Ki metòd pou pirifye asistèm pou pirifye pwoteyin? Li nesesè pou konnen sekans ADN kodaj pwoteyin ki pirifye a, pou wè ki selil oswa tisi ki twò eksprime nan jèn sib la, epi konsepsyon primè jèn yo pou anplifye arf fragman ADN sib la. Sa a se sa yo rele akizisyon fragman jèn sib.

Konstriksyon vektè ekspresyon: Nan vektè ekspresyon prokaryotik oswa ekaryotik ak karakteristik ekspresyon jèn yo jwenn tèt li, pwoblèm prensipal la nan etap sa a se konstwi plasmid la ak jèn nan enterè, ak sistèm ekspresyon an. Tan ekspresyon prokaryotik la kout, pri a ba, ak yon gwo kantite ekspresyon se yon priyorite; jèn nan pa eksprime nan E. coli, ak pwoblèm nan rive nan optimize kodon. An konsiderasyon pi bon aktivite ak pirifikasyon nan pwoteyin nan, chèchè yo te chwazi eksprime nan ledven Pichi. Ekspresyon siksè nan optimize kodon enpòtan.

Ki metòd pou pirifye sistèm pou pirifye pwoteyin lan:

1. Presipitasyon.

2. Elektwoforèz: Yon pwoteyin chaje pi wo oswa pi ba pase pwen izoelektrik li yo epi li ka deplase nan elektwòd negatif la oswa elektwòd pozitif nan jaden elektrik la nan jaden elektrik la. Sipòte fim elektwoforèz, elektwoforèz, elatriye.

3. Dyaliz: Yon metòd ki itilize de sache dyaliz pou separe gwo molekil ak pwoteyin ak ti konpoze òganik molekilè.

4. Kwomatografi: Kwomatografi Ion echanj itilize pwopriyete yo gratis nan pwoteyin. Anba yon pH espesifik, chaj yo ak pwopriyete pwoteyin yo diferan, epi yo ka separe pa kwomatografi echanj iyon. Nan kwomatografi echanj aniyon, pwoteyin ki gen ba pouvwa negatif yo eliye an premye. Van molekilè, ke yo rele tou filtraj jèl. Ti pwoteyin antre nan porositë yo epi yo rete ladan yo pou yon tan long. Gwo pwoteyin pa ka antre nan porositë yo epi koule soti dirèkteman.

5. Ki metòd pou pirifye nansistèm pou pirifye pwoteyin? Ultracentrifugation: Pwoteyin pou pirifye ka itilize pou detèmine pwa molekilè a epi yo ka itilize kòm pwoteyin. Se fòmasyon nan pwoteyin ak dansite diferan separe.