens: a fehérje, mint kicsapószer, csak az egyik vagy a fehérjekicsapás egyik típusára hat, gyakoriak a lúgos, fehérje-, lektin- és nehézfémek.

4. Polietilénglikol kicsapás: Hogyan tisztítsuk meg a vízben oldódó nemionos polimereketfehérje tisztítás, mint például a polietilénglikol és a nátrium-dextrán-szulfát a fehérjék kicsapására.